Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4-assay (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853.91
benzeenpropaanzuur, -(benzoylamino)-hydroxy-, 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahydro-4,11-dihydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6, 9,11,12,12b-hexahydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-7,11-methano-5H-cyclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-on 6, 12b-diacetaat, 12-benzoaat, 9-ester met (2R,3S)-N-benzoyl-3-fenylisoserine [33069-62-4].
Paclitaxel bevat niet minder dan 97,0 procent en niet meer dan 102,0 procent C47H51NO14, berekend op watervrije, oplosmiddelvrije basis.
[Let op - Paclitaxel is cytotoxisch.Er moet goed op worden gelet dat er geen paclitaxeldeeltjes worden ingeademd en dat de huid hieraan wordt blootgesteld.]
Verpakking en opslag Bewaar in strakke, lichtbestendige containers en bewaar bij gecontroleerde kamertemperatuur.
Etikettering-De etikettering geeft het type proces aan dat is gebruikt om het materiaal te produceren en de test van gerelateerde verbindingen waaraan het materiaal voldoet.
USP-referentienormen <11>-
USP Endotoxine RS
USP Paclitaxel RS Klik om de structuur te bekijken
USP Paclitaxel-gerelateerde verbinding A RS
Cefalomannine.
USP Paclitaxel-gerelateerde verbinding B RS
10-Deacetyl-7-Epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Onzuiverheidsmengsel RS
Mengsel van Paclitaxel en de volgende verwante verbindingen: propyl-analoog, cefalomannine, sec-butyl-analoog, n-butyl-analoog, benzyl-analoog, baccatine VI, pentyl-analoog en 7-epipaclitaxel.
Identificatie-
A: Infraroodabsorptie <197K>.
B: De retentietijd van de hoofdpiek in het chromatogram van het assaypreparaat komt overeen met die in het chromatogram van het standaardpreparaat, zoals verkregen in de assay.
Specifieke rotatie 781S: tussen 49,0 en 55,0 bij 20, berekend op basis van watervrij, oplosmiddelvrij.
Testoplossing: 10 mg per ml, in methanol.
Microbiële tellingstests <61> en Tests voor gespecificeerde micro-organismen <62>-Het totale aerobe microbiële aantal is niet hoger dan 100 kve per g.Het voldoet aan de eisen van de testen op de afwezigheid van Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella-soorten en Escherichia coli.
Bacteriële endotoxinen 85-Het bevat niet meer dan 0,4 USP Endotoxine-eenheid per mg paclitaxel.
Water, methode Ic <921>: niet meer dan 4,0%.
Gloeirest <281>: niet meer dan 0,2%.
Zware metalen, methode II <231>: 0,002%.
Gerelateerde verbindingen-
test 1 (voor materiaal dat is gelabeld als geïsoleerd uit natuurlijke bronnen) - Als het materiaal voldoet aan deze test, geeft de labeling aan dat het voldoet aan USP-gerelateerde verbindingen Test 1.
Verdunningsmiddel Bereid zoals aangegeven in de assay.
Oplossing A - Bereid gefilterd en ontgast acetonitril voor.
Oplossing B- Bereid gefilterd en ontgast water voor.
Mobiele fase - Gebruik variabele mengsels van oplossing A en oplossing B zoals aangegeven voor het chromatografische systeem.Maak indien nodig aanpassingen (zie Systeemgeschiktheid onder Chromatography 621).
Systeemgeschiktheid oplossing - Los nauwkeurig afgewogen hoeveelheden USP Paclitaxel-gerelateerde verbinding A RS en USP Paclitaxel-gerelateerde verbinding B RS op in methanol om een ​​oplossing te verkrijgen met bekende concentraties van ongeveer 10 µg van elk per ml.Breng 5,0 ml van deze oplossing over in een maatkolf van 50 ml, verdun met verdunningsmiddel tot de maatstreep en meng.
Standaardoplossing - Los, met behulp van sonicatie, een nauwkeurig afgewogen hoeveelheid USP Paclitaxel RS op in verdunningsmiddel en verdun kwantitatief, en indien nodig stapsgewijs, met verdunningsmiddel om een ​​oplossing te verkrijgen met een bekende concentratie van ongeveer 5 µg per ml.
Testoplossing - Gebruik het assaypreparaat.
Chromatografisch systeem (zie Chromatografie <621>) - De vloeistofchromatograaf is uitgerust met een 227-nm-detector en een kolom van 4,6 mm × 25 cm die een pakking van 5 µm L43 bevat.De stroomsnelheid is ongeveer 2,6 ml per minuut.De kolomtemperatuur wordt op 30°C gehouden. De chromatograaf is als volgt geprogrammeerd.
Tijd (minuten) Oplossing A (%) Oplossing B (%) Elutie
0–35 35 65 isocratisch
35–60 35®80 65®20 lineair verloop
60–70 80®35 20®65 lineair verloop
70–80 35 65 isocratischChromatografeer de systeemgeschiktheidsoplossing en noteer de piekresponsen zoals aangegeven voor Procedure: de relatieve retentietijden zijn ongeveer 0,78 voor paclitaxel-gerelateerde verbinding A en 0,86 voor paclitaxel-gerelateerde verbinding B (ten opzichte van de retentietijd voor paclitaxel verkregen uit de testoplossing);en de resolutie, R, tussen paclitaxel-gerelateerde verbinding A en paclitaxel-gerelateerde verbinding B is niet minder dan 1,0.Chromatografeer de standaardoplossing en noteer de piekresponsen zoals aangegeven voor Procedure: de relatieve standaarddeviatie voor herhaalde injecties is niet meer dan 2,0%.
Procedure-Injecteer een volume (ongeveer 15 µL) van de testoplossing in de chromatograaf, neem het chromatogram op en meet de gebieden voor de belangrijkste pieken.Bereken het percentage van elke onzuiverheid in de portie Paclitaxel volgens de formule:
100(vr / ru)
waarin F de relatieve responsfactor is voor elke onzuiverheidspiek (zie tabel 1 voor waarden);ri is het piekoppervlak voor elke individuele onzuiverheid;en rU is het piekgebied voor paclitaxel.
tafel 1
Relatieve bewaartijd Relatieve responsfactor (F) Naam Limiet (%)
0,24 1,29 Baccatine III 0,2
0,53 1,00 10-deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xylosylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomannine (Paclitaxel-gerelateerde verbinding A) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihydrocephalomannine a21
0,86 1,00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-gerelateerde verbinding B) 0,5
1,10 1,00 Benzyl analoog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicephalomannine 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Resolutie kan onvolledig zijn voor deze pieken, afhankelijk van de relatieve aanwezige hoeveelheden;de som van a1 en a2 is niet meer dan 0,5%.
2 Resolutie kan onvolledig zijn voor deze pieken, afhankelijk van de relatieve aanwezige hoeveelheden;de som van b1 en b2 is niet meer dan 0,5%.
3 De volgende chemische naam is toegekend aan de verwante verbinding, benzyl-analoog: baccatine III 13-ester met (2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(2-fenylacetylamino)propaanzuur.
Naast het niet overschrijden van de limieten voor paclitaxel-gerelateerde onzuiverheden in tabel 1, wordt niet meer dan 0,1% van enige andere afzonderlijke onzuiverheid aangetroffen;en niet meer dan 2,0% van de totale onzuiverheden wordt gevonden.
test 2 (voor materiaal dat is gelabeld als geproduceerd door een semi-synthetisch proces)— Als het materiaal voldoet aan deze test, geeft de labeling aan dat het voldoet aan USP Related compounds Test 2.
Verdunningsmiddel Acetonitril.
Oplossing A-Gebruik een gefilterd en ontgast mengsel van water en acetonitril (3:2).
Oplossing B - Gebruik gefilterd en ontgast acetonitril.
Mobiele fase - Gebruik variabele mengsels van oplossing A en oplossing B zoals aangegeven voor het chromatografische systeem.Maak indien nodig aanpassingen (zie Systeemgeschiktheid onder Chromatography 621).
Oplossing voor systeemgeschiktheid - Los nauwkeurig afgewogen hoeveelheden USP Paclitaxel RS en USP Paclitaxel Related Compound B RS op in verdunningsmiddel, indien nodig schudden en soniceren om een ​​oplossing te verkrijgen met bekende concentraties van respectievelijk ongeveer 0,96 mg en 0,008 mg per ml.
Testoplossing- Breng ongeveer 10 mg Paclitaxel, nauwkeurig gewogen, over in een maatkolf van 10 ml, los op in en verdun met Verdunningsmiddel tot volume, schud en sonificeer indien nodig, en meng.
Chromatografisch systeem (zie Chromatography 621)— De vloeistofchromatograaf is uitgerust met een 227-nm-detector en een kolom van 4,6 mm × 15 cm die een pakking van 3 µm L1 bevat.De stroomsnelheid is ongeveer 1,2 ml per minuut.De kolomtemperatuur wordt op 35°C gehouden. De chromatograaf is als volgt geprogrammeerd.
Tijd (minuten) Oplossing A (%) Oplossing B (%) Elutie
0-20 100 0 isocratisch
20-60 100®10 0®90 lineair verloop
60-62 10®100 90®0 lineair verloop
62-70 100 0 isocratischChromatografeer de systeemgeschiktheidsoplossing en noteer de piekresponsen zoals aangegeven voor Procedure: de relatieve retentietijden zijn ongeveer 0,94 voor paclitaxel-gerelateerde verbinding B en 1,0 voor paclitaxel;de resolutie, R, tussen paclitaxel-gerelateerde verbinding B en paclitaxel is niet minder dan 1,2;en de relatieve standaarddeviatie voor herhaalde injecties is niet meer dan 2,0%.
Procedure-Injecteer afzonderlijke gelijke volumes (ongeveer 15 µL) van het verdunningsmiddel en de testoplossing in de chromatograaf, neem de chromatogrammen op en meet de oppervlakten voor alle pieken.Negeer eventuele pieken als gevolg van het verdunningsmiddel.Bereken het percentage van elke onzuiverheid in de portie Paclitaxel volgens de formule:
100(vr / rs)
waarin F de relatieve responsfactor is voor elke onzuiverheid (zie Tabel 2 voor waarden);ri is het piekoppervlak voor elke onzuiverheid verkregen uit de testoplossing;en rs is de som van de oppervlakten van alle pieken verkregen uit de testoplossing.
tafel 2
Relatieve bewaartijd Relatieve responsfactor (F) Naam Limiet (%)
0,11 1,24 10-deacetylbaccatine III 0,1
0,20 1,29 Baccatine III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-deacetylpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-debenzoylpaclitaxel-2-pentenoaat 0,7
0,921 1,00 Oxetaanring geopend, acetyl en benzoyl gemigreerd2 x1
0,921 1,00 10-acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-gerelateerde verbinding B) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechain paclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-acetylpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Resolutie kan onvolledig zijn voor deze pieken, afhankelijk van de relatieve aanwezige hoeveelheden;de som van x1, x2 en x3 is niet meer dan 0,4%.
2 De volgende chemische namen zijn toegekend aan de verwante verbindingen Photodegradant;Oxetaanring geopend, acetyl en benzoyl gemigreerd;en 10,13-Bissidechain paclitaxel:
Fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihydroxy-4,16,17,17-tetramethyl-8-oxa- 3-oxo-12-fenylcarbonyloxypentacyclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylcarbonylamino)propanoaat
Oxetaanring ging open, acetyl en benzoyl migreerden
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahydroxy-8,12,15,15-tetramethyl-9-oxo- 4-(fenylcarbonyloxymethyl)tricyclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-een-13-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylcarbonylamino)propanoaat
10,13-Bissidechain paclitaxel
Baccatin III 13-ester met (2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylcarbonylamino)propaanzuur, 10-ester met (2S,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylcarbonylamino )propaanzuur
Naast het niet overschrijden van de limieten voor paclitaxel-gerelateerde onzuiverheden in tabel 2, wordt niet meer dan 0,1% van enige andere afzonderlijke onzuiverheid aangetroffen;en niet meer dan 2,0% van de totale onzuiverheden wordt gevonden.
test 3 (voor materiaal dat is gelabeld als geproduceerd door een fermentatieproces van plantencellen)— Als het materiaal voldoet aan deze test, geeft de labeling aan dat het voldoet aan USP Related compounds Test 3.
Oplossing A-Maak een gefilterd en ontgast mengsel van water en acetonitril (3:2).
Oplossing B Bereid gefilterd en ontgast acetonitril voor.
Mobiele fase - Gebruik variabele mengsels van oplossing A en oplossing B zoals aangegeven voor het chromatografische systeem.Maak indien nodig aanpassingen (zie Systeemgeschiktheid onder Chromatography 621).
Systeemgeschiktheid oplossing - Los USP Paclitaxel Impurity Mixture RS op in acetonitril, sonicatie indien nodig, om een ​​oplossing te verkrijgen met een bekende concentratie van ongeveer 1 mg per ml.
Standaardoplossing - Los een nauwkeurig afgewogen hoeveelheid USP Paclitaxel RS op in acetonitril, soniceer indien nodig, om een ​​oplossing te verkrijgen met een bekende concentratie van ongeveer 1 mg per ml.
Testoplossing- Breng ongeveer 10 mg Paclitaxel, nauwkeurig afgewogen, over in een maatkolf van 10 ml.Oplossen in en verdunnen met acetonitril tot volume, soniceren indien nodig, en mengen.
Chromatografisch systeem (zie Chromatography 621)— De vloeistofchromatograaf is uitgerust met een 227-nm-detector en een kolom van 4,6 mm × 15 cm die een pakking van 3 µm L1 bevat.De stroomsnelheid is ongeveer 1,2 ml per minuut.De chromatograaf is als volgt geprogrammeerd.
Tijd (minuten) Oplossing A (%) Oplossing B (%) Elutie
0-28 100 0 isocratisch
28-33 100®98 0®2 lineair verloop
33–58 98®10 2®90 lineair verloop
58-60 10 90 isocratisch
60-63 10®100 90®0 lineair verloop
63-70 100 0 isocratischChromatografeer de systeemgeschiktheidsoplossing en noteer de piekresponsen zoals aangegeven voor de procedure: de resolutie, R, tussen paclitaxel en benzyl-analoog is niet minder dan 1,8.Chromatografeer de standaardoplossing en noteer de piekresponsen zoals aangegeven voor Procedure: de relatieve standaarddeviatie voor herhaalde injecties is niet meer dan 2,0%.[opmerking—Ten behoeve van piekidentificatie worden de geschatte relatieve retentietijden gegeven in tabel 3. De relatieve retentietijden worden gemeten versus paclitaxel.]
tafel 3
Naam Relatieve bewaartermijn (%)
Propyl analoog1 0,54 0,2
Cefalomannine (Paclitaxel-gerelateerde verbinding A) 0,76 0,5
sec-Butyl analoog2 0,81 0,2
n-butylanaloog3 0,89 0,1
Benzyl-analoog 1,10 0,4
Baccatine VI 1,23 0,2
Pentyl analoog4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 De volgende chemische naam is toegekend aan de verwante verbinding Propyl analoog:Baccatin III 13-ester met (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-fenylpropaanzuur.
2 De volgende chemische naam is toegekend aan de verwante verbinding sec-Butyl-analoog: Baccatine III 13-ester met (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-fenylpropaanzuur.
3 De volgende chemische naam is toegekend aan de verwante verbinding n-Butyl-analoog: Baccatine III 13-ester met (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-fenylpropaanzuur.
4 De volgende chemische naam is toegekend aan de verwante verbinding Pentyl-analogon: Baccatine III 13-ester met (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-fenylpropaanzuur.
Procedure-Injecteer een volume (ongeveer 12 µL) van de testoplossing in de chromatograaf, neem het chromatogram op en meet de oppervlakten voor alle pieken.Bereken het percentage van elke onzuiverheid in de portie Paclitaxel volgens de formule:
100(ri/rU)
waarin ri de reactie is van elke individuele onzuiverheid;en rU is de som van de oppervlakten van alle pieken verkregen uit de testoplossing.Naast het niet overschrijden van de limieten voor paclitaxel-gerelateerde onzuiverheden in tabel 3, wordt niet meer dan 0,1% van enige andere afzonderlijke onzuiverheid aangetroffen;en niet meer dan 2,0% van de totale onzuiverheden wordt gevonden.
Test-
Verdunningsmiddel-Maak een mengsel van methanol en azijnzuur (200:1).
Mobiele fase Bereid een gefilterd en ontgast mengsel van water en acetonitril (11:9).Maak indien nodig aanpassingen (zie Systeemgeschiktheid onder Chromatography 621).
Standaardbereiding - Los, indien nodig met behulp van sonicatie, een nauwkeurig afgewogen hoeveelheid USP Paclitaxel RS op in verdunningsmiddel en verdun kwantitatief, en stapsgewijs indien nodig, met verdunningsmiddel om een ​​oplossing te verkrijgen met een bekende concentratie van ongeveer 1 mg per ml.
Assayvoorbereiding - Breng ongeveer 10 mg Paclitaxel, nauwkeurig afgewogen, over in een maatkolf van 10 ml.Los op in verdunningsmiddel, indien nodig met behulp van sonicatie, verdun met verdunningsmiddel tot volume en meng.
Chromatografisch systeem (zie Chromatografie <621>) - De vloeistofchromatograaf is uitgerust met een 227-nm-detector en een kolom van 4,6 mm × 25 cm die een pakking van 5 µm L43 bevat.De stroomsnelheid is ongeveer 1,5 ml per minuut.Chromatografeer het standaardpreparaat en noteer de piekresponsen zoals aangegeven voor de procedure: de staartfactor ligt tussen 0,7 en 1,3;en de relatieve standaarddeviatie voor herhaalde injecties is niet meer dan 1,5%.
Procedure-Injecteer afzonderlijk gelijke volumes (ongeveer 10 µl) van het standaardpreparaat en het assaypreparaat in de chromatograaf, neem de chromatogrammen op en meet de gebieden voor de belangrijkste pieken.Bereken de hoeveelheid, in mg, C47H51NO14 in de portie Paclitaxel genomen met de formule:
10C(rU / rS)
waarin C de concentratie is, in mg per ml, van USP Paclitaxel RS in het standaardpreparaat;en rU en rS zijn de piekresponsen voor paclitaxel verkregen uit respectievelijk het assaypreparaat en het standaardpreparaat.