Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-tert-butylo-L-seryna Czystość > 98,5% (HPLC)

Procedury kontrolne
1. Wygląd
-- Oględziny
2. Czystość (HPLC)
2.1 Przyrząd
Wysokosprawna chromatografia cieczowa, detektor PDA.
Elektroniczna waga analityczna
2.2 Odczynnik
Acetonitryl (czystość chromatograficzna), kwas trifluorooctowy (czystość chromatograficzna)
2.3 Warunki chromatograficzne
2.3.1 Kolumna: YMC-ODS-AM, 5 μl, 250x4,6 mm
2.3.2 Długość fali wykrywania: INC220nm
Natężenie przepływu: 1,0 ml/min
Wielkość próbki: 10 μl (odniesienie)
Rozcieńczalnik: acetonitryl
Czas zbierania danych: 25.00 min
2.4 Przygotowanie fazy ruchomej
Faza ruchoma A (0,1% woda z kwasem trifluorooctowym): precyzyjna absorpcja 2. Rozcieńczyć 0 ml kwasu trifluorooctowego wodą do 2000 ml, dobrze wymieszać i odgazować;
Faza ruchoma B (0,1% acetonitrylo-kwas trifluorooctowy): precyzyjna absorpcja 2,0 ml kwasu trifluorooctowego rozcieńczono do 2000 ml acetonitrylem, zmieszano i odgazowano;
2.5 Program gradientowy fazy ruchomej
Czas (min) A% B%
0,00 90 10
13.00 10 90
18.00 10 90
18.01 90 10
23.00 90 10
2.6 Przygotowanie roztworu próbki
Odważyć i rozpuścić 0,1 g próbki w acetonitrylu i rozcieńczyć do 100 ml, dobrze wstrząsnąć przed użyciem lub do tego samego stężenia.Przygotuj równolegle dwie próbki.
2.7 Oznaczanie próbki
Przeanalizuj próbkę zgodnie z następującą procedurą pobierania próbek:
Więcej niż 1 wstrzyknięcie ślepej próby
1 próbka roztworu ściegu 1#
1 próbka roztworu ściegu 2#
2.8 Obliczenie wyniku
2.8.1 Metodę normalizacji powierzchni pików zastosowano do obliczenia czystości HPLC przez odjęcie pustej przestrzeni.
2.8.2 Względne średnie odchylenie czystości dwóch igieł nie powinno przekraczać 1%
2.8.3 Jeżeli wyniki obu nastrzyków spełniają kryteria akceptacji, jako wynik końcowy przyjmuje się średnią czystość.
3, temperatura topnienia-przyrząd do pomiaru temperatury topnienia RY-1
4. Metoda wykrywania strat przy suszeniu
4.1 Instrumenty:
Elektryczna suszarka z termostatem, jedna na dziesięć tysięcy równowagi.
4.2 Procedura:
W naczyniu wagowym płaskim ze szlifowaną nakładką ustną o stałej masie i przesuszeniu odważyć 1 gram próbki (z dokładnością do 0,0001 grama).Próbkę należy równomiernie rozprowadzić na dnie naczynia ważącego o grubości nie większej niż 10 mm, umieścić w suszarce elektrycznej o stałej temperaturze, suszyć w temperaturze 105-110 ℃ przez 3 godziny, a następnie przenieść do suszarni, schłodzić do temperatury pokojowej i zważyć.
Obliczenie: Ubytek suchej masy %= (M1-M2) ÷M×100
Gdzie: M1: masa próbki i szalki przed suszeniem, g
M2: Masa próbki i naczynka wagowego po wysuszeniu, g
M: Masa próbki, gram
5. Specyficzna rotacja
-- Skręcalność właściwa jest mierzona zgodnie z GB/T613-1988
Przygotowanie próbki: 0,5000 g próbki dokładnie zważono i przeniesiono do czystej i suchej butelki miarowej o pojemności 50 ml zawierającej 20 ml octanu etylu.Butelkę zakorkowano i wstrząśnięto w celu rozpuszczenia octanu etylu.
Test: Dostosuj zero żyroskopu przed testem, następnie napełnij probówkę roztworem próbki, zapisz kąt obrotu odchylenia i oblicz właściwy obrót próbki za pomocą następującego wzoru.
[α]20/D= (r×50) ÷(L×W)
Gdzie:
[α]20/D: Skręcalność właściwa roztworu próbki przy 25℃
r: Rotacja obserwowana przy 25 ℃ dla roztworu próbki
50: Przygotuj objętość roztworu próbki (ml)
w: Masa próbki (g)
L: Długość tuby optycznej (dm)
6. Analiza TCL
Przygotowanie próbki: 0,5000 g próbki dokładnie zważono i przeniesiono do czystej i suchej butelki miarowej o pojemności 50 ml, dodano 40 ml EtoH, butelkę zakorkowano i wstrząsano do rozpuszczenia, a następnie rozcieńczono EtoH do skali.
Przygotowanie próbki kontrolnej: Próbkę o masie 0,5000 g dokładnie odważono i przeniesiono do czystej i suchej butelki miarowej o pojemności 50 ml, dodano 40 ml wody i 2 krople 6N kwasu solnego, butelkę zakorkowano i wstrząsano do rozpuszczenia, a następnie rozcieńczono do skali za pomocą woda.Następnie weź 0,5 powyższej cieczy i rozcieńcz ją etanolem w butelce o pojemności 100 ml do próbki referencyjnej z 1,0% skalą pozostałości aminokwasów.
Pobrano 10 mikrolitrowych próbek za pomocą strzykawki do mikropróbkowania i próbki umieszczono na silikonowej płytce GF254.Płytki punktowe 5 mikrolitrów, 10 mikrolitrów i 15 mikrolitrów pobrano odpowiednio jako punkty porównawcze.
Substancja rozwijająca: n-butanol: lodowaty kwas octowy: woda =4:1:1.
Środek wywołujący kolor: 5% roztwór metanolu ninhydryny.
Operacja wywoływania koloru: najpierw użyj suszarki do włosów, aby wysuszyć rozwiniętą płytkę z żelem krzemionkowym, następnie zanurz ją w 5% metanolowym roztworze ninhydryny, następnie wysusz suszarką i piecz w wysokiej temperaturze w piecu elektrycznym w celu uzyskania koloru.
Ocena: spójrz na czas zabarwienia produktu, rozmiar plamki, stężenie koloru i porównaj z produktem kontrolnym, osądź, że mieści się on w tym zakresie.