Test L-tryptofanu CAS 73-22-3 (H-Trp-OH) 98,5 ~ 101,5% Fabryka Wysoka jakość

L-tryptofan (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) Metoda testowa AJI 97
Identyfikacja: Porównaj widmo absorpcji w podczerwieni próbki z widmem wzorca metodą krążkową z bromkiem potasu.
Skręcalność właściwa [α]20/D: Suszona próbka, C=1, H2O rozpuszcza się przez ogrzewanie
Stan roztworu (przepuszczalność): 0,5 g w 20 ml 2 mol/L HCl, spektrofotometr, 430 nm, grubość kuwety 10 mm.
Chlorek (Cl): 0,7 g, A-1, odn.: 0,40 ml 0,01 mol/L HCl
Amon (NH4): B-2
Siarczan (SO4): 1,2 g, (1), ref: 0,50 ml 0,005 mol/L H2SO4
Żelazo (Fe): 0,75 g, (2), odn.: 1,5 ml Iron Std.(0,01 mg/ml)
Metale ciężkie (Pb): 2,0 g, (4), odn.: 2,0 ml Pb Std.(0,01 mg/ml)
Arsen (As2O3): 2,0 g, (1), odn.: 2,0 ml As2O3 Std.
Inne aminokwasy: H2O, rozpuścić przez ogrzanie (40 ℃) Próbka testowa: 50 μg, A-6-a, kontrola: L-Trp 0,25 μg
Straty podczas suszenia: w 105 ℃ przez 3 godziny.
Pozostałości po prażeniu (zasiarczone): test AJI 13
Analiza: Suszona próbka, 200 mg, (1), 3 ml kwasu mrówkowego, 50 ml kwasu octowego lodowatego, 0,1 mol/L HCLO4 1 ml=20,423 mg C11H12N2O2
Test pH: 1,0 g w 100 ml H2O

L-tryptofan (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) Metoda testowa USP35
DEFINICJA
Tryptofan zawiera 98,5% NLT i 101,5% NMT C11H12N2O2, jako L-tryptofan, w przeliczeniu na suchą masę.
IDENTYFIKACJA
A. ABSORPCJA PODCZERWIENI <197K>
ANALIZA
PROCEDURA
Roztwór próbki: Umieścić 200 mg tryptofanu w kolbie o pojemności 125 ml.Rozpuścić w mieszaninie 3 ml kwasu mrówkowego i 50 ml lodowatego kwasu octowego.
Analiza: Miareczkować 0,1 N kwasem nadchlorowym VS, wyznaczając potencjometrycznie punkt końcowy.Wykonaj ślepą próbę i wprowadź niezbędne poprawki (patrz Miareczkowanie <541>).Każdy ml 0,1 N kwasu nadchlorowego odpowiada 20,42 mg C11H12N2O2.
Kryteria akceptacji: 98,5% ~ 101,5% w przeliczeniu na suchą masę
ZANIECZYSZCZENIA
Zanieczyszczenia nieorganiczne
POZOSTAŁOŚĆ PO ZAPŁONIE <281>: NMT 0,1%
CHLOREK I SIARCZAN, Chlor <221>: Porcja 0,73 g zawiera nie więcej chlorków niż odpowiada 0,50 ml 0,020 N kwasu solnego (0,05%).[UWAGA- Delikatnie podgrzej preparat próbki, aby się rozpuścił, jeśli to konieczne.]
CHLOREK I SIARCZAN, Siarczan <221>: Porcja 0,33 g zawiera nie więcej siarczanów niż odpowiada 0,10 ml 0,020 N kwasu siarkowego (0,03%).[UWAGA-Jeżeli to konieczne, delikatnie podgrzej preparat próbki, aby się rozpuścił.
ŻELAZO <241>: NMT 30ppm
METALE CIĘŻKIE, metoda II <231>: NMT 15ppm
Zanieczyszczenia organiczne
PROCEDURA 1
Roztwór A: Kwas trifluorooctowy w wodzie (1 ml/l)
Roztwór B: Kwas trifluorooctowy w roztworze acetonitrylu i wody (80:20) (1 ml/l roztworu kwasu trifluorooctowego)
Roztwór wzorcowy: 1,0 mg/L każdego z USP tryptofanu pokrewnego związku A RS i USP tryptofanu pokrewnego związku B RS w wodzie
Roztwór próbki: 10,0 mg/ml tryptofanu w wodzie
Roztwór sprawdzający zgodność systemu: 1,0 mg/l związku B RS USP pokrewnego tryptofanowi w wodzie
Faza ruchoma: patrz tabela gradientów poniżej.

System chromatograficzny (Patrz Chromatografia <621>, Odpowiedniość systemu).
Tryb: LC
Detektor: UV 220 nm
Kolumna: 4,6 mm × 25 cm;Pakowanie 5 µm L1
Temperatura kolumny: 30°
Natężenie przepływu: 1 ml/min
Wielkość iniekcji: 20 µl
Dopasowanie systemu
Próbka: Rozwiązanie dotyczące przydatności systemu
Wymóg przydatności
Względne odchylenie standardowe: NMT 5,0%
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Oblicz procent każdego nieokreślonego zanieczyszczenia w porcji pobranego tryptofanu:
Wynik = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = powierzchnia piku każdego nieokreślonego zanieczyszczenia w roztworze próbki
rS = powierzchnia piku związku B pokrewnego tryptofanowi w roztworze wzorcowym
CS = stężenie USP tryptofanowego związku B RS w roztworze wzorcowym (µg/mL)
CU = stężenie tryptofanu w roztworze próbki (µg/mL)
Kryteria przyjęcia
Całkowita ilość zanieczyszczeń 1: NMT 0,01% całkowitej ilości zanieczyszczeń eluujących przed pikiem tryptofanu
Całkowita ilość zanieczyszczeń 2: NMT 0,03% całkowitej ilości zanieczyszczeń eluujących po piku tryptofanu.[UWAGA-wykluczyć pik dla związku B związanego z tryptofanem.]
Związek A pokrewny tryptofanowi: Jeśli w roztworze próbki obserwuje się pik związku A pokrewnego tryptofanowi, należy wykonać test dla procedury 2: Limit związku A pokrewnego tryptofanowi, poniżej.
PROCEDURA 2: LIMIT ZWIĄZKU POKREWNEGO Z TRYPTOFANEM A
Roztwór A: 18 mM jednozasadowy fosforan sodu, przesączony i odgazowany (pH 2,5) i acetonitryl (9:1)
Roztwór B: 10 mM jednozasadowy fosforan sodu, przesączony i odgazowany (pH 2,5) i acetonitryl (1:1)
Roztwór C: Acetonitryl w wodzie (7:3)
Roztwór wzorcowy: 0,1 mg/l USP tryptofanowego związku A RS w wodzie
Roztwór próbki: 10,0 mg/ml tryptofanu w wodzie
Faza ruchoma: patrz tabela gradientów poniżej

Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia <621>, Odpowiedniość systemu.)
Tryb: LC
Detektor: UV 216 nm
Kolumna: 3,9 mm × 15 cm;Pakowanie 5 µm L1
Temperatura kolumny: 30°
Natężenie przepływu: 1 ml/min
Wielkość iniekcji: 20 µl
Dopasowanie systemu
Próbka: Roztwór wzorcowy
Wymóg przydatności
Względne odchylenie standardowe: NMT 5,0%
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Oblicz procent związku związanego z tryptofanem
A w porcji tryptofanu:
Wynik = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = powierzchnia piku związku A pokrewnego tryptofanowi w roztworze próbki
rS = powierzchnia piku związku A pokrewnego tryptofanowi w roztworze standardowym
CS = stężenie USP związku pokrewnego tryptofanowi A RS w roztworze wzorcowym (µg/mL)
CU = stężenie tryptofanu w roztworze próbki (µg/mL)
Kryteria akceptacji: NMT 10 ppm
KONKRETNE TESTY
OBRÓT OPTYCZNY, Skręt właściwy <781S>: -29,4° do -32,8°
Roztwór próbki: 10 mg/ml w wodzie.[UWAGA- Delikatnie podgrzej do rozpuszczenia, jeśli to konieczne.]
PH <791>: 5,5~7,0, w roztworze (1 na 100)
STRATA PODCZAS SUSZENIA <731>: Suszyć próbkę w temperaturze 105° przez 3 godziny: traci ona 0,3% NMT swojej wagi.
DODATKOWE WYMAGANIA
OPAKOWANIE I PRZECHOWYWANIE: Przechowywać w dobrze zamkniętych pojemnikach
STANDARDY REFERENCYJNE USP <11>
USP L-tryptofan RS
USP związek pokrewny tryptofanowi A RS
Kwas 3,3′-[etylidenobis(1H-indol-1,3-diylo)]bis[2S)-2-aminopropanowy.C24H26N4O4 432,49
USP związek pokrewny tryptofanowi B RS
Kwas 2-acetamido-3-(1H-indol-3-ilo)propanowy.C13H14N2O3 246,3