Orlistat CAS 96829-58-2 API Czystość leku odchudzającego 98,0 ~ 101,5%

orlistat
C29H53NO5 495,73
1-leucyna, N-formylo-, 1-[(3-heksylo-4-okso-2-oksetanylo)metylo]dodecyloester, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-Formylo-1-leucyna, ester z (3S,4S)-3-heksylo-4-[(2S)-2-hydroksytridecylo]-2-oksetanonem [96829-58-2].
DEFINICJA
Orlistat zawiera 98,0% NLT i 101,5% NMT C29H53NO5, w przeliczeniu na bezwodną, ​​wolną od rozpuszczalników masę.
IDENTYFIKACJA
• A. Absorpcja w podczerwieni <197M>
• B. Czas retencji głównego piku roztworu próbki odpowiada czasowi retencji roztworu standardowego uzyskanego w teście.
ANALIZA
• Procedura
[Uwaga-Unikaj używania plastikowych kolb do przygotowania lub przechowywania jakiegokolwiek roztworu w tej analizie.]
Faza ruchoma: acetonitryl, kwas fosforowy i woda (860:0,05:140)
Roztwór wzorcowy: 0,5 mg/ml USP Orlistat RS w fazie ruchomej.Wstrzyknąć natychmiast po przygotowaniu lub przechowywać w temperaturze 5.
Roztwór próbki: 0,5 mg/ml Orlistatu w fazie ruchomej.Wstrzyknąć natychmiast po przygotowaniu lub przechowywać w temperaturze 5.
Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia <621>, Odpowiedniość systemu.)
Tryb: LC
Detektor: UV 195
Kolumna: 3,9 mm × 15 cm;uszczelnienie 4 µm L1
Natężenie przepływu: 1,0 ml/min
Wielkość iniekcji: 20 µl
Dopasowanie systemu
Próbka: Roztwór wzorcowy
Wymagania dotyczące przydatności
Względne odchylenie standardowe: NMT 2,0%
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Oblicz zawartość procentową orlistatu (C29H53NO5) w przyjętej porcji orlistatu:
Wynik = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = odpowiedź szczytowa z roztworu próbki
rS = odpowiedź szczytowa z roztworu standardowego
CS = stężenie USP Orlistat RS w roztworze standardowym (mg/ml)
CU = stężenie orlistatu w roztworze próbki (mg/ml)
Kryteria akceptacji: 98,0%-101,5% w przeliczeniu na bezwodną, ​​bezrozpuszczalnikową masę
ZANIECZYSZCZENIA
Zanieczyszczenia nieorganiczne
• Pozostałość po zapaleniu <281>: NMT 0,1%
• Metale ciężkie, metoda II <231>: 20 ppm
Zanieczyszczenia organiczne
• Procedura 1: Limit A związku pokrewnego orlistatowi
Roztwór wzorcowy: 0,1 mg/ml USP Orlistat related Compound A RS w acetonie
Roztwór próbki: 50 mg/ml Orlistatu w acetonie
Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia <621>, Chromatografia cienkowarstwowa).
Tryb: TLC
Adsorbent: warstwa chromatograficznej mieszaniny żelu krzemionkowego o grubości 0,25 mm
Objętość aplikacji: 10 µL
Układ rozpuszczalników rozwijających: Toluen i octan etylu (4:1)
Roztwór do wykrywania: Przenieść 2,5 g kwasu fosfomolibdenowego i 1 g siarczanu cerowego do kolby miarowej o pojemności 100 ml, rozpuścić i rozcieńczyć metanolem do kreski.
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Wyjmij płytkę i dokładnie wysusz na powietrzu.Spryskać wysuszoną płytkę roztworem do wykrywania i umieścić płytkę w piekarniku w temperaturze 120°C na 30 min.
Kryteria akceptacji: Dowolna plamka wtórna z roztworu próbki odpowiadająca związkowi A pokrewnemu orlistatowi nie jest bardziej intensywna niż odpowiednia plama z roztworu wzorcowego (0,2%).
• Procedura 2: Limit związku B związanego z orlistatem
Roztwór wzorcowy: 0,025 mg/ml USP Orlistat related Compound B RS w chlorku metylenu
Roztwór próbki: 50 mg/ml Orlistatu w chlorku metylenu
Wzbogacony roztwór próbki: 50 mg/ml Orlistatu w roztworze standardowym
Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia <621>, Odpowiedniość systemu.)
Tryb: GC
Detektor: jonizacja płomienia
Kolumna: topiona krzemionka 0,32 mm x 30 m pokryta fazą stacjonarną G27 o grubości 0,25 µm
Temperatura kolumny: Patrz tabela programów temperaturowych poniżej.
Temperatura początkowa () Rampa temperatury (/min) Temperatura końcowa () Czas utrzymywania temperatury końcowej (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatura
Wtryskiwacz: 270
Detektor: 280
Gaz nośny: hel
Natężenie przepływu: 30 ml/min
Współczynnik podziału: 10:1
Wielkość iniekcji: 2 µl
Dopasowanie systemu
Próbka: Roztwór wzorcowy
Wymagania dotyczące przydatności
Względne odchylenie standardowe: NMT 10,0%
Analiza
Próbki: Roztwór próbki i Wzbogacony roztwór próbki
Oblicz procent pokrewnego orlistatu związku B w porcji Orlistatu:
Wynik = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = odpowiedź szczytowa związku B pokrewnego orlistatowi z roztworu próbki
rSP = odpowiedź szczytowa związku B pokrewnego orlistatowi ze wzbogaconego roztworu próbki
CS = stężenie związku pokrewnego USP Orlistat B RS w roztworze wzorcowym (mg/ml)
CT = stężenie orlistatu we wzbogaconym roztworze próbki (mg/ml)
Kryteria akceptacji: Znaleziono 0,05% NMT związku B pokrewnego orlistatowi.
• Procedura 3
[Uwaga-Unikaj używania plastikowych kolb do przygotowania lub przechowywania jakiegokolwiek roztworu w tej analizie.]
Faza ruchoma, roztwór wzorcowy i roztwór próbki: Przygotuj zgodnie z zaleceniami w teście.
Roztwór sprawdzający zgodność systemu: 10 µg/mL USP Orlistat RS, 0,1 µg/mL USP Orlistat Related Compound C RS i 0,25 µg/mL USP Orlistat related Compound D RS w fazie ruchomej
Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia <621>, Odpowiedniość systemu.)
Postępuj zgodnie z zaleceniami w teście, z wyjątkiem chromatografii roztworu sprawdzającego zgodność systemu.
Dopasowanie systemu
Próbka: Rozwiązanie dotyczące przydatności systemu
Wymagania dotyczące przydatności
Stosunek sygnału do szumu: NLT 3 dla pików związku C pokrewnego orlistatowi i związku D pokrewnego orlistatowi
Względne odchylenie standardowe: NMT 10,0% dla piku orlistatu
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Oblicz procent każdego zanieczyszczenia w porcji Orlistatu:
Wynik = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = odpowiedź szczytowa dla każdego pojedynczego zanieczyszczenia z roztworu próbki
rS = odpowiedź szczytowa USP Orlistat RS z roztworu standardowego
CS = stężenie USP Orlistat RS w roztworze standardowym (mg/ml)
CU = stężenie orlistatu w roztworze próbki (mg/ml)
F = względny współczynnik odpowiedzi podany w Tabeli Zanieczyszczeń 1
Kryteria akceptacji: Patrz Tabela Zanieczyszczeń 1.
Tabela zanieczyszczeń 1
Nazwa Względny czas retencji Względny współczynnik odpowiedzi Kryteria akceptacji, NMT (%)
Formylleucyna 0,10 4,0 0,2
Związek pokrewny orlistatowi C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerb z otwartym pierścieniem 0,44 1,0 0,2
Związek pokrewny orlistatowi D* 0,90 - Obliczono w
Procedura 4
Orlistat z otwartym pierścieniem amidek* 0,90 - Obliczono w
Procedura 4
Orlistat 1,00 - -
orlistat d-leucynyd 1,18 1,0 0,2
Indywidualne niezidentyfikowane zanieczyszczenie - 1,0 0,1
* Koeluty w tym układzie LC, określone przy użyciu procedury 4.
N-Formylo-1-leucyna.
b Kwas (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-Formyloamino-4-metylopentanoiloksy]-2-heksylo-3-hydroksyheksadekanowy.
c Ester (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroksy-3-[1-fenylo-R-etylokarbomoilo]nonylo]-dodecylu N-formylo-1-leucyny.
d Ester lub enancjomer N-formylo-d-leucyny (S)-1-[[(2S,3S)-3-heksylo-4-okso-2-oksetanylo]metylo]dodecylu.
• Procedura 4: Limit D związku pokrewnego orlistatowi
Faza ruchoma: metanol i woda (83:17)
Roztwór sprawdzający zgodność systemu: odpowiednio 4 mg/mL USP Orlistat RS i 2,4 µg/mL USP Orlistat related Compound D RS w acetonitrylu
Roztwór wzorcowy: 5,0 mg/ml USP Orlistat RS w acetonitrylu
Roztwór próbki: 5,0 mg/ml Orlistatu w acetonitrylu
Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia 621, Odpowiedniość systemu).
Tryb: LC
Detektor: 205 nm
Kolumna: 4,0 mm × 25 cm;Uszczelnienie 5 µm L7
Natężenie przepływu: 0,6 ml/min
Wielkość iniekcji: 20 µl
Dopasowanie systemu
Próbka: Rozwiązanie dotyczące przydatności systemu
Wymagania dotyczące przydatności
Stosunek sygnału do szumu: NLT 3 dla piku związku D związanego z orlistatem
Względne odchylenie standardowe: NMT 10,0% dla piku orlistatu
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Oblicz procent każdego zanieczyszczenia w porcji Orlistatu:
Wynik = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = odpowiedź szczytowa dla każdego pojedynczego zanieczyszczenia z roztworu próbki
rS = odpowiedź szczytowa dla USP Orlistat RS z roztworu standardowego
CS = stężenie USP Orlistat RS w roztworze wzorcowym (µg/ml)
CU = stężenie orlistatu w roztworze próbki (µg/ml)
F = względny współczynnik odpowiedzi uzyskany w tabeli zanieczyszczeń 2
Kryteria akceptacji: Patrz Tabela Zanieczyszczeń 2.
Tabela zanieczyszczeń 2
Nazwa Względny czas retencji Względny współczynnik odpowiedzi Kryteria akceptacji, NMT (%)
Związek pokrewny orlistatowi D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1,00 - -
Orlistat amid z otwartym pierścieniem 1,25 4,3 0,1
ester N-formylo-1-leucyny (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroksy-3-[1-fenylo-R-etylokarbomoilo]nonylo]-dodecylu.
• Procedura 5: Limit związku pokrewnego orlistatowi E
Bufor: 0,4 N roztwór boranu, doprowadzony do pH 10,2
Derywatyzator: roztwór aldehydu o-ftalowego (OPA).[Uwaga – jeśli nie można go uzyskać na rynku, środek derywatyzujący można przygotować jako 1% kwasu 3-merkaptopropionowego i dialdehydu o-ftalowego w 0,4 M roztworze buforu boranowego.]
Roztwór A: Przenieść 4,1 g trihydratu octanu sodu i 40 mg kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) do 1-litrowej kolby miarowej.Rozpuścić w 950 ml wody i doprowadzić do pH 7,2 za pomocą 0,1 N wodorotlenku sodu.Rozcieńczyć wodą do kreski, dodać 2,5 ml tetrahydrofuranu i wymieszać.Przefiltrować i odgazować.
Roztwór B: Przenieś 2,7 g trihydratu octanu sodu i 40 mg EDTA do 1-litrowej kolby miarowej.Rozpuścić w 200 ml wody i doprowadzić do pH 7,2 za pomocą 0,1 N wodorotlenku sodu.Dodać 800 ml acetonitrylu, przesączyć i odgazować.
Faza ruchoma: patrz tabela gradientów poniżej.
Czas (min) Roztwór A (%) Roztwór B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3,3
Roztwór wzorcowy: Przenieść odważoną ilość około 0,2 mg związku E RS USP Orlistat pokrewnego do 20-ml fiolki typu head-space.Dodać 10 ml 4 N wodorotlenku sodu i zamknąć fiolkę.Ogrzewać fiolkę do 100°C przez 1 godzinę, następnie pozostawić do ostygnięcia do temperatury pokojowej.Przenieść 2 ml otrzymanego roztworu do kolby miarowej o pojemności 50 ml i rozcieńczyć wodą do kreski.Do 0,5 ml tego roztworu dodać 2,0 ml buforu i 0,5 ml środka derywatyzującego.
Roztwór próbki: Postępuj zgodnie z zaleceniami dotyczącymi roztworu wzorcowego, ale zamiast tego użyj 25 mg Orlistatu, aby zastąpić 0,2 mg USP Orlistat related Compound E RS.
Układ chromatograficzny
(Patrz Chromatografia <621>, Odpowiedniość systemu.)
Tryb: LC
Detektor: Fluorescencja 340 nm (wzbudzenie);450 nm (emisja)
Kolumny
Osłona: 2,1 mm × 2 cm;Pakowanie 50 µm L1
analityczne: 2,1 mm × 20 cm;pakowanie L1
Natężenie przepływu: 0,5 ml/min
Wielkość iniekcji: 20 µl
Dopasowanie systemu
Próbka: Roztwór wzorcowy
Wymagania dotyczące przydatności
Względne odchylenie standardowe: NMT 6,0% dla piku związku E związanego z orlistatem
Analiza
Próbki: Roztwór wzorcowy i Roztwór próbki
Oblicz procent tego zanieczyszczenia w porcji Orlistatu:
Wynik = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = odpowiedź szczytowa dla związku E pokrewnego orlistatowi w roztworze próbki
rS = odpowiedź szczytowa dla USP związku pokrewnego Orlistat E RS w roztworze standardowym
CS = stężenie związku pokrewnego USP Orlistat E RS w roztworze wzorcowym (mg/ml)
CU = stężenie orlistatu w roztworze próbki (mg/ml)
Kryteria przyjęcia
Pojedyncze zanieczyszczenia: znaleziono NMT 0,2% związku E pokrewnego orlistatowi.
Łączne zanieczyszczenia: NMT 1,0% wszystkich zanieczyszczeń zostało znalezionych, wyniki dla Procedur 1, 2, 3, 4 i 5 zostały dodane.
KONKRETNE TESTY
• Rotacja optyczna, rotacja właściwa <781>
Roztwór próbki: 30 mg/ml w odwodnionym alkoholu
Kryteria akceptacji: Między -48,0 a -51,0, po 20
• Oznaczanie zawartości wody, metoda Ic <921>: NMT 0,2%
DODATKOWE WYMAGANIA
• Pakowanie i przechowywanie: Przechowywać w dobrze zamkniętych pojemnikach w temperaturze od 2 do 8°C.
• Standardy referencyjne USP <11>
USP Orlistat RS
USP związek pokrewny Orlistat A RS
USP związek pokrewny Orlistat B RS
USP związek pokrewny Orlistat C RS
USP związek pokrewny Orlistat D RS
USP związek pokrewny Orlistat E RS
USP35