Asid Ursodeoksikolik (UDCA) CAS 128-13-2 Ujian 99.0~101.0%

ASID URSODEOKSIKOLIK
C24H40O4 En 392.6[128-13-2]
DEFINISI
asid 3α,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-oic.
Kandungan: 99.0 peratus hingga 101.0 peratus (bahan kering).
WATAK
Rupa: serbuk putih atau hampir putih.
Keterlarutan: boleh dikatakan tidak larut dalam air, mudah larut dalam etanol (96 peratus), larut sedikit dalam aseton, boleh dikatakan tidak larut dalam metilena klorida.
mp: kira-kira 202 ℃.
PENGENALAN
Pengenalan pertama: A.
Pengenalan kedua: B, C.
A. Spektrofotometri penyerapan inframerah (2.2.24).
Perbandingan: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Periksa kromatogram yang diperoleh dalam ujian untuk kekotoran C.
Keputusan: bintik utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan ujian (b) adalah serupa dalam kedudukan, warna dan saiz dengan bintik utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (a).
C. Larutkan kira-kira 10 mg dalam 1 mL asid sulfurik R. Tambah 0.1 mL larutan formaldehid R dan biarkan selama 5 minit.Tambah 5 mL air R. Suspensi yang diperolehi berwarna biru kehijauan.
UJIAN
Putaran optik khusus (2.2.7): + 58.0 hingga + 62.0 (bahan kering).
Larutkan 0.500 g dalam etanol R kontang dan cairkan kepada 25.0 mL dengan pelarut yang sama.
Kekotoran C. Kromatografi lapisan nipis (2.2.27).
Campuran pelarut: air R, aseton R (10:90 V/V).
Penyelesaian ujian (a).Larutkan 0.40 g bahan yang akan diperiksa dalam campuran pelarut dan cairkan kepada 10 mL dengan campuran pelarut.
Penyelesaian ujian (b).Cairkan 1 mL larutan ujian (a) kepada 10 mL dengan campuran pelarut.
Penyelesaian rujukan (a).Larutkan 40 mg asid ursodeoxycholic CRS dalam campuran pelarut dan cairkan kepada 10 mL dengan campuran pelarut.
Penyelesaian rujukan (b).Larutkan 20 mg asid lithocholic CRS (kekotoran C) dalam campuran pelarut dan cairkan kepada 10.0 mL dengan campuran pelarut (larutan A).Cairkan 2.0 mL larutan ini kepada 100.0 mL dengan campuran pelarut.
Penyelesaian rujukan (c).Kepada 5 mL larutan A tambahkan 10 mg asid chenodeoxycholic CRS (kekotoran A) dan cairkan kepada 50 mL dengan campuran pelarut.
Plat: Plat gel silika TLC R.
Fasa mudah alih: asid asetik glasier R, aseton R, metilenaklorida R (1:30:60 V/V/V).
Permohonan: 5μL.
Perkembangan: lebih 2/3 daripada plat.
Pengeringan: pada 120 ℃ selama 10 min.
Pengesanan: sembur serta-merta dengan larutan 47.6 g/L asid fosfomolibdik R dalam campuran 1 isipadu asid sulfurik R dan 20 isipadu asid asetik glasier R dan panaskan pada suhu 120℃ sehingga bintik biru muncul pada latar belakang yang lebih terang.
Kesesuaian sistem: penyelesaian rujukan (c):
- kromatogram menunjukkan 2 tompok utama yang dipisahkan dengan jelas.
Had: penyelesaian ujian (a):
-kekotoran C: sebarang tompok akibat kekotoran C tidak lebih sengit daripada tompok utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (b) (0.1 peratus).
Bahan berkaitan.Kromatografi cecair (2.2.29).
Campuran pelarut: metanol R, fasa mudah alih (10:90 V/V).
Penyelesaian ujian.Larutkan 60 mg bahan yang akan diperiksa dalam campuran pelarut dan cairkan kepada 20.0 mL dengan campuran pelarut.
Penyelesaian rujukan (a).Larutkan kandungan vial Asid Ursodeoxycholic untuk kesesuaian sistem CRS (mengandungi kekotoran A dan H) dalam 1.0 mL campuran pelarut.
Penyelesaian rujukan (b).Cairkan 1.0 mL larutan ujian kepada 100.0 mL dengan campuran pelarut.Cairkan 1.0 mL larutan ini kepada 10.0 mL dengan campuran pelarut.
Kolum:
-saiz: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm;
-fasa pegun: gel silika oktadecylsilyl bertutup hujung untukkromatografi R (5 μm);
- suhu: 40℃ ± 1℃.
Fasa bergerak: campurkan 30 isipadu asetonitril R, 37 isipadu larutan natrium dihidrogen fosfat R 0.78 g/L dilaraskan kepada pH 3 dengan asid fosforik R, dan 40 isipadu metanol R.
Kadar aliran: 0.8 mL/min.
Pengesanan: refractometer pada 35 ± 1 ℃.
Suntikan: 150 μL.
Jangka masa: 4 kali masa pengekalan Asid Ursodeoksikolik.
Pengenalpastian kekotoran: gunakan kromatogram yang dibekalkan dengan asid ursodeoxycholic untuk kesesuaian sistem CRS dan kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (a) untuk mengenal pasti puncak disebabkan oleh bendasing A dan H.
Pengekalan relatif dengan merujuk kepada asid ursodeoxycholic (masa pengekalan = kira-kira 14 min): kekotoran H = kira-kira 0.9;kekotoran A = kira-kira 2.8.
Kesesuaian sistem: penyelesaian rujukan (a):
-resolusi: minimum 1.5 antara puncak disebabkan oleh kekotoran H dan asid ursodeoxycholic.
Had:
- kekotoran A: tidak lebih daripada 10 kali luas puncak utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (b) (1.0 peratus);
-kotoran tidak ditentukan: bagi setiap kekotoran, tidak lebih daripada luas puncak utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (b) (0.10 peratus);
- jumlah: tidak lebih daripada 15 kali luas puncak utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (b) (1.5 peratus);
-had mengabaikan: 0.5 kali luas puncak utama dalam kromatogram yang diperoleh dengan larutan rujukan (b) (0.05 peratus).
Logam berat (2.4.8): maksimum 20 ppm.
1.0 g mematuhi ujian C. Sediakan larutan rujukan menggunakan 2 mL larutan piawai plumbum (10 ppm Pb) R.
Kerugian pada pengeringan (2.2.32): maksimum 1.0 peratus, ditentukan pada 1.000 g dengan pengeringan dalam ketuhar pada 105℃.
Abu bersulfat (2.4.14): maksimum 0.1 peratus, ditentukan pada 1.0 g.
ASSAY
Larutkan 0.350 g dalam 50 mL etanol (96 peratus) R, sebelum ini dineutralkan kepada 0.2 mL larutan fenolftalein R. Tambah 50 mL air R dan titrasi dengan 0.1 M natrium hidroksida sehingga warna merah jambu diperolehi.
1 mL natrium hidroksida 0.1 M bersamaan dengan 39.26 mg C24H40O4.
KOTOR
Kekotoran tertentu: A, C.
Kekotoran lain yang boleh dikesan (bahan berikut, jika terdapat pada tahap yang mencukupi, dikesan oleh satu atau lain-lain ujian dalam monograf. Ia dihadkan oleh kriteria penerimaan umum untuk kekotoran lain/tidak ditentukan dan/atau oleh Bahan monograf am untuk kegunaan farmaseutikal (2034). Oleh itu, adalah tidak perlu untuk mengenal pasti kekotoran ini untuk menunjukkan pematuhan. Lihat juga 5.10.
Kawalan kekotoran dalam bahan untuk kegunaan farmaseutikal): B, D, E, F, G, H, I.
A. asid 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic (asid chenodeoxycholic),
B. asid 3α,7α,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic (asid kolik),
C. asid 3α-hydroxy-5β-cholan-24-oic (asid litocholic),
D. asid 3α,7β,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic (asid ursocholic),
E. asid 3α,12α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic (asid deoxycholic),
F. asid 3α-hidroksi-7-oxo-5β-cholan-24-oic,
G. metil 3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oat,
H. asid 3β,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oic,
I. 5β-cholane-3α,7β,24-triol.