Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4-analyse (HPLC) 97,0~102,0 %

Paklitaksel
C47H51NO14 853,91
Benzenpropansyre, -(benzoylamino)-hydroksy-, 6,12b-bis(acetyloksy)-12-(benzoyloksy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahydro-4,11-dihydroksy-4a,8,13,13-tetrametyl-5-okso-7,11-metano-1H-cyklodeka[3,4]benz[1,2-b]okset-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6, 9,11,12,12b-heksahydroksy-4a,8,13,13-tetrametyl-7,11-metano-5H-cyklodeka[3,4]-benz[1,2-b]okset-5-on 6, 12b-diacetat, 12-benzoat, 9-ester med (2R,3S)-N-benzoyl-3-fenylisoserin [33069-62-4].
Paclitaxel inneholder ikke mindre enn 97,0 prosent og ikke mer enn 102,0 prosent av C47H51NO14, beregnet på vannfri, løsningsmiddelfri basis.
[Forsiktig-Paclitaxel er cytotoksisk.Stor forsiktighet bør utvises for å forhindre innånding av partikler av paklitaksel og utsette huden for det.]
Emballasje og lagring - Oppbevar i tette, lysbestandige beholdere og oppbevar ved kontrollert romtemperatur.
Merking-Merkingen angir hvilken type prosess som brukes for å produsere materialet og testen av beslektede forbindelser som materialet overholder.
USP Referansestandarder <11>-
USP Endotoksin RS
USP Paclitaxel RS Klikk for å se struktur
USP Paclitaxel-relatert forbindelse A RS
Cefalomannin.
USP Paclitaxel-relatert forbindelse B RS
10-deacetyl-7-epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Urenhetsblanding RS
Blanding av Paclitaxel og følgende relaterte forbindelser: propylanalog, cefalomannin, sek-butylanalog, n-butylanalog, benzylanalog, baccatin VI, pentylanalog og 7-epipaclitaxel.
Identifikasjon-
A: Infrarød absorpsjon <197K>.
B: Retensjonstiden for hovedtoppen i kromatogrammet til analysepreparatet tilsvarer den i kromatogrammet til standardpreparatet, som oppnådd i analysen.
Spesifikk rotasjon 781S: mellom 49,0 og 55,0 ved 20, beregnet på vannfri, løsningsmiddelfri basis.
Testløsning: 10 mg per ml, i metanol.
Mikrobielle opptellingstester <61> og tester for spesifiserte mikroorganismer <62>-Det totale aerobe mikrobielle antallet overstiger ikke 100 cfu per g.Den oppfyller kravene til testene for fravær av Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella-arter og Escherichia coli.
Bakterielle endotoksiner 85-Det inneholder ikke mer enn 0,4 USP endotoksinenheter per mg paklitaksel.
Vann, metode Ic <921>: ikke mer enn 4,0 %.
Rester ved antennelse <281>: ikke mer enn 0,2 %.
Tungmetaller, Metode II <231>: 0,002 %.
Relaterte forbindelser-
test 1 (for materiale merket som isolert fra naturlige kilder) - Hvis materialet samsvarer med denne testen, indikerer merkingen at det oppfyller USP-relaterte forbindelser Test 1.
Fortynningsmiddel-Forbered som anvist i analysen.
Løsning A-Forbered filtrert og avgasset acetonitril.
Løsning B-Forbered filtrert og avgasset vann.
Mobil fase-Bruk variable blandinger av løsning A og løsning B som anvist for kromatografisystemet.Gjør justeringer om nødvendig (se System egnethet under Kromatografi 621).
Systemegnethetsløsning - Løs opp nøyaktig veide mengder av USP Paclitaxel-relatert forbindelse A RS og USP Paclitaxel-relatert forbindelse B RS i metanol for å oppnå en løsning med kjente konsentrasjoner på ca. 10 µg av hver per ml.Overfør 5,0 mL av denne løsningen til en 50 mL målekolbe, fortynn med Diluent til volum og bland.
Standardløsning - Løs opp, ved hjelp av sonikering, en nøyaktig veid mengde USP Paclitaxel RS i fortynningsmiddel, og fortynn kvantitativt, og trinnvis om nødvendig, med fortynningsmiddel for å oppnå en løsning med en kjent konsentrasjon på ca. 5 µg per ml.
Testløsning - Bruk analysepreparatet.
Kromatografisk system (se Kromatografi <621>)-Væskekromatografen er utstyrt med en 227-nm-detektor og en 4,6 mm × 25-cm kolonne som inneholder 5-µm pakking L43.Strømningshastigheten er ca. 2,6 ml per minutt.Kolonnetemperaturen holdes ved 30°C. Kromatografen programmeres som følger.
Tid (minutter) Løsning A (%) Løsning B (%) Eluering
0–35 35 65 isokratisk
35–60 35®80 65®20 lineær gradient
60–70 80®35 20®65 lineær gradient
70–80 35 65 isokratiskKromatografer systemegnethetsløsningen, og registrer toppresponsene som angitt for Prosedyre: de relative retensjonstidene er ca. 0,78 for paklitakselrelatert forbindelse A og 0,86 for paklitakselrelatert forbindelse B (i forhold til retensjonstiden for paklitaksel oppnådd fra testløsningen);og oppløsningen, R, mellom paklitaksel-relatert forbindelse A og paklitaksel-relatert forbindelse B er ikke mindre enn 1,0.Kromatografer standardløsningen, og registrer toppresponsene som anvist for prosedyre: det relative standardavviket for replikatinjeksjoner er ikke mer enn 2,0 %.
Prosedyre - Injiser et volum (ca. 15 µL) av testløsningen i kromatografen, registrer kromatogrammet og mål arealene for de viktigste toppene.Beregn prosentandelen av hver urenhet i delen av paklitaksel tatt med formelen:
100 (fre/rU)
hvor F er den relative responsfaktoren for hver urenhetstopp (se tabell 1 for verdier);ri er topparealet for hver enkelt urenhet;og rU er topparealet for paklitaksel.
Tabell 1
Relativ oppbevaringstid Relativ responsfaktor (F) Navnegrense (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xylosylpaklitaksel 0,2
0,78 1,26 Cefalomannin (Paclitaxel-relatert forbindelse A) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihydrocefalomannin a21
0,86 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-relatert forbindelse B) 0,5
1,10 1,00 Benzylanalog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicephalomannine 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Oppløsning kan være ufullstendig for disse toppene, avhengig av de relative mengder som er tilstede;summen av a1 og a2 er ikke mer enn 0,5 %.
2 Oppløsning kan være ufullstendig for disse toppene, avhengig av de relative mengder som er tilstede;summen av b1 og b2 er ikke mer enn 0,5 %.
3 Følgende kjemiske navn er tilordnet den relaterte forbindelsen, benzylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-2-hydroksy-3-fenyl-3-(2-fenylacetylamino)propansyre.
I tillegg til å ikke overskride grensene for paklitakselrelaterte urenheter i tabell 1, er det ikke funnet mer enn 0,1 % av noen annen enkelt urenhet;og ikke mer enn 2,0 % av totale urenheter er funnet.
test 2 (for materiale merket som produsert ved en semisyntetisk prosess)— Hvis materialet samsvarer med denne testen, indikerer merkingen at det oppfyller USP-relaterte forbindelser Test 2.
Fortynningsmiddel-Bruk acetonitril.
Løsning A-Bruk en filtrert og avgasset blanding av vann og acetonitril (3:2).
Løsning B-Bruk filtrert og avgasset acetonitril.
Mobil fase-Bruk variable blandinger av løsning A og løsning B som anvist for kromatografisystemet.Gjør justeringer om nødvendig (se System egnethet under Kromatografi 621).
Systemegnethetsløsning - Løs opp nøyaktig veide mengder USP Paclitaxel RS og USP Paclitaxel-relatert forbindelse B RS i fortynningsmiddel, rist og soniker om nødvendig for å oppnå en løsning med kjente konsentrasjoner på henholdsvis ca. 0,96 mg og 0,008 mg per ml.
Testløsning – Overfør omtrent 10 mg paklitaksel, nøyaktig veid, til en 10 ml målekolbe, løs opp i og fortynn med fortynningsmiddel til volum, rist og soniker om nødvendig, og bland.
Kromatografisk system (se kromatografi 621)— Væskekromatografen er utstyrt med en 227-nm-detektor og en 4,6 mm × 15-cm kolonne som inneholder 3-µm pakking L1.Strømningshastigheten er ca. 1,2 ml per minutt.Kolonnetemperaturen holdes ved 35°C. Kromatografen programmeres som følger.
Tid (minutter) Løsning A (%) Løsning B (%) Eluering
0-20 100 0 isokratisk
20-60 100®10 0®90 lineær gradient
60-62 10®100 90®0 lineær gradient
62-70 100 0 isokratiskKromatografer systemegnethetsløsningen, og registrer toppresponsene som angitt for Prosedyre: de relative retensjonstidene er ca. 0,94 for paklitakselrelatert forbindelse B og 1,0 for paklitaksel;oppløsningen, R, mellom paklitaksel-relatert forbindelse B og paklitaksel er ikke mindre enn 1,2;og det relative standardavviket for gjentatte injeksjoner er ikke mer enn 2,0 %.
Prosedyre - Injiser like store volumer (ca. 15 µL) av fortynningsvæsken og testløsningen separat i kromatografen, registrer kromatogrammene og mål arealene for alle toppene.Se bort fra eventuelle topper på grunn av fortynneren.Beregn prosentandelen av hver urenhet i delen av paklitaksel tatt med formelen:
100 (fre/rs)
hvor F er den relative responsfaktoren for hver urenhet (se tabell 2 for verdier);ri er topparealet for hver urenhet oppnådd fra testløsningen;og rs er summen av arealene til alle toppene oppnådd fra testløsningen.
Tabell 2
Relativ oppbevaringstid Relativ responsfaktor (F) Navnegrense (%)
0,11 1,24 10-deacetylbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-deacetylpaklitaksel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoylpaclitaxel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Oksetanring åpnet, acetyl og benzoyl migrert 2 x 1
0,921 1,00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-relatert forbindelse B) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-acetylpaklitaksel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paklitaksel 0,3
1 Oppløsning kan være ufullstendig for disse toppene, avhengig av de relative mengder som er tilstede;summen av x1, x2 og x3 er ikke mer enn 0,4 %.
2 Følgende kjemiske navn er tilordnet de relaterte forbindelsene Photodegradant;Oksetanring åpnet, acetyl og benzoyl migrerte;og 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotonedbrytende
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloksy-5,13-dihydroksy-4,16,17,17-tetrametyl-8-oksa- 3-okso-12-fenylkarbonyloksypentacyklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroksy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanoat
Oksetanring åpnet, acetyl og benzoyl migrerte
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloksy-1,2,4,7-tetrahydroksy-8,12,15,15-tetrametyl-9-okso- 4-(fenylkarbonyloksymetyl)tricyklo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-hydroksy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanoat
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-2-hydroksy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propansyre, 10-ester med (2S,3S)-2-hydroksy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino) )propansyre
I tillegg til å ikke overskride grensene for paklitakselrelaterte urenheter i tabell 2, er det ikke funnet mer enn 0,1 % av noen annen enkelt urenhet;og ikke mer enn 2,0 % av totale urenheter er funnet.
test 3 (for materiale merket som produsert av en plantecellefermenteringsprosess)— Hvis materialet samsvarer med denne testen, indikerer merkingen at det oppfyller USP-relaterte forbindelser Test 3.
Løsning A-Forbered en filtrert og avgasset blanding av vann og acetonitril (3:2).
Løsning B-Forbered filtrert og avgasset acetonitril.
Mobil fase-Bruk variable blandinger av løsning A og løsning B som anvist for kromatografisystemet.Gjør justeringer om nødvendig (se System egnethet under Kromatografi 621).
Systemegnet løsning - Løs opp USP Paclitaxel Urenhetsblanding RS i acetonitril, soniker om nødvendig for å oppnå en løsning med en kjent konsentrasjon på ca. 1 mg per ml.
Standardløsning - Løs opp en nøyaktig veid mengde USP Paclitaxel RS i acetonitril, soniker om nødvendig for å oppnå en løsning med en kjent konsentrasjon på ca. 1 mg per ml.
Testløsning - Overfør omtrent 10 mg paklitaksel, nøyaktig veid, til en 10 ml målekolbe.Løs opp i og fortynn med acetonitril til volum, soniker om nødvendig og bland.
Kromatografisk system (se kromatografi 621)— Væskekromatografen er utstyrt med en 227-nm-detektor og en 4,6 mm × 15-cm kolonne som inneholder 3-µm pakking L1.Strømningshastigheten er ca. 1,2 ml per minutt.Kromatografen programmeres som følger.
Tid (minutter) Løsning A (%) Løsning B (%) Eluering
0-28 100 0 isokratisk
28-33 100®98 0®2 lineær gradient
33–58 98®10 2®90 lineær gradient
58-60 10 90 isokratisk
60-63 10®100 90®0 lineær gradient
63-70 100 0 isokratiskKromatografer systemegnethetsløsningen, og registrer toppresponsene som angitt for Prosedyre: oppløsningen, R, mellom paklitaksel og benzylanalog er ikke mindre enn 1,8.Kromatografer standardløsningen, og registrer toppresponsene som anvist for prosedyre: det relative standardavviket for replikatinjeksjoner er ikke mer enn 2,0 %.[note—For formålet med toppidentifikasjon er de omtrentlige relative retensjonstidene gitt i tabell 3. De relative retensjonstidene er målt versus Paclitaxel.]
Tabell 3
Navn Relativ oppbevaringstidsgrense (%)
Propylanalog1 0,54 0,2
Cefalomannin (Paclitaxel-relatert forbindelse A) 0,76 0,5
sek-butylanalog2 0,81 0,2
n-butylanalog3 0,89 0,1
Benzylanalog 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentylanalog4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Følgende kjemiske navn er tilordnet den relaterte forbindelsen Propylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroksy-3-fenylpropansyre.
2 Følgende kjemiske navn er tilordnet den relaterte forbindelsen sec-Butylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-2-hydroksy-3-(2-metylbutanoylamino)-3-fenylpropansyre.
3 Følgende kjemiske navn er tilordnet den relaterte forbindelsen n-Butylanalog: Baccatin III 13-ester med (2S,3S)-2-hydroksy-3-(pentanoylamino)-3-fenylpropansyre.
4 Følgende kjemiske navn er tilordnet den relaterte forbindelsen Pentylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-3-(heksanoylamino)-2-hydroksy-3-fenylpropansyre.
Prosedyre - Injiser et volum (ca. 12 µL) av testløsningen i kromatografen, registrer kromatogrammet og mål arealene for alle toppene.Beregn prosentandelen av hver urenhet i delen av paklitaksel tatt med formelen:
100 (ri / rU)
der ri er responsen til hver enkelt urenhet;og rU er summen av arealene til alle toppene oppnådd fra testløsningen.I tillegg til å ikke overskride grensene for paklitakselrelaterte urenheter i tabell 3, er det ikke funnet mer enn 0,1 % av noen annen enkelt urenhet;og ikke mer enn 2,0 % av totale urenheter er funnet.
Analyse-
Fortynningsmiddel-Forbered en blanding av metanol og eddiksyre (200:1).
Mobil fase-Forbered en filtrert og avgasset blanding av vann og acetonitril (11:9).Gjør justeringer om nødvendig (se System egnethet under Kromatografi 621).
Standard forberedelse - Løs opp, ved bruk av sonikering om nødvendig, en nøyaktig veid mengde USP Paclitaxel RS i fortynningsmiddel, og fortynn kvantitativt, og trinnvis om nødvendig, med fortynningsmiddel for å oppnå en løsning med en kjent konsentrasjon på ca. 1 mg per ml.
Analyseforberedelse - Overfør omtrent 10 mg paklitaksel, nøyaktig veid, til en 10 ml målekolbe.Løs opp i fortynningsmiddel, bruk sonikering om nødvendig, fortynn med fortynner til volum og bland.
Kromatografisk system (se Kromatografi <621>)-Væskekromatografen er utstyrt med en 227-nm-detektor og en 4,6 mm × 25-cm kolonne som inneholder 5-µm pakking L43.Strømningshastigheten er ca. 1,5 ml per minutt.Kromatografer standardpreparatet, og registrer toppresponsene som angitt for prosedyre: halefaktoren er mellom 0,7 og 1,3;og det relative standardavviket for gjentatte injeksjoner er ikke mer enn 1,5 %.
Prosedyre - Injiser like volumer (ca. 10 µL) av standardpreparatet og analysepreparatet separat i kromatografen, registrer kromatogrammene og mål arealene for hovedtoppene.Beregn mengden, i mg, av C47H51NO14 i delen av paklitaksel tatt med formelen:
10C(rU / rS)
hvori C er konsentrasjonen, i mg per ml, av USP Paclitaxel RS i standardpreparatet;og rU og rS er toppresponsene for paklitaksel oppnådd fra henholdsvis analysepreparatet og standardpreparatet.