Kwas ursodeoksycholowy (UDCA) CAS 128-13-2 Test 99,0 ~ 101,0%

KWAS URSODEOKSYCHOLOWY
C24H40O4 Pan 392,6[128-13-2]
DEFINICJA
Kwas 3α,7β-dihydroksy-5β-cholan-24-owy.
Zawartość: 99,0% do 101,0% (sucha substancja).
POSTACIE
Wygląd: biały lub prawie biały proszek.
Rozpuszczalność: praktycznie nierozpuszczalny w wodzie, dobrze rozpuszczalny w etanolu (96%), słabo rozpuszczalny w acetonie, praktycznie nierozpuszczalny w chlorku metylenu.
temperatura topnienia: około 202℃.
IDENTYFIKACJA
Pierwsza identyfikacja: A.
Druga identyfikacja: B, C.
A. Spektrofotometria absorpcyjna w podczerwieni (2.2.24).
Porównanie: kwas ursodeoksycholowy CRS.
B. Zbadaj chromatogramy otrzymane w teście na obecność zanieczyszczeń. C.
Wyniki: plamka główna na chromatogramie otrzymanym z roztworem testowym (b) jest podobna pod względem położenia, koloru i rozmiaru do plamki głównej na chromatogramie otrzymanym z roztworem odniesienia (a).
C. Rozpuścić około 10 mg w 1 ml kwasu siarkowego OD. Dodać 0,1 ml roztworu formaldehydu OD i odstawić na 5 min.Dodać 5 ml wody OD. Otrzymana zawiesina jest zielonkawo-niebieska.
TESTY
Specyficzna skręcalność optyczna (2.2.7): + 58,0 do + 62,0 (sucha substancja).
Rozpuścić 0,500 g w bezwodnym etanolu OD i rozcieńczyć tym samym rozpuszczalnikiem do 25,0 ml.
Zanieczyszczenie C. Chromatografia cienkowarstwowa (2.2.27).
Mieszanina rozpuszczalników: woda OD, aceton OD (10:90 V/V).
Roztwór testowy (a).Rozpuścić 0,40 g badanej substancji w mieszaninie rozpuszczalników i rozcieńczyć mieszaniną rozpuszczalników do objętości 10 ml.
Roztwór testowy (b).Rozcieńczyć 1 ml badanego roztworu (a) do 10 ml mieszaniną rozpuszczalników.
Roztwór wzorcowy (a).Rozpuścić 40 mg kwasu ursodeoksycholowego CRS w mieszaninie rozpuszczalników i rozcieńczyć mieszaniną rozpuszczalników do 10 ml.
Roztwór wzorcowy (b).Rozpuścić 20 mg kwasu litocholowego CRS (zanieczyszczenie C) w mieszaninie rozpuszczalników i rozcieńczyć do 10,0 ml mieszaniną rozpuszczalników (roztwór A).Rozcieńczyć 2,0 ml tego roztworu do 100,0 ml mieszaniną rozpuszczalników.
Roztwór wzorcowy (c).Do 5 ml roztworu A dodać 10 mg kwasu chenodezoksycholowego CRS (zanieczyszczenie A) i rozcieńczyć mieszaniną rozpuszczalników do 50 ml.
Płytka: płytka z żelem krzemionkowym TLC R.
Faza ruchoma: lodowaty kwas octowy R, aceton R, metylenchlorek R (1:30:60 V/V/V).
Aplikacja: 5μL.
Zabudowa: ponad 2/3 płytki.
Suszenie: w 120℃ przez 10 min.
Wykrywanie: natychmiast spryskać 47,6 g/L roztworem kwasu fosfomolibdenowego R w mieszaninie 1 objętości kwasu siarkowego R i 20 objętości lodowatego kwasu octowego R i podgrzewać w temperaturze 120℃, aż na jaśniejszym tle pojawią się niebieskie plamy.
Przydatność systemu: roztwór wzorcowy (c):
- chromatogram pokazuje 2 wyraźnie oddzielone główne plamy.
Granica: rozwiązanie testowe (a):
- zanieczyszczenie C: jakakolwiek plama spowodowana zanieczyszczeniem C nie jest bardziej intensywna niż główna plama na chromatogramie otrzymanym z roztworem wzorcowym (b) (0,1 %).
Substancje pokrewne.Chromatografia cieczowa (2.2.29).
Mieszanina rozpuszczalników: metanol R, faza ruchoma (10:90 V/V).
Rozwiązanie testowe.Rozpuścić 60 mg badanej substancji w mieszaninie rozpuszczalników i rozcieńczyć mieszaniną rozpuszczalników do 20,0 ml.
Roztwór wzorcowy (a).Rozpuścić zawartość fiolki z kwasem ursodezoksycholowym dla odpowiedniego systemu CRS (zawierającą zanieczyszczenia A i H) w 1,0 ml mieszaniny rozpuszczalników.
Roztwór wzorcowy (b).Rozcieńczyć 1,0 ml badanego roztworu do 100,0 ml mieszaniną rozpuszczalników.Rozcieńczyć 1,0 ml tego roztworu do 10,0 ml mieszaniną rozpuszczalników.
Kolumna:
-rozmiar: l = 0,25 m, Ř = 4,6 mm;
-faza stacjonarna: żel krzemionkowy oktadecylosililowy zakończony na końcachchromatografia R (5 μm);
- temperatura: 40℃ ± 1℃.
Faza ruchoma: wymieszać 30 objętości acetonitrylu OD, 37 objętości 0,78 g/l roztworu diwodorofosforanu sodu OD doprowadzonego do pH 3 kwasem fosforowym OD i 40 objętości metanolu OD.
Natężenie przepływu: 0,8 ml/min.
Detekcja: refraktometr przy 35 ± 1℃.
Iniekcja: 150 μl.
Czas działania: 4 razy dłuższy niż czas retencji kwasu ursodeoksycholowego.
Identyfikacja zanieczyszczeń: użyć chromatogramu dostarczonego z kwasem ursodeoksycholowym w celu określenia przydatności układu CRS oraz chromatogramu otrzymanego z roztworem wzorcowym (a) w celu zidentyfikowania pików spowodowanych zanieczyszczeniami A i H.
Względna retencja w odniesieniu do kwasu ursodeoksycholowego (czas retencji = około 14 min): zanieczyszczenie H = około 0,9;zanieczyszczenie A = około 2,8.
Przydatność systemu: rozwiązanie wzorcowe (a):
-rozdzielczość: minimum 1,5 między pikami z powodu zanieczyszczenia H i kwasu ursodeoksycholowego.
Granice:
- zanieczyszczenie A: nie więcej niż 10-krotność powierzchni głównego piku na chromatogramie otrzymanym z roztworem wzorcowym (b) (1,0 procent);
-nieokreślone zanieczyszczenia: dla każdego zanieczyszczenia nie więcej niż powierzchnia głównego piku na chromatogramie otrzymanym z roztworem wzorcowym (b) (0,10%);
- całość: nie więcej niż 15-krotna powierzchnia piku głównego na chromatogramie otrzymanym z roztworem wzorcowym (b) (1,5 procent);
- granica pominięcia: 0,5-krotność powierzchni głównego piku na chromatogramie otrzymanym z roztworem odniesienia (b) (0,05 procent).
Metale ciężkie (2.4.8): maksymalnie 20 ppm.
1,0 g odpowiada testowi C. Przygotuj roztwór wzorcowy, używając 2 ml roztworu wzorcowego ołowiu (10 ppm Pb) R.
Straty podczas suszenia (2.2.32): maksymalnie 1,0 %, określone na 1 000 g przez suszenie w piecu w temperaturze 105 ℃.
Popiół siarczanowy (2.4.14): maksymalnie 0,1 %, w przeliczeniu na 1,0 g.
ANALIZA
Rozpuścić 0,350 g w 50 ml 96% etanolu OD, uprzednio zobojętnionego do 0,2 ml roztworu fenoloftaleiny OD. Dodać 50 ml wody OD i miareczkować 0,1 M wodorotlenkiem sodu do uzyskania różowego zabarwienia.
1 ml 0,1 M wodorotlenku sodu odpowiada 39,26 mg C24H40O4.
ZANIECZYSZCZENIA
Określone zanieczyszczenia: A, C.
Inne wykrywalne zanieczyszczenia (obecność następujących substancji na wystarczającym poziomie zostałaby wykryta za pomocą jednego lub drugiego testu z monografii. Ogranicza je ogólne kryterium dopuszczalności dla innych/nieokreślonych zanieczyszczeń i/lub ogólna monografia Substancje do użytku farmaceutycznego (2034). W związku z tym nie jest konieczne identyfikowanie tych zanieczyszczeń w celu wykazania zgodności. Patrz także 5.10.
Kontrola zanieczyszczeń w substancjach do użytku farmaceutycznego): B, D, E, F, G, H, I.
A. Kwas 3α,7α-dihydroksy-5β-cholan-24-owy (kwas chenodeoksycholowy),
B. Kwas 3α,7α,12α-trihydroksy-5β-cholan-24-owy (kwas cholowy),
C. Kwas 3α-hydroksy-5β-cholan-24-owy (kwas litocholowy),
D. Kwas 3α,7β,12α-trihydroksy-5β-cholan-24-owy (kwas ursocholowy),
E. Kwas 3α,12α-dihydroksy-5β-cholan-24-owy (kwas dezoksycholowy),
F. Kwas 3α-hydroksy-7-okso-5β-cholan-24-owy,
G. 3α,7β-dihydroksy-5β-cholan-24-ian metylu,
H. Kwas 3β,7β-dihydroksy-5β-cholan-24-owy,
I. 5β-cholan-3α,7β,24-triol.