Ursodeoksykolsyre (UDCA) CAS 128-13-2-analyse 99,0~101,0 %

URSODEOKSYKOLSYRE
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINISJON
3α,7β-dihydroksy-5β-cholan-24-olsyre.
Innhold: 99,0 prosent til 101,0 prosent (tørket stoff).
TEGN
Utseende: hvitt eller nesten hvitt pulver.
Løselighet: praktisk talt uløselig i vann, fritt løselig i etanol (96 prosent), lett løselig i aceton, praktisk talt uløselig i metylenklorid.
mp: ca 202 ℃.
IDENTIFIKASJON
Første identifikasjon: A.
Andre identifikasjon: B, C.
A. Infrarød absorpsjonsspektrofotometri (2.2.24).
Sammenligning: Ursodeoksycholic Acid CRS.
B. Undersøk kromatogrammene oppnådd i testen for urenhet C.
Resultater: Hovedflekken i kromatogrammet oppnådd med testløsning (b) er lik posisjon, farge og størrelse som hovedflekken i kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (a).
C. Løs opp ca. 10 mg i 1 mL svovelsyre R. Tilsett 0,1 mL formaldehydløsning R og la stå i 5 min.Tilsett 5 mL vann R. Den oppnådde suspensjonen er grønnblå.
TESTER
Spesifikk optisk rotasjon (2.2.7): + 58.0 til + 62.0 (tørket stoff).
Løs opp 0,500 g i vannfri etanol R og fortynn til 25,0 ml med samme løsningsmiddel.
Urenhet C. Tynnsjiktskromatografi (2.2.27).
Løsningsmiddelblanding: vann R, aceton R (10:90 V/V).
Testløsning (a).Løs opp 0,40 g av stoffet som skal undersøkes i løsningsmiddelblandingen og fortynn til 10 ml med løsningsmiddelblandingen.
Testløsning (b).Fortynn 1 mL testløsning (a) til 10 mL med løsningsmiddelblandingen.
Referanseløsning (a).Løs opp 40 mg ursodeoksykolsyre CRS i løsningsmiddelblandingen og fortynn til 10 ml med løsningsmiddelblandingen.
Referanseløsning (b).Løs opp 20 mg litokolsyre CRS (urenhet C) i løsningsmiddelblandingen og fortynn til 10,0 mL med løsningsmiddelblandingen (løsning A).Fortynn 2,0 mL av denne løsningen til 100,0 mL med løsningsmiddelblandingen.
Referanseløsning (c).Til 5 mL løsning A tilsett 10 mg chenodeoksycholsyre CRS (urenhet A) og fortynn til 50 mL med løsningsmiddelblandingen.
Plate: TLC silikagelplate R.
Mobil fase: iseddik R, aceton R, metylenklorid R (1:30:60 V/V/V).
Påføring: 5μL.
Utvikling: over 2/3 av platen.
Tørking: ved 120 ℃ i 10 min.
Påvisning: Spray umiddelbart med en 47,6 g/L løsning av fosfomolybdinsyre R i en blanding av 1 volum svovelsyre R og 20 volumer iseddik R og varm opp til 120 ℃ til blå flekker vises på en lysere bakgrunn.
Systemegnethet: referanseløsning (c):
- kromatogrammet viser 2 tydelig atskilte hovedflekker.
Grense: testløsning (a):
-urenhet C: enhver flekk på grunn av urenhet C er ikke mer intens enn hovedflekken i kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (b) (0,1 prosent).
Relaterte substanser.Væskekromatografi (2.2.29).
Løsningsmiddelblanding: metanol R, mobil fase (10:90 V/V).
Test løsning.Løs opp 60 mg av stoffet som skal undersøkes i løsningsmiddelblandingen og fortynn til 20,0 ml med løsningsmiddelblandingen.
Referanseløsning (a).Løs opp innholdet i et hetteglass med ursodeoksykolsyre for systemegnethet CRS (som inneholder urenheter A og H) i 1,0 ml av løsningsmiddelblandingen.
Referanseløsning (b).Fortynn 1,0 mL av testløsningen til 100,0 mL med løsningsmiddelblandingen.Fortynn 1,0 mL av denne løsningen til 10,0 mL med løsningsmiddelblandingen.
Kolonne:
-størrelse: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stasjonær fase: endekappet oktadecylsilyl silikagel forkromatografi R (5 μm);
- temperatur: 40℃ ± 1℃.
Mobil fase: bland 30 volumer acetonitril R, 37 volumer av en 0,78 g/L løsning av natriumdihydrogenfosfat R justert til pH 3 med fosforsyre R, og 40 volumer metanol R.
Strømningshastighet: 0,8 ml/min.
Deteksjon: refraktometer ved 35 ± 1 ℃.
Injeksjon: 150 μL.
Kjøretid: 4 ganger retensjonstiden for ursodeoksykolsyre.
Identifikasjon av urenheter: bruk kromatogrammet som følger med ursodeoksykolsyre for systemegnethet CRS og kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (a) for å identifisere toppene på grunn av urenheter A og H.
Relativ retensjon med referanse til ursodeoksykolsyre (retensjonstid = ca. 14 min): urenhet H = ca. 0,9;urenhet A = ca. 2,8.
Systemegnethet: referanseløsning (a):
-oppløsning: minimum 1,5 mellom toppene på grunn av urenhet H og ursodeoksykolsyre.
Grenser:
- urenhet A: ikke mer enn 10 ganger arealet av hovedtoppen i kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (b) (1,0 prosent);
-uspesifiserte urenheter: for hver urenhet, ikke mer enn arealet av hovedtoppen i kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (b) (0,10 prosent);
- totalt: ikke mer enn 15 ganger arealet av hovedtoppen i kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (b) (1,5 prosent);
-se bort fra grense: 0,5 ganger arealet av hovedtoppen i kromatogrammet oppnådd med referanseløsning (b) (0,05 prosent).
Tungmetaller (2.4.8): maksimalt 20 ppm.
1,0 g samsvarer med test C. Forbered referanseløsningen med 2 mL blystandardløsning (10 ppm Pb) R.
Tap ved tørking (2.2.32): maksimalt 1,0 prosent, bestemt på 1.000 g ved tørking i ovn ved 105 ℃.
Sulfat aske (2.4.14): maksimalt 0,1 prosent, bestemt på 1,0 g.
ANALYSE
Løs opp 0,350 g i 50 ml etanol (96 prosent) R, tidligere nøytralisert til 0,2 ml fenolftaleinløsning R. Tilsett 50 ml vann R og titrer med 0,1 M natriumhydroksid til en rosa farge oppnås.
1 mL 0,1 M natriumhydroksid tilsvarer 39,26 mg C24H40O4.
URenheter
Spesifiserte urenheter: A, C.
Andre påvisbare urenheter (følgende stoffer vil, hvis de er tilstede i et tilstrekkelig nivå, bli påvist ved en eller annen av testene i monografien. De er begrenset av det generelle akseptkriteriet for andre/uspesifiserte urenheter og/eller av den generelle monografien Stoffer for farmasøytisk bruk (2034) Det er derfor ikke nødvendig å identifisere disse urenhetene for å demonstrere samsvar Se også 5.10.
Kontroll av urenheter i stoffer for farmasøytisk bruk): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihydroksy-5β-cholan-24-oic acid (chenodeoxycholsyre),
B. 3α,7α,12α-trihydroksy-5β-cholan-24-oic acid (cholsyre),
C. 3α-hydroksy-5β-cholan-24-olsyre (litocholsyre),
D. 3α,7β,12α-trihydroksy-5β-cholan-24-oic acid (ursocholsyre),
E. 3α,12α-dihydroksy-5β-cholan-24-oic acid (deoksycholsyre),
F. 3α-hydroksy-7-okso-5β-cholan-24-olsyre,
G. metyl 3α,7β-dihydroksy-5β-cholan-24-oat,
H. 3β,7β-dihydroksy-5β-cholan-24-olsyre,
I. 5β-cholan-3a,7β,24-triol.