Ursodeoxycholzuur (UDCA) CAS 128-13-2 Analyse 99,0~101,0%

URSODEOXYCHOLZUUR
C24H40O4 Meneer 392,6[128-13-2]
DEFINITIE
3α,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-zuur.
Gehalte: 99,0 procent tot 101,0 procent (gedroogde stof).
KARAKTERS
Uiterlijk: wit of bijna wit poeder.
Oplosbaarheid: praktisch onoplosbaar in water, goed oplosbaar in ethanol (96 procent), enigszins oplosbaar in aceton, praktisch onoplosbaar in methyleenchloride.
mp: ongeveer 202℃.
IDENTIFICATIE
Eerste identificatie: A.
Tweede identificatie: B, C.
A. Infraroodabsorptiespectrofotometrie (2.2.24).
Vergelijking: Ursodeoxycholzuur CRS.
B. Onderzoek de chromatogrammen verkregen in de test op onzuiverheid C.
Resultaten: de hoofdvlek in het chromatogram verkregen met testoplossing (b) komt qua positie, kleur en grootte overeen met de hoofdvlek in het chromatogram verkregen met referentieoplossing (a).
C. Los ongeveer 10 mg op in 1 ml zwavelzuur R. Voeg 0,1 ml formaldehyde-oplossing R toe en laat 5 min staan.Voeg 5 ml water R toe. De verkregen suspensie is groenachtig blauw.
TESTEN
Specifieke optische rotatie (2.2.7): + 58,0 tot + 62,0 (gedroogde stof).
Los 0,500 g op in watervrije ethanol R en verdun met hetzelfde oplosmiddel tot 25,0 ml.
Onzuiverheid C. Dunnelaagchromatografie (2.2.27).
Oplosmiddelmengsel: water R, aceton R (10:90 V/V).
Testoplossing (a).Los 0,40 g van de te onderzoeken stof op in het oplosmiddelmengsel en verdun met het oplosmiddelmengsel tot 10 ml.
Testoplossing (b).Verdun 1 ml testoplossing (a) tot 10 ml met het oplosmiddelmengsel.
Referentieoplossing (a).Los 40 mg ursodeoxycholzuur CRS op in het oplosmiddelmengsel en verdun met het oplosmiddelmengsel tot 10 ml.
Referentieoplossing (b).Los 20 mg lithocholzuur CRS (onzuiverheid C) op in het oplosmiddelmengsel en vul aan tot 10,0 ml met het oplosmiddelmengsel (oplossing A).Verdun 2,0 ml van deze oplossing tot 100,0 ml met het oplosmiddelmengsel.
Referentieoplossing (c).Voeg aan 5 ml oplossing A 10 mg chenodeoxycholzuur CRS (onzuiverheid A) toe en verdun tot 50 ml met het oplosmiddelmengsel.
Plaat: TLC silicagelplaat R.
Mobiele fase: ijsazijn R, aceton R, methyleenchloride R (1:30:60 V/V/V).
Toepassing: 5μL.
Ontwikkeling: meer dan 2/3 van de plaat.
Drogen: bij 120℃ gedurende 10 min.
Detectie: direct besproeien met een 47,6 g/L oplossing van fosfomolybdeenzuur R in een mengsel van 1 volumedeel zwavelzuur R en 20 volumedelen ijsazijn R en verhitten tot 120℃ tot er blauwe vlekken verschijnen op een lichtere achtergrond.
Geschiktheid van het systeem: referentieoplossing (c):
- het chromatogram toont 2 duidelijk gescheiden hoofdvlekken.
Limiet: testoplossing (a):
- onzuiverheid C: elke vlek als gevolg van onzuiverheid C is niet intenser dan de hoofdvlek in het chromatogram verkregen met referentieoplossing (b) (0,1 procent).
Gerelateerde substanties.Vloeistofchromatografie (2.2.29).
Oplosmiddelmengsel: methanol R, mobiele fase (10:90 V/V).
Oplossing testen.Los 60 mg van de te onderzoeken stof op in het oplosmiddelmengsel en verdun met het oplosmiddelmengsel tot 20,0 ml.
Referentieoplossing (a).Los de inhoud van een injectieflacon Ursodeoxycholzuur voor systeemgeschiktheid CRS (met onzuiverheden A en H) op in 1,0 ml van het oplosmiddelmengsel.
Referentieoplossing (b).Verdun 1,0 ml van de testoplossing tot 100,0 ml met het oplosmiddelmengsel.Verdun 1,0 ml van deze oplossing tot 10,0 ml met het oplosmiddelmengsel.
Kolom:
-maat: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stationaire fase: end-capped octadecylsilyl silicagel voorchromatografie R (5 urn);
- temperatuur: 40℃ ± 1℃.
Mobiele fase: meng 30 volumes acetonitril R, 37 volumes van een 0,78 g/L oplossing van natriumdiwaterstoffosfaat R aangepast tot pH 3 met fosforzuur R en 40 volumes methanol R.
Stroomsnelheid: 0,8 ml/min.
Detectie: refractometer bij 35 ± 1℃.
Injectie: 150 μL.
Looptijd: 4 keer de retentietijd van ursodeoxycholzuur.
Identificatie van onzuiverheden: gebruik het chromatogram dat is meegeleverd met ursodeoxycholzuur voor systeemgeschiktheid CRS en het chromatogram verkregen met referentieoplossing (a) om de pieken als gevolg van onzuiverheden A en H te identificeren.
Relatieve retentie met betrekking tot ursodeoxycholzuur (retentietijd = ongeveer 14 min): onzuiverheid H = ongeveer 0,9;onzuiverheid A = ongeveer 2,8.
Geschiktheid van het systeem: referentieoplossing (a):
-resolutie: minimaal 1,5 tussen de pieken door onzuiverheid H en ursodeoxycholzuur.
Limieten:
- onzuiverheid A: niet meer dan 10 keer het oppervlak van de hoofdpiek in het chromatogram verkregen met referentieoplossing (b) (1,0 procent);
- niet-gespecificeerde onzuiverheden: voor elke onzuiverheid niet meer dan het oppervlak van de hoofdpiek in het chromatogram verkregen met referentieoplossing (b) (0,10 procent);
- totaal: niet meer dan 15 maal het oppervlak van de hoofdpiek in het chromatogram verkregen met referentieoplossing (b) (1,5 procent);
-negeer limiet: 0,5 keer het oppervlak van de hoofdpiek in het chromatogram verkregen met referentieoplossing (b) (0,05 procent).
Zware metalen (2.4.8): maximaal 20 ppm.
1,0 g voldoet aan test C. Bereid de referentieoplossing voor met 2 ml loodstandaardoplossing (10 ppm Pb) R.
Verlies bij drogen (2.2.32): maximaal 1,0 procent, bepaald op 1.000 g door drogen in een oven bij 105℃.
Sulfaatas (2.4.14): maximaal 0,1 procent, bepaald op 1,0 g.
ONDERZOEK
Los 0,350 g op in 50 ml ethanol (96 procent) R, eerder geneutraliseerd tot 0,2 ml fenolftaleïne-oplossing R. Voeg 50 ml water R toe en titreer met 0,1 M natriumhydroxide tot een roze kleur is verkregen.
1 ml 0,1 M natriumhydroxide komt overeen met 39,26 mg C24H40O4.
ONZUIVERHEDEN
Gespecificeerde onzuiverheden: A, C.
Andere detecteerbare onzuiverheden (de volgende stoffen zouden, indien aanwezig in een voldoende niveau, worden gedetecteerd door een van de tests in de monografie. Ze worden beperkt door het algemene acceptatiecriterium voor andere/niet-gespecificeerde onzuiverheden en/of door de algemene monografie Stoffen voor farmaceutisch gebruik (2034). Het is daarom niet nodig om deze onzuiverheden te identificeren om naleving aan te tonen. Zie ook 5.10.
Controle van onzuiverheden in substanties voor farmaceutisch gebruik): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-zuur (chenodeoxycholzuur),
B. 3α,7α,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-zuur (cholzuur),
C. 3α-hydroxy-5β-cholan-24-zuur (lithocholzuur),
D. 3α,7β,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-zuur (ursocholzuur),
E. 3α,12α-dihydroxy-5β-cholan-24-zuur (deoxycholzuur),
F. 3α-hydroxy-7-oxo-5β-cholan-24-zuur,
G. methyl 3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oaat,
H. 3β,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-zuur,
I. 5β-cholane-3α,7β,24-triol.