Orlistat CAS 96829-58-2 API Gewichtsverlies Drug Zuiverheid 98.0~101.5%

Orlistat
C29H53NO5 495,73
1-Leucine, N-formyl-, 1-[(3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl)methyl]dodecylester, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-Formyl-l-leucine, ester met (3S,4S)-3-hexyl-4-[(2S)-2-hydroxytridecyl]-2-oxetanon [96829-58-2].
DEFINITIE
Orlistat bevat NLT 98,0% en NMT 101,5% C29H53NO5, berekend op watervrije, oplosmiddelvrije basis.
IDENTIFICATIE
• A. Infraroodabsorptie <197M>
• B. De retentietijd van de hoofdpiek van de monsteroplossing komt overeen met die van de standaardoplossing, zoals verkregen in de assay.
ONDERZOEK
• Werkwijze
[Opmerking-Vermijd het gebruik van plastic kolven voor de bereiding of insluiting van een oplossing in deze analyse.]
Mobiele fase: acetonitril, fosforzuur en water (860: 0,05: 140)
Standaardoplossing: 0,5 mg/ml USP Orlistat RS in mobiele fase.Direct na bereiding injecteren of bewaren bij 5.
Monsteroplossing: 0,5 mg/ml Orlistat in mobiele fase.Direct na bereiding injecteren of bewaren bij 5.
Chromatografisch systeem
(Zie Chromatografie <621>, Systeemgeschiktheid.)
Modus: LC
Detector: UV 195
Kolom: 3,9 mm × 15 cm;pakking van 4 µm L1
Stroomsnelheid: 1,0 ml/min
Injectiegrootte: 20 µL
Systeem geschiktheid
Voorbeeld: Standaardoplossing
Geschiktheidseisen
Relatieve standaarddeviatie: NMT 2,0%
Analyse
Monsters: standaardoplossing en monsteroplossing
Bereken het percentage orlistat (C29H53NO5) in de ingenomen portie Orlistat:
Resultaat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = piekrespons van de monsteroplossing
rS = piekrespons van de standaardoplossing
CS = concentratie van USP Orlistat RS in de standaardoplossing (mg/ml)
CU = concentratie van Orlistat in de monsteroplossing (mg/ml)
Aanvaardingscriteria: 98,0%-101,5% op watervrije, oplosmiddelvrije basis
ONZUIVERHEDEN
Anorganische onzuiverheden
• Ontstekingsrest <281>: NMT 0,1%
• Zware metalen, methode II <231>: 20 ppm
Organische onzuiverheden
• Procedure 1: Limiet van Orlistat-gerelateerde verbinding A
Standaardoplossing: 0,1 mg/ml USP Orlistat Related Compound A RS in aceton
Monsteroplossing: 50 mg/ml Orlistat in aceton
Chromatografisch systeem
(Zie Chromatografie <621>, Dunnelaagchromatografie.)
Modus: TLC
Adsorbens: 0,25 mm laag chromatografisch silicagelmengsel
Aanbrengvolume: 10 µL
Ontwikkelend oplosmiddelsysteem: tolueen en ethylacetaat (4:1)
Detectieoplossing: Breng 2,5 g fosfomolybdeenzuur en 1 g cerrisulfaat over in een maatkolf van 100 ml, los op in en verdun met methanol tot de maatstreep.
Analyse
Monsters: standaardoplossing en monsteroplossing
Verwijder de plaat en laat deze grondig aan de lucht drogen.Spray de gedroogde plaat met detectie-oplossing en plaats de plaat in een oven op 120 gedurende 30 min.
Acceptatiecriteria: Elke secundaire vlek uit de monsteroplossing die overeenkomt met orlistat-gerelateerde verbinding A is niet intenser dan de overeenkomstige vlek uit de standaardoplossing (0,2%).
• Procedure 2: Limiet van Orlistat-gerelateerde verbinding B
Standaardoplossing: 0,025 mg/ml USP Orlistat Related Compound B RS in methyleenchloride
Monsteroplossing: 50 mg/ml Orlistat in methyleenchloride
Verrijkte monsteroplossing: 50 mg/ml Orlistat in standaardoplossing
Chromatografisch systeem
(Zie Chromatografie <621>, Systeemgeschiktheid.)
Modus: GC
Detector: Vlamionisatie
Kolom: 0,32 mm x 30 m gesmolten silica, gecoat met een 0,25 µm G27 stationaire fase
Kolomtemperatuur: Zie onderstaande temperatuurprogrammatabel.
Begintemperatuur () Temperatuurstijging (/min) Eindtemperatuur () Bewaartijd bij eindtemperatuur (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatuur
Verstuiver: 270
Detector: 280
Dragergas: Helium
Stroomsnelheid: 30 ml/min
Splitverhouding: 10:1
Injectiegrootte: 2 µL
Systeem geschiktheid
Voorbeeld: Standaardoplossing
Geschiktheidseisen
Relatieve standaarddeviatie: NMT 10,0%
Analyse
Monsters: monsteroplossing en verrijkte monsteroplossing
Bereken het percentage orlistat-gerelateerde verbinding B in het ingenomen deel van Orlistat:
Resultaat = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = piekrespons van orlistat-gerelateerde verbinding B uit de monsteroplossing
rSP = piekrespons van orlistat-gerelateerde verbinding B uit de verrijkte monsteroplossing
CS = concentratie van USP Orlistat Related Compound B RS in de standaardoplossing (mg/ml)
CT = concentratie van Orlistat in de verrijkte monsteroplossing (mg/ml)
Aanvaardingscriteria: NMT 0,05% van orlistat-gerelateerde verbinding B wordt gevonden.
• Werkwijze 3
[Opmerking-Vermijd het gebruik van plastic kolven voor de bereiding of insluiting van een oplossing in deze analyse.]
Mobiele fase, standaardoplossing en monsteroplossing: bereid zoals aangegeven in de assay.
Oplossing voor systeemgeschiktheid: 10 µg/ml USP Orlistat RS, 0,1 µg/ml USP Orlistat Related Compound C RS en 0,25 µg/ml USP Orlistat Related Compound D RS in mobiele fase
Chromatografisch systeem
(Zie Chromatografie <621>, Systeemgeschiktheid.)
Ga verder zoals aangegeven in de assay, behalve om de systeemgeschiktheidsoplossing te chromatograferen.
Systeem geschiktheid
Voorbeeld: oplossing voor systeemgeschiktheid
Geschiktheidseisen
Signaal-ruisverhouding: NLT 3 voor de pieken van orlistat-gerelateerde verbinding C en orlistat-gerelateerde verbinding D
Relatieve standaarddeviatie: NMT 10,0% voor de orlistat-piek
Analyse
Monsters: standaardoplossing en monsteroplossing
Bereken het percentage van elke onzuiverheid in het ingenomen deel van Orlistat:
Resultaat = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = piekrespons voor elke afzonderlijke onzuiverheid uit de monsteroplossing
rS = piekrespons van USP Orlistat RS uit de standaardoplossing
CS = concentratie van USP Orlistat RS in de standaardoplossing (mg/ml)
CU = concentratie van Orlistat in de monsteroplossing (mg/ml)
F = relatieve responsfactor zoals gegeven in onzuiverheidstabel 1
Aanvaardingscriteria: zie onzuiverheidstabel 1.
Onzuiverheidstabel 1
Naam Relatieve bewaartijd Relatieve responsfactor Acceptatiecriteria, NMT (%)
Formylleucine 0,10 4,0 0,2
Orlistat-gerelateerde verbinding C 0,13 33 0,05
Orlistat open ring epimerb 0,44 1,0 0,2
Orlistat-gerelateerde verbinding D* 0,90 - Berekend in
Werkwijze 4
Orlistat open ring amidec* 0,90 - Berekend in
Werkwijze 4
Orlistat 1,00 - -
d-Leucine orlistatd 1,18 1,0 0,2
Individuele niet-geïdentificeerde onzuiverheid - 1,0 0,1
* Coeluten in dit LC-systeem, bepaald volgens Procedure 4.
een N-formyl-l-leucine.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formylamino-4-methylpentanoyloxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecaanzuur.
c N-formyl-l-leucine (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-fenyl-R-ethylcarbomoyl]nonyl]-dodecylester.
d N-formyl-d-leucine (S)-1-[[(2S,3S)-3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl]methyl]dodecylester of enantiomeer.
• Procedure 4: Limiet van Orlistat-gerelateerde stof D
Mobiele fase: methanol en water (83:17)
Oplossing voor systeemgeschiktheid: respectievelijk 4 mg/ml USP Orlistat RS en 2,4 µg/ml USP Orlistat Related Compound D RS in acetonitril
Standaardoplossing: 5,0 mg/ml USP Orlistat RS in acetonitril
Monsteroplossing: 5,0 mg/ml Orlistat in acetonitril
Chromatografisch systeem
(Zie Chromatography 621, Systeemgeschiktheid.)
Modus: LC
Detector: 205 nm
Kolom: 4,0 mm × 25 cm;pakking van 5 µm L7
Stroomsnelheid: 0,6 ml/min
Injectiegrootte: 20 µL
Systeem geschiktheid
Voorbeeld: oplossing voor systeemgeschiktheid
Geschiktheidseisen
Signaal-ruisverhouding: NLT 3 voor de orlistat-gerelateerde verbinding D-piek
Relatieve standaarddeviatie: NMT 10,0% voor de orlistat-piek
Analyse
Monsters: standaardoplossing en monsteroplossing
Bereken het percentage van elke onzuiverheid in het ingenomen deel van Orlistat:
Resultaat = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = piekrespons voor elke afzonderlijke onzuiverheid uit de monsteroplossing
rS = piekrespons voor USP Orlistat RS uit de standaardoplossing
CS = concentratie van USP Orlistat RS in de standaardoplossing (µg/ml)
CU = concentratie van Orlistat in de monsteroplossing (µg/ml)
F = relatieve responsfactor zoals verkregen in onzuiverheidstabel 2
Aanvaardingscriteria: zie onzuiverheidstabel 2.
Onzuiverheidstabel 2
Naam Relatieve bewaartijd Relatieve responsfactor Acceptatiecriteria, NMT (%)
Orlistat-gerelateerde verbinding D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1,00 - -
Orlistat open ringamidea 1,25 4,3 0,1
een N-formyl-l-leucine (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-fenyl-R-ethylcarbomoyl]nonyl]-dodecylester.
• Procedure 5: Limiet van Orlistat-gerelateerde verbinding E
Buffer: 0,4 N boraatoplossing, ingesteld op een pH van 10,2
Derivatiseringsmiddel: o-Phthaldehyde (OPA)-oplossing.[Opmerking: als het derivatiseringsmiddel niet in de handel verkrijgbaar is, kan het worden bereid als 1% elk van 3-mercaptopropionzuur en o-ftaaldialdehyde in 0,4 M boraatbufferoplossing.]
Oplossing A: Breng 4,1 g natriumacetaattrihydraat en 40 mg ethyleendiaminetetra-azijnzuur (EDTA) over in een maatkolf van 1 liter.Los op in 950 ml water en breng met 0,1 N natriumhydroxide op een pH van 7,2.Verdun met water tot het volume, voeg 2,5 ml tetrahydrofuran toe en meng.Filteren en ontgassen.
Oplossing B: Breng 2,7 g natriumacetaattrihydraat en 40 mg EDTA over in een maatkolf van 1 liter.Los op in 200 ml water en breng met 0,1 N natriumhydroxide op een pH van 7,2.Voeg 800 ml acetonitril toe, filtreer en ontgas.
Mobiele fase: zie onderstaande verlooptabel.
Tijd (min) Oplossing A (%) Oplossing B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3,3
45 96,7 3,3
Standaardoplossing: Breng een afgewogen hoeveelheid van ongeveer 0,2 mg USP Orlistat Related Compound E RS over in een injectieflacon van 20 ml.Voeg 10 ml 4 N natriumhydroxide toe en sluit de injectieflacon.Verwarm de flacon tot 100 gedurende 1 uur en laat afkoelen tot kamertemperatuur.Breng 2 ml van de resulterende oplossing over in een maatkolf van 50 ml en verdun met water tot de maatstreep.Voeg aan 0,5 ml van deze oplossing 2,0 ml buffer en 0,5 ml derivatiseringsmiddel toe.
Voorbeeldoplossing: Ga verder zoals aangegeven voor de standaardoplossing, maar gebruik in plaats daarvan 25 mg Orlistat ter vervanging van de 0,2 mg USP Orlistat Related Compound E RS.
Chromatografisch systeem
(Zie Chromatografie <621>, Systeemgeschiktheid.)
Modus: LC
Detector: fluorescentie 340 nm (excitatie);450 nm (emissie)
Kolommen
Beschermer: 2,1 mm x 2 cm;50 µm pakking L1
Analytisch: 2,1 mm × 20 cm;verpakking L1
Stroomsnelheid: 0,5 ml/min
Injectiegrootte: 20 µL
Systeem geschiktheid
Voorbeeld: Standaardoplossing
Geschiktheidseisen
Relatieve standaarddeviatie: NMT 6,0% voor de orlistat-gerelateerde verbinding E-piek
Analyse
Monsters: standaardoplossing en monsteroplossing
Bereken het percentage van deze onzuiverheid in de ingenomen portie Orlistat:
Resultaat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = piekrespons voor orlistat-gerelateerde verbinding E in de monsteroplossing
rS = piekrespons voor USP Orlistat Related Compound E RS in de standaardoplossing
CS = concentratie van USP Orlistat Related Compound E RS in de standaardoplossing (mg/ml)
CU = concentratie van Orlistat in de monsteroplossing (mg/ml)
Aanvaardingscriteria
Individuele onzuiverheid: NMT 0,2% van orlistat-gerelateerde verbinding E wordt gevonden.
Totale onzuiverheden: NMT 1,0% van de totale onzuiverheden wordt gevonden, de resultaten voor procedures 1, 2, 3, 4 en 5 worden toegevoegd.
SPECIFIEKE TESTS
• Optische rotatie, specifieke rotatie <781>
Monsteroplossing: 30 mg/ml in gedehydrateerde alcohol
Acceptatiecriteria: tussen -48,0 en -51,0, bij 20
• Waterbepaling, methode Ic <921>: NMT 0,2%
AANVULLENDE VEREISTEN
• Verpakking en opslag: Bewaren in goed gesloten containers tussen 2 en 8℃.
• USP-referentiestandaarden <11>
USP Orlistat RS
USP Orlistat-gerelateerde verbinding A RS
USP Orlistat-gerelateerde verbinding B RS
USP Orlistat-gerelateerde verbinding C RS
USP Orlistat-gerelateerde verbinding D RS
USP Orlistat-gerelateerde verbinding E RS
USP35