Paklitaksel (taksol) CAS 33069-62-4 Test (HPLC) 97,0 ~ 102,0%

Paklitaksel
C47H51NO14 853,91
Kwas benzenopropanowy, -(benzoilamino)--hydroksy-, 6,12b-bis(acetyloksy)-12-(benzoiloksy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahydro-4,11-dihydroksy-4a,8,13,13-tetrametylo-5-okso-7,11-metano-1H-cyklodeka[3,4]benz[1,2-b]okset-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-dodekahydro-4,6, 9,11,12,12b-heksahydroksy-4a,8,13,13-tetrametylo-7,11-metano-5H-cyklodeka[3,4]-benz[1,2-b]okset-5-on 6, 12b-dioctanu, 12-benzoesanu, 9-estru z (2R,3S)-N-benzoilo-3-fenyloizoseryną [33069-62-4].
Paklitaksel zawiera nie mniej niż 97,0 procent i nie więcej niż 102,0 procent C47H51NO14, w przeliczeniu na bezwodną, ​​niezawierającą rozpuszczalników masę.
[Uwaga – paklitaksel jest cytotoksyczny.Należy zachować szczególną ostrożność, aby nie wdychać cząstek paklitakselu i nie narażać na nie skóry.]
Pakowanie i przechowywanie - Przechowywać w szczelnych, odpornych na światło pojemnikach i przechowywać w kontrolowanej temperaturze pokojowej.
Etykietowanie — Etykieta wskazuje rodzaj procesu użytego do wytworzenia materiału oraz test związków pokrewnych, z którymi materiał jest zgodny.
Normy referencyjne USP <11>-
USP Endotoksyna RS
USP Paclitaxel RS Kliknij, aby wyświetlić strukturę
USP związek pokrewny paklitakselu A RS
Cefalomannina.
USP związek pokrewny paklitakselu B RS
10-Deacetylo-7-Epipaklitaksel.
Mieszanka zanieczyszczeń paklitakselem USP RS
Mieszanina paklitakselu i następujących pokrewnych związków: analog propylu, cefalomannina, analog sec-butylu, analog n-butylu, analog benzylu, bakatyna VI, analog pentylu i 7-epipaklitaksel.
Identyfikacja-
O: Absorpcja w podczerwieni <197 K>.
B: Czas retencji głównego piku na chromatogramie preparatu testowego odpowiada czasowi retencji na chromatogramie preparatu wzorcowego, jaki uzyskano w teście.
Skręcalność właściwa 781S: między 49,0 a 55,0 w temperaturze 20, w przeliczeniu na bezwodną, ​​wolną od rozpuszczalników masę.
Roztwór testowy: 10 mg na ml, w metanolu.
Testy liczby drobnoustrojów <61> i Testy na obecność określonych mikroorganizmów <62>-Całkowita liczba drobnoustrojów tlenowych nie przekracza 100 jtk/g.Spełnia wymagania testów na nieobecność Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp. i Escherichia coli.
Endotoksyny bakteryjne 85-Zawiera nie więcej niż 0,4 jednostki endotoksyny USP na mg paklitakselu.
Woda, metoda Ic <921>: nie więcej niż 4,0%.
Pozostałość po prażeniu <281>: nie więcej niż 0,2%.
Metale ciężkie, Metoda II <231>: 0,002%.
Związki pokrewne-
test 1 (dla materiału oznaczonego jako wyizolowany ze źródeł naturalnych) — jeśli materiał jest zgodny z tym testem, etykieta wskazuje, że spełnia test 1 związków pokrewnych USP.
Rozcieńczalnik-Przygotować zgodnie z zaleceniami w teście.
Roztwór A – Przygotuj przesączony i odgazowany acetonitryl.
Rozwiązanie B — Przygotuj przefiltrowaną i odgazowaną wodę.
Faza ruchoma - Użyj zmiennych mieszanin Roztworu A i Roztworu B zgodnie z zaleceniami dla systemu chromatograficznego.W razie potrzeby dokonaj regulacji (patrz Odpowiedniość systemu w części Chromatografia 621).
Roztwór sprawdzający zgodność systemu — Rozpuścić dokładnie odważone ilości związku A RS USP pokrewnego paklitakselu i związku B RS USP pokrewnego paklitakselu w metanolu, aby otrzymać roztwór o znanych stężeniach około 10 µg każdego z nich na ml.Przenieś 5,0 ml tego roztworu do kolby miarowej o pojemności 50 ml, rozcieńcz rozcieńczalnikiem do kreski i wymieszaj.
Roztwór wzorcowy — rozpuścić za pomocą sonikacji dokładnie odważoną ilość USP Paclitaxel RS w rozcieńczalniku i rozcieńczyć ilościowo, aw razie potrzeby stopniowo, rozcieńczalnikiem, aby uzyskać roztwór o znanym stężeniu około 5 µg na ml.
Roztwór testowy — użyj preparatu do testu.
System chromatograficzny (patrz Chromatografia <621>) – Chromatograf cieczowy jest wyposażony w detektor 227 nm i kolumnę 4,6 mm × 25 cm zawierającą wypełnienie 5 µm L43.Szybkość przepływu wynosi około 2,6 ml na minutę.Temperaturę kolumny utrzymuje się na poziomie 30°C. Chromatograf programuje się w następujący sposób.
Czas (minuty) Roztwór A (%) Roztwór B (%) Elucja
0–35 35 65 izokratyczny
35–60 35®80 65®20 gradient liniowy
60–70 80®35 20®65 gradient liniowy
70–80 35 65 izokratyczny Wykonaj chromatografię roztworu zgodności Systemu i zapisz odpowiedzi pików zgodnie z procedurą: względne czasy retencji wynoszą około 0,78 dla związku A pokrewnego paklitakselu i 0,86 dla związku B pokrewnego paklitakselu (względem czasu retencji dla paklitakselu otrzymanego z rozwiązanie testowe);a rozdzielczość, R, między związkiem pokrewnym paklitakselu A i związkiem pokrewnym paklitakselu B jest nie mniejsza niż 1,0.Chromatografować roztwór wzorcowy i rejestrować odpowiedzi pików zgodnie z procedurą: względne odchylenie standardowe dla powtórzonych nastrzyków nie przekracza 2,0%.
Procedura - Wstrzyknąć objętość (około 15 µl) roztworu testowego do chromatografu, zapisać chromatogram i zmierzyć obszary głównych pików.Oblicz zawartość procentową każdego zanieczyszczenia w porcji paklitakselu pobranej według wzoru:
100 (piątek / rU)
gdzie F jest względnym współczynnikiem odpowiedzi dla każdego piku zanieczyszczenia (patrz Tabela 1 dla wartości);ri jest powierzchnią piku dla każdego pojedynczego zanieczyszczenia;a rU jest obszarem piku dla paklitakselu.
Tabela 1
Względny czas retencji Względny współczynnik odpowiedzi (F) Nazwa Granica (%)
0,24 1,29 Bakatyna III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylopaklitaksel 0,5
0,57 1,00 7-ksylozylopaklitaksel 0,2
0,78 1,26 Cefalomannina (związek A pokrewny paklitakselowi) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihydrocefalomannina a21
0,86 1,00 10-Deacetylo-7-epipaklitaksel (związek B pokrewny paklitakselowi) 0,5
1,10 1,00 Analog benzylu3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaklitaksel C b22
1,40 1,00 7-epicefalomannina 0,3
1,85 1,00 7-epipaklitaksel 0,5
1 Rozdzielczość tych pików może być niepełna, w zależności od obecnych względnych ilości;suma a1 i a2 nie przekracza 0,5%.
2 Rozdzielczość tych pików może być niepełna, w zależności od obecnych względnych ilości;suma b1 i b2 nie przekracza 0,5%.
3 Pokrewnemu związkowi, analogowi benzylu, przypisano następującą nazwę chemiczną: 13-ester bakatyny III z kwasem (2R,3S)-2-hydroksy-3-fenylo-3-(2-fenyloacetyloamino)propanowym.
Oprócz nieprzekraczania limitów zanieczyszczeń związanych z paklitakselem w Tabeli 1, stwierdzono nie więcej niż 0,1% jakiegokolwiek innego pojedynczego zanieczyszczenia;i nie więcej niż 2,0% wszystkich zanieczyszczeń.
test 2 (dla materiału oznaczonego jako wyprodukowany w procesie półsyntetycznym) — Jeśli materiał jest zgodny z tym testem, etykieta wskazuje, że spełnia wymagania testu 2 związków pokrewnych USP.
Rozcieńczalnik-Użyj acetonitrylu.
Roztwór A — użyj przefiltrowanej i odgazowanej mieszaniny wody i acetonitrylu (3:2).
Rozwiązanie B — użyj przefiltrowanego i odgazowanego acetonitrylu.
Faza ruchoma - Użyj zmiennych mieszanin Roztworu A i Roztworu B zgodnie z zaleceniami dla systemu chromatograficznego.W razie potrzeby dokonaj regulacji (patrz Odpowiedniość systemu w części Chromatografia 621).
Odpowiednie rozwiązanie systemowe — Rozpuścić dokładnie odważone ilości USP Paclitaxel RS i USP Paclitaxel related Compound B RS w rozcieńczalniku, wstrząsając i w razie potrzeby poddając działaniu ultradźwięków, aby uzyskać roztwór o znanym stężeniu odpowiednio około 0,96 mg i 0,008 mg na ml.
Roztwór testowy – przenieść około 10 mg dokładnie odważonego paklitakselu do kolby miarowej o pojemności 10 ml, rozpuścić i rozcieńczyć rozcieńczalnikiem do pełnej objętości, wstrząsając i sonikując, jeśli to konieczne, i wymieszać.
System chromatograficzny (patrz Chromatografia 621) — Chromatograf cieczowy jest wyposażony w detektor 227 nm i kolumnę 4,6 mm × 15 cm zawierającą wypełnienie L1 o grubości 3 µm.Szybkość przepływu wynosi około 1,2 ml na minutę.Temperaturę kolumny utrzymuje się na poziomie 35°C. Chromatograf programuje się w następujący sposób.
Czas (minuty) Roztwór A (%) Roztwór B (%) Elucja
0-20 100 0 izokratyczny
20-60 100®10 0®90 gradient liniowy
60-62 10®100 90®0 gradient liniowy
62-70 100 0 izokratyczny Chromatografować roztwór zgodności Systemu i rejestrować odpowiedzi szczytowe zgodnie z procedurą: względne czasy retencji wynoszą około 0,94 dla związku B pokrewnego paklitakselowi i 1,0 dla paklitakselu;rozdzielczość, R, między pokrewnym paklitakselem związkiem B i paklitakselem jest nie mniejsza niż 1,2;a względne odchylenie standardowe dla powtarzanych wstrzyknięć nie przekracza 2,0%.
Procedura — Osobno wstrzyknąć równe objętości (około 15 µl) rozcieńczalnika i roztworu testowego do chromatografu, zapisać chromatogramy i zmierzyć powierzchnie wszystkich pików.Pomiń wszelkie piki spowodowane przez rozcieńczalnik.Oblicz zawartość procentową każdego zanieczyszczenia w porcji paklitakselu pobranej według wzoru:
100 (piątek / rs)
gdzie F jest względnym współczynnikiem odpowiedzi dla każdego zanieczyszczenia (patrz Tabela 2 dla wartości);ri to powierzchnia piku dla każdego zanieczyszczenia otrzymanego z roztworu testowego;a rs jest sumą powierzchni wszystkich pików otrzymanych z roztworu testowego.
Tabela 2
Względny czas retencji Względny współczynnik odpowiedzi (F) Nazwa Granica (%)
0,11 1,24 10-Deacetylobakatyna III 0,1
0,20 1,29 Bakatyna III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradacja2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetylopaklitaksel 0,5
0,80 1,00 2-pentenian 2-debenzoilopaklitakselu 0,7
0,921 1,00 Otwarty pierścień oksetanu, migracja acetylu i benzoilu2 x1
0,921 1,00 10-acetoacetylopaklitaksel x2
0,941 1,00 10-deacetylo-7-epipaklitaksel (związek B pokrewny paklitakselowi) x3
1,37 1,00 7-epipaklitaksel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaklitaksel2 0,5
1,54 1,00 7-acetylopaklitaksel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-bakatyna III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paklitaksel 0,3
1 Rozdzielczość tych pików może być niepełna, w zależności od obecnych względnych ilości;suma x1, x2 i x3 nie przekracza 0,4%.
2 Związkom pokrewnym przypisano następujące nazwy chemiczne.Otwarty pierścień oksetanu, migracja acetylu i benzoilu;i 10,13-Bissidechainpaklitaksel:
Fotodegradacja
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloksy-5,13-dihydroksy-4,16,17,17-tetrametylo-8-oksa- 3-okso-12-fenylokarbonyloksypentacyklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroksy-3-fenylo-3-(fenylokarbonyloamino)propanian
Pierścień oksetanu otwarty, acetyl i benzoil migrują
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloksy-1,2,4,7-tetrahydroksy-8,12,15,15-tetrametylo-9-okso- 4-(fenylokarbonyloksymetylo)tricyklo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-hydroksy-3-fenylo-3-(fenylokarbonyloamino)propanian
10,13-Bissidechainpaklitaksel
Bakatyna III 13-ester z kwasem (2R,3S)-2-hydroksy-3-fenylo-3-(fenylokarbonyloamino)propanowy, 10-ester z (2S,3S)-2-hydroksy-3-fenylo-3-(fenylokarbonyloamino )kwas propanowy
Oprócz nieprzekraczania limitów zanieczyszczeń związanych z paklitakselem w Tabeli 2, stwierdzono nie więcej niż 0,1% jakiegokolwiek innego pojedynczego zanieczyszczenia;i nie więcej niż 2,0% wszystkich zanieczyszczeń.
test 3 (dla materiału oznaczonego jako wyprodukowany w procesie fermentacji komórek roślinnych) — Jeśli materiał jest zgodny z tym testem, etykieta wskazuje, że spełnia wymagania testu 3 związków pokrewnych USP.
Roztwór A – Przygotuj przesączoną i odgazowaną mieszaninę wody i acetonitrylu (3:2).
Roztwór B — Przygotuj przefiltrowany i odgazowany acetonitryl.
Faza ruchoma - Użyj zmiennych mieszanin Roztworu A i Roztworu B zgodnie z zaleceniami dla systemu chromatograficznego.W razie potrzeby dokonaj regulacji (patrz Odpowiedniość systemu w części Chromatografia 621).
Roztwór sprawdzający zgodność systemu — Rozpuść USP Paclitaxel Impurity Mixture RS w acetonitrylu, w razie potrzeby poddając działaniu ultradźwięków, aby otrzymać roztwór o znanym stężeniu około 1 mg na ml.
Roztwór wzorcowy — rozpuścić dokładnie odważoną ilość USP Paclitaxel RS w acetonitrylu, w razie potrzeby poddając działaniu ultradźwięków, aby otrzymać roztwór o znanym stężeniu około 1 mg na ml.
Roztwór testowy - Przenieść dokładnie odważone około 10 mg paklitakselu do kolby miarowej o pojemności 10 ml.Rozpuścić i rozcieńczyć acetonitrylem do objętości, w razie potrzeby poddając sonikacji, i wymieszać.
System chromatograficzny (patrz Chromatografia 621) — Chromatograf cieczowy jest wyposażony w detektor 227 nm i kolumnę 4,6 mm × 15 cm zawierającą wypełnienie L1 o grubości 3 µm.Szybkość przepływu wynosi około 1,2 ml na minutę.Chromatograf jest programowany w następujący sposób.
Czas (minuty) Roztwór A (%) Roztwór B (%) Elucja
0-28 100 0 izokratyczny
28-33 100®98 0®2 gradient liniowy
33–58 98®10 2®90 gradient liniowy
58-60 10 90 izokratyczny
60-63 10®100 90®0 gradient liniowy
63-70 100 0 izokratyczny Wykonaj chromatografię roztworu zgodności Systemu i zapisz odpowiedzi pików zgodnie z procedurą: rozdzielczość, R, między paklitakselem i analogiem benzylu jest nie mniejsza niż 1,8.Chromatografować roztwór wzorcowy i rejestrować odpowiedzi pików zgodnie z procedurą: względne odchylenie standardowe dla powtórzonych nastrzyków nie przekracza 2,0%.[uwaga – w celu identyfikacji pików przybliżone względne czasy retencji podano w Tabeli 3. Względne czasy retencji zmierzono względem paklitakselu.]
Tabela 3
Nazwa Względny limit czasu przechowywania (%)
Analog propylu1 0,54 0,2
Cefalomannina (związek A pokrewny paklitakselowi) 0,76 0,5
analog sec-butylu2 0,81 0,2
Analog n-butylu3 0,89 0,1
Analog benzylu 1,10 0,4
Bakatyna VI 1,23 0,2
Analog pentylu4 1,31 0,2
7-epipaklitaksel 1,51 0,4
1 Następująca nazwa chemiczna jest przypisana do pokrewnego związku analogu propylu: 13-ester bakatyny III z kwasem (2R,3S)-3-butanoiloamino-2-hydroksy-3-fenylopropionowym.
2 Następująca nazwa chemiczna jest przypisana do pokrewnego związku analogu sec-butylu: 13-ester bakatyny III z kwasem (2R,3S)-2-hydroksy-3-(2-metylobutanoiloamino)-3-fenylopropionowym.
3 Pokrewnemu analogowi n-butylu przypisano następującą nazwę chemiczną: 13-ester bakatyny III z kwasem (2S,3S)-2-hydroksy-3-(pentanoiloamino)-3-fenylopropionowym.
4 Następująca nazwa chemiczna jest przypisana do pokrewnego związku analogu pentylowego: 13-ester bakatyny III z kwasem (2R,3S)-3-(heksanoiloamino)-2-hydroksy-3-fenylopropionowym.
Procedura — wstrzyknąć objętość (około 12 µl) roztworu testowego do chromatografu, zapisać chromatogram i zmierzyć powierzchnie wszystkich pików.Oblicz zawartość procentową każdego zanieczyszczenia w porcji paklitakselu pobranej według wzoru:
100(ri / rU)
w którym ri jest reakcją każdego indywidualnego zanieczyszczenia;a rU jest sumą powierzchni wszystkich pików otrzymanych z roztworu testowego.Oprócz nieprzekraczania limitów zanieczyszczeń związanych z paklitakselem w Tabeli 3, stwierdzono nie więcej niż 0,1% jakiegokolwiek innego pojedynczego zanieczyszczenia;i nie więcej niż 2,0% wszystkich zanieczyszczeń.
Analiza-
Rozcieńczalnik-Przygotować mieszaninę metanolu i kwasu octowego (200:1).
Faza ruchoma - Przygotuj przesączoną i odgazowaną mieszaninę wody i acetonitrylu (11:9).W razie potrzeby dokonaj regulacji (patrz Odpowiedniość systemu w części Chromatografia 621).
Przygotowanie wzorcowe - Rozpuścić, w razie potrzeby stosując sonikację, dokładnie odważoną ilość USP Paclitaxel RS w rozcieńczalniku i rozcieńczyć ilościowo, w razie potrzeby stopniowo, rozcieńczalnikiem, aby uzyskać roztwór o znanym stężeniu około 1 mg na ml.
Przygotowanie testu - Przenieść dokładnie odważone około 10 mg paklitakselu do kolby miarowej o pojemności 10 ml.Rozpuścić w rozcieńczalniku, w razie potrzeby stosując sonikację, rozcieńczyć rozcieńczalnikiem do objętości i wymieszać.
System chromatograficzny (patrz Chromatografia <621>) – Chromatograf cieczowy jest wyposażony w detektor 227 nm i kolumnę 4,6 mm × 25 cm zawierającą wypełnienie 5 µm L43.Szybkość przepływu wynosi około 1,5 ml na minutę.Poddać chromatografii preparat standardowy i zapisać odpowiedzi szczytowe zgodnie z procedurą: współczynnik ogonowania wynosi od 0,7 do 1,3;a względne odchylenie standardowe dla powtarzanych wstrzyknięć nie przekracza 1,5%.
Procedura — Oddzielnie wstrzyknąć równe objętości (około 10 µl) preparatu standardowego i preparatu testowego do chromatografu, zapisać chromatogramy i zmierzyć obszary głównych pików.Oblicz ilość w mg C47H51NO14 w porcji paklitakselu pobranej według wzoru:
10C(rU / rS)
gdzie C oznacza stężenie, w mg na ml, USP Paclitaxel RS w preparacie standardowym;a rU i rS są odpowiedziami szczytowymi dla paklitakselu otrzymanymi odpowiednio z preparatu testowego i preparatu standardowego.