Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-tert-Butyl-L-Serine သန့်ရှင်းမှု > 98.5% (HPLC)

စစ်ဆေးရေးလုပ်ထုံးလုပ်နည်းများ
1. ပုံပန်းသဏ္ဍာန်
-- အမြင်အာရုံစစ်ဆေးခြင်း။
2. သန့်ရှင်းမှု (HPLC)
2.1 တူရိယာ
စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် အရည် ခရိုမာတိုဂရမ်၊ PDA ထောက်လှမ်းကိရိယာ။
အီလက်ထရောနစ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှူ
2.2 ဓာတ်ကူပစ္စည်း
Acetonitrile (ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အဆင့်)၊ trifluoroacetic acid (ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အဆင့်)
2.3 Chromatographic အခြေအနေများ
2.3.1 ကော်လံ- YMC-ODS-AM၊ 5 μl၊ 250x4.6 မီလီမီတာ
2.3.2 ထောက်လှမ်းလှိုင်းအလျား- INC220nm
စီးဆင်းမှုနှုန်း- 1.0mL/မိနစ်
နမူနာအရွယ်အစား: 10 μl (ကိုးကား)
ညစ်ညမ်း: acetonitrile
ဒေတာစုဆောင်းချိန်- 25.00 မိနစ်
2.4 မိုဘိုင်းအဆင့်ပြင်ဆင်မှု
မိုဘိုင်းအဆင့် A (0.1% trifluoroacetic အက်ဆစ်ရေ): တိကျစွာ စုပ်ယူမှု 2. Oml trifluoroacetic acid ကို ရေ 2000m1 သို့ ရောမွှေပြီး ကောင်းစွာ ရောမွှေပြီး အညစ်အကြေး စွန့်ထုတ်ပါ။
မိုဘိုင်းအဆင့် B (0.1% acetonitrile trifluoroacetic acid)- တိကျသောစုပ်ယူမှု 2.0ml trifluoroacetic acid ကို acetonitrile၊ ရောစပ်ပြီး ချေမှုန်းခြင်းဖြင့် 2000m1 သို့ ရောစပ်ထားသည်။
2.5 မိုဘိုင်းအဆင့်၏ Gradient ပရိုဂရမ်
အချိန် (မိနစ်) A%B%
၀.၀၀ ၉၀ ၁၀
13.00 10 90
18.00 10 90
၁၈.၀၁ ၉၀ ၁၀
23.00 90 ၁၀
2.6 နမူနာဖြေရှင်းချက်ပြင်ဆင်ခြင်း။
0.1g နမူနာကို acetonitrile ဖြင့် ချိန်ဆ၍ အရည်ဖျော်ပြီး 100ml တွင် အရောအနှော၊ အသုံးပြုရန်အတွက် ကောင်းစွာ လှုပ်ခါပါ သို့မဟုတ် တူညီသော အာရုံစူးစိုက်မှု။နမူနာနှစ်ခုကို အပြိုင်ပြင်ဆင်ပါ။
2.7 နမူနာသတ်မှတ်ခြင်း။
အောက်ပါနမူနာလုပ်ထုံးလုပ်နည်းအရ နမူနာကို ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာပါ။
အလွတ်ဖြေဆေး ၁ ကြိမ်ထက် ပိုပါတယ်။
1 ချုပ်ရိုးနမူနာဖြေရှင်းချက် 1#
1 ချုပ်ရိုးနမူနာဖြေရှင်းချက် 2#
2.8 ရလဒ်တွက်ချက်ခြင်း။
2.8.1 peak area normalization method အား လွတ်နေသောနေရာကို နုတ်ခြင်းဖြင့် HPLC ၏ သန့်ရှင်းမှုကို တွက်ချက်ရန် အသုံးပြုခဲ့သည်။
2.8.2 အပ်နှစ်ချောင်း၏ သန့်ရှင်းစင်ကြယ်ခြင်း၏ နှိုင်းရဆိုလိုရင်းသွေဖည်မှု 1% ထက် မပိုစေရပါ။
2.8.3 ထိုးဆေးနှစ်မျိုးလုံး၏ ရလဒ်များသည် လက်ခံမှုစံနှုန်းများနှင့် ကိုက်ညီပါက၊ ပျမ်းမျှ သန့်စင်မှုကို နောက်ဆုံးရလဒ်အဖြစ် ယူသည်။
3၊ အရည်ပျော်မှတ် -- RY-1 အရည်ပျော်မှတ် တူရိယာ
4. အခြောက်ခံမှုရှာဖွေရေးနည်းလမ်းတွင်ဆုံးရှုံးမှု
4.1 တူရိယာများ-
လျှပ်စစ်အပူထိန်းအခြောက်ခံမီးဖို လက်ကျန်တစ်သောင်းတွင် တစ်ခု။
4.2 လုပ်ထုံးလုပ်နည်း-
အဆက်မပြတ်အလေးချိန်နှင့် အခြောက်ခံထားသော မြေခံအဖုံးပါသော ပြားချပ်ချပ်အလေးချိန် ပုလင်းတစ်လုံးတွင် နမူနာ ၁ ဂရမ် (တိကျသော ၀.၀၀၀၁ ဂရမ်အထိ) အလေးချိန်။နမူနာကို အထူ ၁၀ မီလီမီတာထက် မပိုသော အထူရှိသော ပုလင်းအောက်ခြေတွင် အညီအမျှ ဖြန့်ကျက်ထားသင့်ပြီး စဉ်ဆက်မပြတ် အပူချိန်လျှပ်စစ်အခြောက်ခံမီးဖိုတွင် ထည့်ကာ 105-110 ℃ ဖြင့် 3 နာရီကြာ အခြောက်ခံကာ အခြောက်ခံခန်းသို့ ရွှေ့ကာ အအေးခံပါ။ အခန်းအပူချိန်နဲ့ ချိန်တွယ်ပါ။
တွက်ချက်မှု- ခြောက်သွေ့သောကိုယ်အလေးချိန် %= (M1-M2) ÷M×100
နေရာတွင်- M1- အခြောက်ခံခြင်းမပြုမီ နမူနာနှင့် အလေးချိန်ပုလင်း၊ g
M2- အခြောက်ခံပြီးနောက် နမူနာနှင့် အလေးချိန်ပုလင်း၊ g
M: နမူနာဒြပ်ထု၊ ဂရမ်
5. တိကျသောလည်ပတ်မှု
-- တိကျသောလည်ပတ်မှုကို GB/T613-1988 အရ တိုင်းတာသည်။
နမူနာပြင်ဆင်မှု- နမူနာ၏ 0.5000g ကို တိကျစွာ ချိန်တွယ်ပြီး 20ml Ethyl acetate ပါရှိသော သန့်ရှင်းပြီး ခြောက်သွေ့သော 50ml ထုထည်ရှိသော ပုလင်းသို့ လွှဲပြောင်းထားပါသည်။Ethyl acetate ကို ပျော်စေရန် ပုလင်းကို ဖော့ကာ လှုပ်ယမ်းခဲ့သည်။
စမ်းသပ်မှု- မစမ်းသပ်မီ gyroscope ၏ သုညကို ချိန်ညှိပါ၊ ထို့နောက် နမူနာအဖြေဖြင့် စမ်းသပ်ပြွန်ကို ဖြည့်ပါ၊ လှည့်ပတ်မှု၏ လှည့်ပတ်မှုထောင့်ကို မှတ်တမ်းတင်ကာ အောက်ပါဖော်မြူလာကို အသုံးပြု၍ နမူနာ၏ တိကျသောလည်ပတ်မှုကို တွက်ချက်ပါ။
[α]20/D= (r×50) ÷(L×W)
ဘယ်မှာလဲ-
[α]20/D- 25 ℃ တွင် နမူနာဖြေရှင်းချက်၏ တိကျသောလှည့်ခြင်း။
r- နမူနာဖြေရှင်းချက်အတွက် လှည့်ခြင်းကို 25 ℃ တွင် စောင့်ကြည့်သည်။
50- နမူနာဖြေရှင်းချက် ပမာဏ (ml) ကို ပြင်ဆင်ပါ။
w- နမူနာအလေးချိန် (ဆ)
L- အလင်းပြွန်အရှည် (dm)
6. TCL ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
နမူနာပြင်ဆင်မှု- 0.5000g နမူနာကို တိကျစွာ ချိန်တွယ်ပြီး သန့်ရှင်းပြီး ခြောက်သွေ့သော 50ml ထုထည်ရှိသော ပုလင်းသို့ ရွှေ့ကာ 40ml EtoH ကို ပေါင်းထည့်ကာ ပုလင်းကို အရည်ပျော်စေရန် ဖုံးအုပ်ထားပြီး လှုပ်ခါပြီးနောက် EtoH ဖြင့် စကေးသို့ ရောမွှေထားသည်။
ထိန်းချုပ်နမူနာပြင်ဆင်ခြင်း- 0.5000g နမူနာကို တိကျစွာ ချိန်တွယ်ပြီး သန့်ရှင်းခြောက်သွေ့သော 50ml volumetric ပုလင်း၊ ရေ 40ml နှင့် 6N hydrochloric acid 2 drops တို့ကို ပေါင်းထည့်ကာ ပုလင်းကို ဖုံးအုပ်ကာ အရည်ပျော်စေရန် လှုပ်ခါပြီးနောက် စကေးဖြင့် ရောမွှေပါ။ ရေ။ထို့နောက် အထက်ပါအရည်၏ 0.5 ကိုယူပြီး 100ml ပမာဏပုလင်းထဲတွင် အီသနောနှင့် ရောကာ 1.0% အမိုင်နိုအက်ဆစ်ကျန်စကေးရှိသော ရည်ညွှန်းနမူနာတစ်ခုသို့ ရောလိုက်ပါ။
10 မိုက်ခရိုလီတာနမူနာများကို မိုက်ခရိုနမူနာပြဆေးဖြင့် ယူခဲ့ပြီး နမူနာများကို GF254 ဆီလီကွန်ပြားပေါ်တွင် ထားရှိခဲ့သည်။နှိုင်းယှဉ်မှုအမှတ်များအတွက် 5 မိုက်ခရိုလီတာ၊ 10 မိုက်ခရိုလီတာနှင့် 15 မိုက်ခရိုလီတာ ပွိုင့်ပြားများကို အသီးသီးယူဆောင်ခဲ့သည်။
ဖွံ့ဖြိုးဆဲအေးဂျင့်- n-butanol- glacial acetic acid- ရေ = 4:1:1။
အရောင်ဖွံ့ဖြိုးသောအေးဂျင့်- 5% ninhydrin မီသနောဖြေရှင်းချက်။
အရောင်ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးလုပ်ဆောင်မှု- ဦးစွာ၊ တီထွင်ထုတ်လုပ်ထားသော ဆီလီကာဂျယ်ပြားကို အခြောက်ခံရန် ဆံပင်လေမှုတ်စက်ကို အသုံးပြုပါ၊ ထို့နောက် ၎င်းကို 5% ninhydrin methanol ဖြေရှင်းချက်ထဲသို့ နှစ်ပြီး အခြောက်ခံကာ အရောင်ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရန်အတွက် လျှပ်စစ်မီးဖိုတွင် အပူချိန်မြင့်မားစွာဖုတ်ပါ။
တရားစီရင်ခြင်း- ထုတ်ကုန်အရောင်အချိန်၊ အစက်အပြောက်အရွယ်အစား၊ အရောင်အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် ထိန်းချုပ်မှုထုတ်ကုန်နှင့် နှိုင်းယှဉ်ခြင်းကိုကြည့်ပါ၊ ၎င်းသည် ထိုအပိုင်းအခြားအတွင်းရှိကြောင်း ဆုံးဖြတ်ပါ။