Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-terc-Butil-L-Serina Pureza > 98,5% (HPLC)

Procedimentos de inspeção
1. Aparência
-- Inspeção visual
2. Pureza (HPLC)
2.1 Instrumento
Cromatografia líquida de alta performance, detector PDA.
balança analítica eletrônica
2.2 Reagente
Acetonitrila (grau cromatográfico), ácido trifluoroacético (grau cromatográfico)
2.3 Condições cromatográficas
2.3.1 Coluna: YMC-ODS-AM, 5 μl, 250x4,6 mm
2.3.2 Comprimento de onda de detecção: INC220nm
Taxa de fluxo: 1,0mL/min
Tamanho da amostra: 10 μl (referência)
Diluente: acetonitrila
Tempo de coleta de dados: 25,00min
2.4 Preparação da fase móvel
Fase móvel A (água de ácido trifluoroacético a 0,1%): absorção de precisão 2. Dilua Oml de ácido trifluoroacético com água até 2000m1, misture bem e desgaseifique;
Fase móvel B (ácido acetonitrilo trifluoroacético a 0,1%): absorção precisa 2,0 ml de ácido trifluoroacético foram diluídos para 2000 ml com acetonitrilo, misturados e desgaseificados;
2.5 Programa de gradiente da fase móvel
Tempo (min) A% B%
0,00 90 10
13.00 10 90
18h00 10 90
18.01 90 10
23,00 90 10
2.6 Preparação da solução de amostra
Pesar e dissolver 0,1 g de amostra com acetonitrila e diluir para 100 ml, agitar bem para uso ou a mesma concentração.Prepare duas amostras em paralelo.
2.7 Determinação da Amostra
Analise a amostra de acordo com o seguinte procedimento de amostragem:
Mais de 1 injeção de solução em branco
1 solução de amostra de ponto 1#
1 solução de amostra de ponto 2#
2.8 Cálculo do resultado
2.8.1 O método de normalização da área do pico foi usado para calcular a pureza do HPLC deduzindo o espaço em branco.
2.8.2 O desvio médio relativo de pureza de duas agulhas não deve ser superior a 1%
2.8.3 Se os resultados de ambas as injeções atenderem aos critérios de aceitação, a pureza média é tomada como resultado final.
3, ponto de fusão -- instrumento de ponto de fusão RY-1
4. Método de detecção de perda na secagem
4.1 Instrumentos:
Forno elétrico de secagem termostática, equilíbrio de um em dez mil.
4.2 Procedimento:
Em um frasco de pesagem plano com tampa de boca moída com peso constante e secagem excessiva, pese 1 grama de amostra (com precisão de 0,0001 grama).A amostra deve ser espalhada uniformemente no fundo do frasco de pesagem com uma espessura não superior a 10 mm, colocada em um forno de secagem elétrico de temperatura constante, seca a 105-110 ℃ por 3 horas e, em seguida, transferida para a sala de secagem, resfriada à temperatura ambiente e pese.
Cálculo: Perda de peso seco %= (M1-M2) ÷M×100
Onde: M1: massa da amostra e frasco de pesagem antes da secagem, g
M2: Massa da amostra e frasco de pesagem após a secagem, g
M: Massa da amostra, grama
5. Rotação específica
-- A rotação específica é medida de acordo com GB/T613-1988
Preparação da amostra: 0,5000g de amostra foi pesado com precisão e transferido para um frasco volumétrico de 50ml limpo e seco com 20ml de acetato de etila.A garrafa foi rolhada e agitada para dissolver o acetato de etila.
Teste: Ajuste o zero do giroscópio antes do teste, então encha o tubo de teste com solução de amostra, registre o ângulo de deflexão de rotação e calcule a rotação específica da amostra usando a seguinte fórmula.
[α]20/D= (r×50) ÷(C×L)
Onde:
[α]20/D: Rotação específica da solução de amostra a 25 ℃
r: Rotação observada a 25 ℃ para solução de amostra
50: Prepare o volume da solução de amostra (ml)
w: Peso da amostra (g)
L: Comprimento do tubo óptico (dm)
6. Análise TCL
Preparação da amostra: 0,5000g de amostra foi pesado com precisão e movido para um frasco volumétrico de 50ml limpo e seco, 40ml de EtoH foram adicionados, o frasco foi tampado e agitado para dissolver e, em seguida, diluído na balança com EtoH.
Preparação da amostra de controle: 0,5000g de amostra foi pesada com precisão e movida para um frasco volumétrico limpo e seco de 50ml, 40ml de água e 2 gotas de ácido clorídrico 6N foram adicionados, o frasco foi tampado e agitado para dissolver e depois diluído para a balança com água.Em seguida, pegue 0,5 do líquido acima e dilua-o com etanol em um frasco de 100 ml para uma amostra de referência com escala de resíduos de aminoácidos de 1,0%.
Amostras de 10 microlitros foram retiradas com uma seringa de microamostragem e as amostras foram colocadas na placa de silicone GF254.Placas de pontos de 5 microlitros, 10 microlitros e 15 microlitros foram tomadas para pontos de comparação, respectivamente.
Agente revelador: n-butanol: ácido acético glacial: água =4:1:1.
Agente revelador de cor: solução de metanol ninidrina a 5%.
Operação de desenvolvimento de cor: primeiro, use um secador de cabelo para secar a placa de sílica gel desenvolvida, depois mergulhe-a em solução de 5% de metanol de ninidrina, depois seque e asse em alta temperatura em um forno elétrico para desenvolvimento de cor.
Julgamento: Observe o tempo de cor do produto, o tamanho do ponto, a concentração de cor e a comparação com o produto de controle, julgue que está nessa faixa.