Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Assay (HPLC) 97.0~102.0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853.91
Benzenepropanoic အက်ဆစ်၊ -(benzoylamino)--hydroxy-၊ 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahydro-4,11-dihydroxy-4a၊8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl အီစတာ၊ [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-။
(2aR၊4S၊4aS၊6R၊9S၊11S၊12S၊12aR၊12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6၊ 9,11,12,12b-hexahydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-7,11-methano-5H-cyclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-one 6၊ 12b-diacetate၊ 12-benzoate၊ 9-ester ပါရှိသော (2R,3S)-N-benzoyl-3-phenylisoserine [33069-62-4]။
Paclitaxel တွင် 97.0 ရာခိုင်နှုန်းထက်မနည်း နှင့် C47H51NO14 ၏ 102.0 ရာခိုင်နှုန်းထက် မပိုပါ ၊ ရေဓာတ်မရှိသော ၊ သံဓာတ်ကင်းစင်သော အခြေခံဖြင့် တွက်ချက်သည်။
[သတိပြုရန်-Paclitaxel သည် cytotoxic ဖြစ်သည်။Paclitaxel ၏ အမှုန်အမွှားများကို ရှူရှိုက်ပြီး အရေပြားကို ထိတွေ့ခြင်းမှ ကာကွယ်ရန် အထူးဂရုပြုသင့်သည်။]
ထုပ်ပိုးခြင်းနှင့် သိမ်းဆည်းခြင်း- တင်းကျပ်စွာ အလင်းခံနိုင်သော ကွန်တိန်နာများတွင် သိမ်းဆည်းပြီး ထိန်းချုပ်ထားသော အခန်းအပူချိန်တွင် သိမ်းဆည်းပါ။
တံဆိပ်ကပ်ခြင်း- တံဆိပ်ကပ်ခြင်းသည် ပစ္စည်းထုတ်လုပ်ရန်အသုံးပြုသည့် လုပ်ငန်းစဉ်အမျိုးအစားနှင့် ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများကို လိုက်လျောညီထွေဖြစ်စေသော စမ်းသပ်မှုအား ဖော်ပြသည်။
USP ရည်ညွှန်းစံနှုန်း <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Structure ကိုကြည့်ရန် နှိပ်ပါ။
USP Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း A RS
Cephalomannine။
USP Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B RS
10-Deacetyl-7-Epipaclitaxel။
USP Paclitaxel Impurity Mixture RS
Paclitaxel ၏အရောအနှောနှင့် အောက်ပါဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများ- propyl analog၊ cephalomannine၊ sec-butyl analog၊ n-butyl analog၊ benzyl analog၊ baccatin VI၊ pentyl analog နှင့် 7-epipaclitaxel။
ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်း-
A- အနီအောက်ရောင်ခြည် စုပ်ယူမှု <197K>။
B- Assay ပြင်ဆင်မှု၏ chromatogram ရှိ အဓိကအထွတ်အထိပ်၏ ထိန်းသိမ်းထားချိန်သည် Assay တွင်ရရှိထားသည့်အတိုင်း Standard ပြင်ဆင်မှု၏ chromatogram နှင့် ကိုက်ညီပါသည်။
တိကျသောလည်ပတ်မှု 781S- 20 တွင် 49.0 နှင့် 55.0 ကြား၊ ရေဓာတ်မရှိသော၊ အရောအနှောကင်းသောအခြေခံဖြင့် တွက်ချက်သည်။
စမ်းသပ်ဖြေရှင်းချက်- မီသနောတွင် 10 မီလီဂရမ်နှုန်း။
အဏုဇီဝစာရင်းစစ်များ <61> နှင့် သတ်မှတ်ထားသော အဏုဇီဝသက်ရှိများအတွက် စမ်းသပ်မှုများ <62>-စုစုပေါင်း အေရိုးဗစ်အဏုဇီဝအရေအတွက်သည် ဂရမ်လျှင် 100 cfu ထက် မပိုပါ။Staphylococcus aureus၊ Pseudomonas aeruginosa၊ Salmonella မျိုးစိတ်နှင့် Escherichia coli မရှိခြင်းအတွက် စစ်ဆေးမှုများ၏ လိုအပ်ချက်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။
ဘက်တီးရီးယား endotoxins 85- paclitaxel ၏ mg တွင် 0.4 USP Endotoxin ယူနစ်ထက် မပိုပါ။
ရေ၊ နည်းလမ်း Ic <921>- 4.0% ထက် မပိုပါ။
မီးလောင်မှုတွင်ကျန်ရှိသော <281>- 0.2% ထက်မပိုပါ။
လေးလံသောသတ္တုများ၊ Method II <231>: 0.002%။
ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများ-
စမ်းသပ်မှု 1 (သဘာဝရင်းမြစ်များမှ ခွဲထုတ်ထားသည်ဟု တံဆိပ်တပ်ထားသော ပစ္စည်းအတွက်)- ဤစစ်ဆေးမှုနှင့် ကိုက်ညီပါက၊ အညွှန်းသည် USP ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများ စမ်းသပ်မှု 1 နှင့် ကိုက်ညီကြောင်း ညွှန်ပြပါသည်။
Diluent- Assay တွင် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း ပြင်ဆင်ပါ။
ဖြေရှင်းချက် A- စစ်ထုတ်ပြီး ချေဖျက်ထားသော acetonitrile ကို ပြင်ဆင်ပါ။
ဖြေရှင်းချက် B- စစ်ထုတ်ပြီး စွန့်ပစ်ထားသောရေကို ပြင်ဆင်ပါ။
မိုဘိုင်းအဆင့်- Chromatographic စနစ်အတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း Solution A နှင့် Solution B ၏ ပြောင်းလဲနိုင်သော အရောအနှောများကို အသုံးပြုပါ။လိုအပ်ပါက ချိန်ညှိမှုများ ပြုလုပ်ပါ (Chromatography 621 အောက်တွင် System Suitability ကို ကြည့်ပါ)။
စနစ်သင့်လျော်မှုဖြေရှင်းချက်- မီသနောတွင် ပါဝင်သော USP Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း A RS နှင့် USP Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B RS တို့၏ တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသော ပမာဏများကို အရည်ပျော်စေပါသည်။ဤဖြေရှင်းချက်၏ 5.0 mL ကို 50-mL volumetric ဘူးထဲသို့ လွှဲပြောင်းပါ၊ Diluent နှင့် အရောကို ထုထည်သို့ ရောမွှေပါ။
စံဖြေရှင်းချက်-Dissolve၊ sonication ၏အကူအညီဖြင့်၊ Diluent တွင် USP Paclitaxel RS ၏တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသောပမာဏ၊ လိုအပ်ပါက ပမာဏအလိုက်အအေးခံပြီး လိုအပ်ပါက Diluent ဖြင့် Diluent သည် လူသိများသောပါဝင်မှုနှုန်း 5 µg ရှိသောအဖြေတစ်ခုရရှိရန်။
စမ်းသပ်ဖြေရှင်းချက်- Assay ပြင်ဆင်မှုကို အသုံးပြုပါ။
ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်စနစ် (Chromatography <621> ကိုကြည့်ပါ)- အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖ်တွင် 227-nm အာရုံခံကိရိယာနှင့် 5-µm ထုပ်ပိုး L43 ပါဝင်သည့် 4.6-mm × 25-cm ကော်လံတစ်ခု တပ်ဆင်ထားပါသည်။စီးဆင်းမှုနှုန်းသည် တစ်မိနစ်လျှင် 2.6 mL ခန့်ဖြစ်သည်။ကော်လံအပူချိန်ကို 30 တွင် ထိန်းသိမ်းထားသည်။ ခရိုမာတိုဂရပ်ကို အောက်ပါအတိုင်း အစီအစဉ်ဆွဲထားသည်။
အချိန် (မိနစ်) ဖြေရှင်းချက် A (%) ဖြေရှင်းချက် B (%) Elution
0–35 35 65 အထီးကျန်ဆန်သော
35–60 35®80 65®20 မျဉ်းဖြောင့်အရောင်အဆင်း
60–70 80®35 20®65 မျဉ်းဖြောင့်အရောင်အဆင်း
70–80 35 65 isocraticChromatograph စနစ်အတွက် သင့်လျော်မှုဖြေရှင်းချက်၊ လုပ်ငန်းစဉ်အတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ- ဆွေမျိုးထိန်းသိမ်းချိန်များသည် paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း A အတွက် 0.78 နှင့် paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B အတွက် 0.86 ( paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B အတွက် 0.86 ခန့်ဖြစ်သည် စမ်းသပ်ဖြေရှင်းချက်);နှင့် paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း A နှင့် paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B အကြား ကြည်လင်ပြတ်သားမှု၊ R သည် 1.0 ထက် မနည်းပါ။Standard solution ကို Chromatograph လုပ်ပြီး လုပ်ထုံးလုပ်နည်းအတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ- ထပ်တူထိုးဆေးများအတွက် နှိုင်းရစံသွေဖည်မှုသည် 2.0% ထက်မပိုပါ။
လုပ်ထုံးလုပ်နည်း- စမ်းသပ်အဖြေ၏ ထုထည် (15 µL ခန့်) ကို chromatograph ထဲသို့ ထိုးသွင်းပြီး chromatogram ကို မှတ်တမ်းတင်ကာ အဓိက တောင်ထိပ်များအတွက် ဧရိယာများကို တိုင်းတာပါ။ဖော်မြူလာဖြင့် ရယူထားသော Paclitaxel အပိုင်းရှိ အညစ်အကြေးတစ်ခုစီ၏ ရာခိုင်နှုန်းကို တွက်ချက်ပါ-
100 (သောကြာ / rU)
F သည် အညစ်အကြေးအထွတ်အထိပ်တစ်ခုစီအတွက် နှိုင်းရတုံ့ပြန်မှုအချက်ဖြစ်သည် (တန်ဖိုးများအတွက် ဇယား 1 ကိုကြည့်ပါ)။ri သည် လူတစ်ဦးစီ၏ အညစ်အကြေးများအတွက် အထွတ်အထိပ်နေရာဖြစ်သည်။rU သည် paclitaxel အတွက် အထွတ်အထိပ်နေရာဖြစ်သည်။
ဇယား ၁
Relative Retention Time Relative Response Factor (F) Name Limit (%)
0.24 1.29 Baccatin III 0.2
0.53 1.00 10-Deacetylpaclitaxel 0.5
0.57 1.00 7-Xylosylpaclitaxel 0.2
0.78 1.26 Cephalomannine (Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း A) a11
0.78 1.26 2''၊3''-Dihydrocephalomannine a21
0.86 1.00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B) 0.5
1.10 1.00 Benzyl analog3 b12
1.10 1.00 3''၊4''-Dehydropaclitaxel C b22
1.40 1.00 7-Epicephalomannine 0.3
1.85 1.00 7-Epipaclitaxel 0.5
1 ဆက်စပ်ပမာဏများပေါ် မူတည်၍ ဤအထွတ်အထိပ်များအတွက် ဆုံးဖြတ်ချက်သည် မပြည့်စုံနိုင်ပါ။a1 နှင့် a2 ၏ပေါင်းလဒ်သည် 0.5% ထက်မပိုပါ။
2 ဆက်စပ်ပမာဏများပေါ် မူတည်၍ ဤအထွတ်အထိပ်များအတွက် ဆုံးဖြတ်ချက်သည် မပြည့်စုံနိုင်ပါ။b1 နှင့် b2 ၏ပေါင်းလဒ်သည် 0.5% ထက်မပိုပါ။
3 အောက်ဖော်ပြပါ ဓာတုအမည်ကို ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းဖြစ်သည့် benzyl analog-Baccatin III 13-ester (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(2-phenylacetylamino)propanoic acid ပါရှိသည်။
ဇယား 1 တွင် paclitaxel နှင့် ဆက်စပ်သော အညစ်အကြေးများအတွက် ကန့်သတ်ချက်များထက် မကျော်လွန်သည့်အပြင်၊ အခြားသော အညစ်အကြေးများ၏ 0.1% ထက် မပိုသည်ကို တွေ့ရှိရသည်။အညစ်အကြေး စုစုပေါင်း၏ 2.0% ထက် မပိုစေရပါ။
စမ်းသပ်မှု 2 ( semisynthetic လုပ်ငန်းစဉ်မှထုတ်လုပ်သည်ဟုတံဆိပ်တပ်ထားသောပစ္စည်းအတွက်)— ဤစစ်ဆေးမှုနှင့်ကိုက်ညီပါက၊ ၎င်းသည် USP ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများစမ်းသပ်မှု 2 နှင့်ကိုက်ညီကြောင်းတံဆိပ်ကပ်ဖော်ပြသည်။
ဖျော်ရည်- acetonitrile ကိုသုံးပါ။
ဖြေရှင်းချက် A- စစ်ထုတ်ပြီး ချေဖျက်ထားသော ရေနှင့် acetonitrile (3:2) ကို အသုံးပြုပါ။
ဖြေရှင်းချက် B- စစ်ထုတ်ပြီး ချေဖျက်ထားသော acetonitrile ကိုသုံးပါ။
မိုဘိုင်းအဆင့်- Chromatographic စနစ်အတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း Solution A နှင့် Solution B ၏ ပြောင်းလဲနိုင်သော အရောအနှောများကို အသုံးပြုပါ။လိုအပ်ပါက ချိန်ညှိမှုများ ပြုလုပ်ပါ (Chromatography 621 အောက်တွင် System Suitability ကို ကြည့်ပါ)။
စနစ်သင့်လျော်မှုဖြေရှင်းချက်- USP Paclitaxel RS နှင့် USP Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B RS ကို Diluent တွင် အတိအကျ ချိန်တွယ်ထားသော ပမာဏကို ပျော်ဝင်အောင်၊ လိုအပ်ပါက တုန်ခါခြင်းနှင့် အသံထွက်ခြင်း အသီးသီးရှိသော အဖြေတစ်ခုရရှိရန် လိုအပ်ပါက၊
စမ်းသပ်ဖြေရှင်းချက်- တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသော Paclitaxel 10 mg ခန့်ကို 10-mL volumetric ဘူးထဲသို့ လွှဲပြောင်းပါ၊ ပျော်ဝင်ပြီး ထုထည်ဆီသို့ Diluent ဖြင့် အရည်ဖျော်၊ လိုအပ်ပါက လှုပ်ခါပြီး အသံထွက်အောင် ရောမွှေပါ။
Chromatographic စနစ် (Chromatography 621 ကိုကြည့်ပါ)— အရည် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖ်တွင် 227-nm detector နှင့် 3-µm ထုပ်ပိုး L1 ပါဝင်သည့် 4.6-mm × 15-cm ကော်လံတစ်ခု တပ်ဆင်ထားပါသည်။စီးဆင်းမှုနှုန်းသည် တစ်မိနစ်လျှင် 1.2 mL ခန့်ဖြစ်သည်။ကော်လံအပူချိန်ကို 35 တွင် ထိန်းသိမ်းထားသည်။ ခရိုမာတိုဂရပ်ကို အောက်ပါအတိုင်း အစီအစဉ်ချထားသည်။
အချိန် (မိနစ်) ဖြေရှင်းချက် A (%) ဖြေရှင်းချက် B (%) Elution
0-20 100 0 isocratic
20-60 100®10 0®90 linear gradient
60-62 10®100 90®0 linear gradient
62-70 100 0 isocraticChromatograph စနစ်သင့်လျော်မှုဖြေရှင်းချက်၊ လုပ်ငန်းစဉ်အတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ- paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B နှင့် paclitaxel အတွက် ပတ်သက်ဆက်နွယ်မှု 0.94 ခန့်ရှိသည်။paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B နှင့် paclitaxel အကြား ကြည်လင်ပြတ်သားမှု R သည် 1.2 ထက် မနည်းပါ။ထပ်တူထိုးဆေးများအတွက် နှိုင်းရစံသွေဖည်မှုသည် 2.0% ထက်မပိုပါ။
လုပ်ထုံးလုပ်နည်း- Diluent ၏ တူညီသော volumes (15 µL ခန့်) နှင့် Test solution ကို chromatograph ထဲသို့ သီးခြားစီထိုးသွင်းပြီး chromatograms များကို မှတ်တမ်းတင်ကာ တောင်ထိပ်များအားလုံးအတွက် ဧရိယာများကို တိုင်းတာပါ။Diluent ကြောင့် မည်သည့်အထွတ်အထိပ်ကိုမဆို ဂရုမစိုက်ပါ။ဖော်မြူလာဖြင့် ရယူထားသော Paclitaxel အပိုင်းရှိ အညစ်အကြေးတစ်ခုစီ၏ ရာခိုင်နှုန်းကို တွက်ချက်ပါ-
100 (သောကြာ / rs)
F သည် အညစ်အကြေးတစ်ခုစီအတွက် နှိုင်းရတုံ့ပြန်မှုအချက်ဖြစ်သည် (တန်ဖိုးများအတွက် ဇယား 2 ကိုကြည့်ပါ)။ri သည် Test solution မှရရှိသော အညစ်အကြေးတစ်ခုစီအတွက် အထွတ်အထိပ်နေရာဖြစ်သည်။rs သည် Test solution မှရရှိသော peaks များအားလုံး၏ ဧရိယာများ၏ ပေါင်းစုဖြစ်သည်။
ဇယား ၂
Relative Retention Time Relative Response Factor (F) Name Limit (%)
0.11 1.24 10-Deacetylbacatin III 0.1
0.20 1.29 Baccatin III 0.2
0.42 1.39 Photodegradant2 0.1
0.47 1.00 10-Deacetylpaclitaxel 0.5
0.80 1.00 2-Debenzoylpaclitaxel-2-pentenoate 0.7
0.921 1.00 Oxetane လက်စွပ်ကိုဖွင့်ပြီး၊ acetyl နှင့် benzoyl ရွှေ့ပြောင်းခြင်း 2 x1
0.921 1.00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0.941 1.00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း B) x3
1.37 1.00 7-Epipaclitaxel 0.4
1.45 1.00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0.5
1.54 1.00 7-Acetylpaclitaxel 0.6
1.80 1.75 13-Tes-baccatin III 0.1
2.14 1.00 7-Tes-paclitaxel 0.3
1 ဆက်စပ်ပမာဏများပေါ် မူတည်၍ ဤအထွတ်အထိပ်များအတွက် ဆုံးဖြတ်ချက်သည် မပြည့်စုံနိုင်ပါ။x1၊ x2 နှင့် x3 ၏ပေါင်းလဒ်သည် 0.4% ထက်မပိုပါ။
2 အောက်ဖော်ပြပါ ဓာတုအမည်များကို ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများ Photodegradant တွင် သတ်မှတ်ထားသည်။Oxetane လက်စွပ်ကို ဖွင့်လိုက်သည်၊ acetyl နှင့် benzoyl တို့သည် ရွှေ့ပြောင်းသွားသည်;နှင့် 10,13-Bissidechainpaclitaxel-
Photodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihydroxy-4,16,17,17-tetramethyl-8-oxa- 3-oxo-12-phenylcarbonyloxypentacyclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R၊3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoate
Oxetane လက်စွပ်ကို ဖွင့်လိုက်သည်၊ acetyl နှင့် benzoyl သည် ရွှေ့ပြောင်းသွားသည်
(1S၊2S၊3R၊4S၊5S၊7S၊8S၊10R၊13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahydroxy-8,12,15,15-tetramethyl-9-oxo- 4-(phenylcarbonyloxymethyl)tricyclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R၊3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoate
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-ester (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoic acid၊ (2S,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino) ပါရှိသော 10-ester ပရိုပနိုနစ်အက်ဆစ်
ဇယား 2 တွင် paclitaxel နှင့် ဆက်စပ်သော အညစ်အကြေးများအတွက် ကန့်သတ်ချက်များထက် မကျော်လွန်သည့်အပြင်၊ အခြားသော အညစ်အကြေးများ၏ 0.1% ထက် မပိုသည်ကို တွေ့ရှိရသည်။အညစ်အကြေး စုစုပေါင်း၏ 2.0% ထက် မပိုစေရပါ။
စမ်းသပ်မှု 3 (အပင်ဆဲလ်စော်ဖောက်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်မှထုတ်လုပ်သည့်အရာအဖြစ်တံဆိပ်တပ်ထားသောပစ္စည်းအတွက်)— ဤစစ်ဆေးမှုနှင့်ကိုက်ညီပါက၊ ၎င်းသည် USP ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်းများစမ်းသပ်ချက် 3 နှင့်ကိုက်ညီကြောင်း တံဆိပ်ကပ်ဖော်ပြသည်။
ဖြေရှင်းချက် က- စစ်ထုတ်ပြီး ချေဖျက်ထားသော ရေနှင့် acetonitrile (3:2) ကို ပြင်ဆင်ပါ။
ဖြေရှင်းချက် B- စစ်ထုတ်ပြီး ချေဖျက်ထားသော acetonitrile ကို ပြင်ဆင်ပါ။
မိုဘိုင်းအဆင့်- Chromatographic စနစ်အတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း Solution A နှင့် Solution B ၏ ပြောင်းလဲနိုင်သော အရောအနှောများကို အသုံးပြုပါ။လိုအပ်ပါက ချိန်ညှိမှုများ ပြုလုပ်ပါ (Chromatography 621 အောက်တွင် System Suitability ကို ကြည့်ပါ)။
စနစ်သင့်လျော်မှုဖြေရှင်းချက်- USP Paclitaxel အညစ်အကြေးအရောအနှော RS ကို အက်စီတိုနိုက်ထရီလီတွင် ဖျော်ပြီး 1 မီလီဂရမ်လျှင် 1 မီလီဂရမ်ခန့်ရှိသော အာရုံစူးစိုက်မှုရှိသော အဖြေတစ်ခုရရှိရန် လိုအပ်ပါက sonicating ပြုလုပ်ပါ။
ပုံမှန်ဖြေရှင်းချက်- 1 မီလီဂရမ်လျှင် 1 မီလီဂရမ်ခန့်ရှိသော အာရုံစူးစိုက်မှုရှိသော အဖြေတစ်ခုရရှိရန် လိုအပ်ပါက အက်တိုနိုက်ထရီလီတွင် USP Paclitaxel RS ၏ တိကျသောအလေးချိန်ကို ချိန်တွယ်ကာ ပျော်ဝင်ပါ။
စမ်းသပ်ဖြေရှင်းချက်- တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသော Paclitaxel 10 mg ခန့်ကို 10-mL volumetric ဘူးထဲသို့ လွှဲပြောင်းပါ။အက်စီတိုနိုက်ထရစ် (acetonitrile) ကို ထုထည်အဖြစ် အရည်ဖျော်ပြီး လိုအပ်ပါက အသံထွက်အောင် ရောမွှေပါ။
Chromatographic စနစ် (Chromatography 621 ကိုကြည့်ပါ)— အရည် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖ်တွင် 227-nm detector နှင့် 3-µm ထုပ်ပိုး L1 ပါဝင်သည့် 4.6-mm × 15-cm ကော်လံတစ်ခု တပ်ဆင်ထားပါသည်။စီးဆင်းမှုနှုန်းသည် တစ်မိနစ်လျှင် 1.2 mL ခန့်ဖြစ်သည်။chromatograph ကို အောက်ပါအတိုင်း ပရိုဂရမ်ရေးဆွဲထားပါသည်။
အချိန် (မိနစ်) ဖြေရှင်းချက် A (%) ဖြေရှင်းချက် B (%) Elution
0-28 100 0 အထီးကျန်ဆန်သည်။
28-33 100®98 0®2 linear gradient
33–58 98®10 2®90 မျဉ်းဖြောင့်အရောင်အဆင်း
58-60 10 90 isocratic
60-63 10®100 90®0 linear gradient
63-70 100 0 isocraticChromatograph စနစ်သင့်လျော်မှုဖြေရှင်းချက်၊ လုပ်ငန်းစဉ်အတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ- paclitaxel နှင့် benzyl analog အကြား ကြည်လင်ပြတ်သားမှု၊ R သည် 1.8 ထက်မနည်းပါ။Standard solution ကို Chromatograph လုပ်ပြီး လုပ်ထုံးလုပ်နည်းအတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ- ထပ်တူထိုးဆေးများအတွက် နှိုင်းရစံသွေဖည်မှုသည် 2.0% ထက်မပိုပါ။[မှတ်ချက်—အမြင့်မားဆုံးသတ်မှတ်ခြင်း၏ရည်ရွယ်ချက်အတွက်၊ အနီးစပ်ဆုံးဆွေမျိုးထိန်းသိမ်းချိန်များကို ဇယား 3 တွင်ပေးထားသည်။ ဆွေမျိုးထိန်းသိမ်းချိန်များကို Paclitaxel နှင့် တိုင်းတာသည်။]
ဇယား ၃
အမည် Relative Retention Time Limit (%)
Propyl analog1 0.54 0.2
Cephalomannine (Paclitaxel ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း A) 0.76 0.5
sec-Butyl analog2 0.81 0.2
n-Butyl analog3 0.89 0.1
Benzyl analog 1.10 0.4
Baccatin VI 1.23 0.2
Pentyl analog4 1.31 0.2
7-Epipaclitaxel 1.51 0.4
1 အောက်ဖော်ပြပါ ဓာတုဗေဒအမည်အား ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း Propyl analog-Baccatin III 13-ester (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-phenylpropanoic acid ဖြင့် သတ်မှတ်ထားသည်။
2 အောက်ပါဓာတုအမည်အား ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း sec-Butyl analog-Baccatin III 13-ester (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-phenylpropanoic acid ဖြင့် သတ်မှတ်ထားသည်။
3 အောက်ဖော်ပြပါ ဓာတုအမည်အား ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း n-Butyl analog-Baccatin III 13-ester (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-phenylpropanoic အက်ဆစ်ဖြင့် သတ်မှတ်ထားသည်။
4 အောက်ဖော်ပြပါ ဓာတုအမည်အား ဆက်စပ်ဒြပ်ပေါင်း Pentyl analog-Baccatin III 13-ester (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-phenylpropanoic အက်ဆစ်ဖြင့် သတ်မှတ်ထားသည်။
လုပ်ထုံးလုပ်နည်း- စမ်းသပ်အဖြေ၏ ထုထည် (12 µL ခန့်) ကို chromatograph ထဲသို့ ထိုးသွင်းပြီး chromatogram ကို မှတ်တမ်းတင်ကာ တောင်ထိပ်များအားလုံးအတွက် ဧရိယာများကို တိုင်းတာပါ။ဖော်မြူလာဖြင့် ရယူထားသော Paclitaxel အပိုင်းရှိ အညစ်အကြေးတစ်ခုစီ၏ ရာခိုင်နှုန်းကို တွက်ချက်ပါ-
100(ri/rU)
အညစ်အကြေး တစ်မျိုးစီ၏ တုံ့ပြန်မှုသည် ri ဖြစ်၏။rU သည် Test solution မှရရှိသော အထွတ်အထိပ်အားလုံး၏ ဧရိယာများ၏ ပေါင်းစုဖြစ်သည်။ဇယား 3 တွင် paclitaxel နှင့်ပတ်သက်သော အညစ်အကြေးများအတွက် ကန့်သတ်ချက်များထက် မကျော်လွန်သည့်အပြင်၊ အခြားသော အညစ်အကြေး တစ်ခုတည်း၏ 0.1% ထက် မပိုသည်ကို တွေ့ရှိရသည်။အညစ်အကြေး စုစုပေါင်း၏ 2.0% ထက် မပိုစေရပါ။
ဆန်းစစ်ချက်-
Diluent- မီသနောနှင့် အက်ဆစ်အက်ဆစ် (200:1) ရောစပ်ပါ။
မိုဘိုင်းအဆင့်- စစ်ထုတ်ပြီး စွန့်ပစ်ထားသော ရေနှင့် acetonitrile အရောအနှောကို ပြင်ဆင်ပါ (၁၁:၉)။လိုအပ်ပါက ချိန်ညှိမှုများ ပြုလုပ်ပါ (Chromatography 621 အောက်တွင် System Suitability ကို ကြည့်ပါ)။
စံပြင်ဆင်မှု-Dissolve လိုအပ်ပါက sonication ကိုအသုံးပြု၍ Diluent တွင် USP Paclitaxel RS ၏တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသောပမာဏ၊ လိုအပ်ပါက Diluent သည် 1 mg per mL လျှင် 1 မီလီဂရမ်ခန့်ရှိသောအဖြေတစ်ခုရရှိရန် ပမာဏအလိုက် အရောအနှောနှင့် အဆင့်ဆင့်အဖျော့ပါ။
စစ်ဆေးမှုပြင်ဆင်ခြင်း- တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသော Paclitaxel 10 mg ခန့်ကို 10-ml volumetric ဘူးထဲသို့ လွှဲပြောင်းပါ။လိုအပ်ပါက sonication ကိုအသုံးပြု၍ Diluent တွင်ပျော်အောင်ဖျော်ပါ၊ အသံအတိုးအကျယ်အထိ Diluent ဖြင့် ရောမွှေပါ။
ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်စနစ် (Chromatography <621> ကိုကြည့်ပါ)- အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖ်တွင် 227-nm အာရုံခံကိရိယာနှင့် 5-µm ထုပ်ပိုး L43 ပါဝင်သည့် 4.6-mm × 25-cm ကော်လံတစ်ခု တပ်ဆင်ထားပါသည်။စီးဆင်းမှုနှုန်းသည် တစ်မိနစ်လျှင် 1.5 mL ခန့်ဖြစ်သည်။စံပြင်ဆင်မှုကို Chromatograph လုပ်ပြီး လုပ်ထုံးလုပ်နည်းအတွက် ညွှန်ကြားထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ- tailing factor သည် 0.7 နှင့် 1.3 အကြားဖြစ်သည်။ထပ်တူထိုးဆေးများအတွက် နှိုင်းရစံသွေဖည်မှုသည် 1.5% ထက်မပိုပါ။
လုပ်ထုံးလုပ်နည်း- စံပြင်ဆင်မှု နှင့် Assay ပြင်ဆင်မှု၏ chromatograph ၏ တူညီသော volumes (10 µL ခန့်) ကို သီးခြားစီထိုးသွင်းပြီး chromatograms များကို မှတ်တမ်းတင်ကာ အဓိက တောင်ထိပ်များအတွက် ဧရိယာများကို တိုင်းတာပါ။ဖော်မြူလာမှယူသော Paclitaxel ၏အပိုင်းရှိ C47H51NO14 ၏ mg ပမာဏကို တွက်ချက်ပါ-
10C(rU/rS)
C သည် စံပြင်ဆင်မှုတွင် USP Paclitaxel RS ၏ mg per mL တွင် အာရုံစူးစိုက်မှုဖြစ်သည်။နှင့် rU နှင့် rS တို့သည် Assay ပြင်ဆင်မှုနှင့် Standard ပြင်ဆင်မှုမှရရှိသော paclitaxel အတွက် အထွတ်အထိပ်တုံ့ပြန်မှုများဖြစ်သည်။