Orlistat CAS 96829-58-2 API Pureza do medicamento para perda de peso 98,0 ~ 101,5%

Orlistate
C29H53NO5 495,73
l-leucina, N-formil-, 1-[(3-hexil-4-oxo-2-oxetanil)metil]dodecil éster, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-Formil-1-leucina, éster com (3S,4S)-3-hexil-4-[(2S)-2-hidroxitridecil]-2-oxetanona [96829-58-2].
DEFINIÇÃO
Orlistat contém NLT 98,0% e NMT 101,5% de C29H53NO5, calculado na base anidra, sem solvente.
IDENTIFICAÇÃO
• A. Absorção de infravermelho <197M>
• B. O tempo de retenção do pico maior da solução Amostra corresponde ao da solução Padrão, conforme obtido no Ensaio.
ENSAIO
• Procedimento
[Nota-Evite o uso de frascos plásticos para o preparo ou contenção de qualquer solução nesta análise.]
Fase móvel: acetonitrila, ácido fosfórico e água (860: 0,05: 140)
Solução padrão: 0,5 mg/mL de USP Orlistat RS em fase móvel.Injetar imediatamente após a preparação ou armazenar a 5.
Solução de amostra: 0,5 mg/mL de Orlistat em fase móvel.Injetar imediatamente após a preparação ou armazenar a 5.
Sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografia <621>, Adequação do sistema.)
Modo: CL
Detector: UV 195
Coluna: 3,9 mm × 15 cm;Gaxeta de 4 µm L1
Vazão: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção: 20 µL
Adequação do sistema
Amostra: solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 2,0%
Análise
Amostras: solução padrão e solução de amostra
Calcule a porcentagem de orlistat (C29H53NO5) na porção de orlistat ingerida:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = resposta de pico da solução de amostra
rS = resposta de pico da solução padrão
CS = concentração de USP Orlistat RS na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Orlistat na solução de amostra (mg/mL)
Critérios de aceitação: 98,0%-101,5% na base anidra, sem solvente
impurezas
Impurezas Inorgânicas
• Resíduo na Ignição <281>: NMT 0,1%
• Metais Pesados, Método II <231>: 20 ppm
impurezas orgânicas
• Procedimento 1: Limite do Composto A Relacionado ao Orlistat
Solução padrão: 0,1 mg/mL de USP Orlistat Related Compound A RS em acetona
Solução de amostra: 50 mg/mL de Orlistat em acetona
Sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografia <621>, Cromatografia de Camada Fina.)
Modo: TLC
Adsorvente: camada de 0,25 mm de mistura cromatográfica de gel de sílica
Volume de aplicação: 10 µL
Sistema solvente revelador: tolueno e acetato de etila (4:1)
Solução de detecção: Transferir 2,5 g de ácido fosfomolibdico e 1 g de sulfato cérico para um balão volumétrico de 100 mL, dissolver e diluir com metanol até o volume.
Análise
Amostras: solução padrão e solução de amostra
Remova a placa e seque-a completamente ao ar.Pulverize a placa seca com solução de detecção e coloque a placa em um forno a 120 por 30 min.
Critérios de aceitação: Qualquer mancha secundária da solução de amostra correspondente ao composto A relacionado ao orlistat não é mais intensa do que a mancha correspondente da solução padrão (0,2%).
• Procedimento 2: Limite do Composto B Relacionado ao Orlistat
Solução padrão: 0,025 mg/mL de USP Orlistat Related Compound B RS em cloreto de metileno
Solução de amostra: 50 mg/mL de Orlistat em cloreto de metileno
Solução de amostra adicionada: 50 mg/mL de Orlistat em solução padrão
Sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografia <621>, Adequação do sistema.)
Modo: CG
Detector: ionização de chama
Coluna: sílica fundida de 0,32 mm x 30 m, revestida com uma fase estacionária G27 de 0,25 µm
Temperatura da coluna: Consulte a tabela do programa de temperatura abaixo.
Temperatura inicial () Rampa de temperatura (/min) Temperatura final () Tempo de espera na temperatura final (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatura
Injetor: 270
Detector: 280
Gás de arraste: Hélio
Vazão: 30 mL/min
Proporção de divisão: 10:1
Tamanho da injeção: 2 µL
Adequação do sistema
Amostra: solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 10,0%
Análise
Amostras: solução de amostra e solução de amostra cravada
Calcule a porcentagem do composto B relacionado ao orlistat na porção de Orlistat ingerida:
Resultado = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = resposta de pico do composto B relacionado ao orlistat da solução de amostra
rSP = resposta de pico do composto B relacionado ao orlistat da solução de amostra Spiked
CS = concentração de USP Orlistat Related Compound B RS na solução padrão (mg/mL)
CT = concentração de Orlistat na solução de amostra Spiked (mg/mL)
Critérios de aceitação: NMT 0,05% de composto B relacionado com orlistat é encontrado.
• Procedimento 3
[Nota-Evite o uso de frascos plásticos para o preparo ou contenção de qualquer solução nesta análise.]
Fase móvel, solução padrão e solução de amostra: Prepare conforme indicado no ensaio.
Solução de adequação do sistema: 10 µg/mL de USP Orlistat RS, 0,1 µg/mL de USP Orlistat Related Compound C RS e 0,25 µg/mL de USP Orlistat Related Compound D RS em fase móvel
Sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografia <621>, Adequação do sistema.)
Proceda conforme indicado no ensaio, exceto para cromatografia da solução de adequação do sistema.
Adequação do sistema
Amostra: solução de adequação do sistema
Requisitos de adequação
Relação sinal-ruído: NLT 3 para os picos do composto C relacionado ao orlistat e do composto D relacionado ao orlistat
Desvio padrão relativo: NMT 10,0% para o pico de orlistat
Análise
Amostras: solução padrão e solução de amostra
Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Orlistat tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = resposta de pico para cada impureza individual da solução de amostra
rS = resposta de pico de USP Orlistat RS da solução padrão
CS = concentração de USP Orlistat RS na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Orlistat na solução de amostra (mg/mL)
F = fator de resposta relativo, conforme indicado na Tabela de impurezas 1
Critérios de aceitação: Consulte a Tabela de impurezas 1.
Tabela de impurezas 1
Nome Tempo de Retenção Relativo Fator de Resposta Relativo Critérios de Aceitação, NMT (%)
Formilleucina 0,10 4,0 0,2
Composto relacionado com orlistat C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerbe de anel aberto 0,44 1,0 0,2
Composto relacionado ao orlistat D* 0,90 - Calculado em
Procedimento 4
Orlistat anel aberto amidac* 0,90 - Calculado em
Procedimento 4
Orlistat 1.00 - -
d-Leucina orlistatd 1,18 1,0 0,2
Impureza individual não identificada - 1,0 0,1
* Coelutos neste sistema LC, determinados usando o Procedimento 4.
uma N-Formil-l-leucina.
b Ácido (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formilamino-4-metil-pentanoiloxi]-2-hexil-3-hidroxi-hexadecanóico.
c N-Formil-1-leucina (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroxi-3-[1-fenil-R-etilcarbomoil]nonil]-dodecil.
d N-Formil-d-leucina (S)-1-[[(2S,3S)-3-hexil-4-oxo-2-oxetanil]metil]dodecil éster ou enantiômero.
• Procedimento 4: Limite do Composto D Relacionado ao Orlistat
Fase móvel: metanol e água (83:17)
Solução de adequação do sistema: 4 mg/mL de USP Orlistat RS e 2,4 µg/mL de USP Orlistat Related Compound D RS em acetonitrila, respectivamente
Solução padrão: 5,0 mg/mL de USP Orlistat RS em acetonitrila
Solução de amostra: 5,0 mg/mL de Orlistat em acetonitrila
Sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografia 621, Adequação do sistema.)
Modo: CL
Detector: 205 nm
Coluna: 4,0 mm × 25 cm;Gaxeta de 5 µm L7
Vazão: 0,6 mL/min
Tamanho da injeção: 20 µL
Adequação do sistema
Amostra: solução de adequação do sistema
Requisitos de adequação
Relação sinal-ruído: NLT 3 para o pico D do composto relacionado ao orlistat
Desvio padrão relativo: NMT 10,0% para o pico de orlistat
Análise
Amostras: solução padrão e solução de amostra
Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Orlistat tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = resposta de pico para cada impureza individual da solução de amostra
rS = resposta de pico para USP Orlistat RS da solução padrão
CS = concentração de USP Orlistat RS na solução padrão (µg/mL)
CU = concentração de Orlistat na solução de amostra (µg/mL)
F = fator de resposta relativo conforme obtido na Tabela de impurezas 2
Critérios de aceitação: Consulte a Tabela de impurezas 2.
Tabela de impurezas 2
Nome Tempo de Retenção Relativo Fator de Resposta Relativo Critérios de Aceitação, NMT (%)
Composto D relacionado ao orlistat 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1.00 - -
Orlistat anel aberto amida 1,25 4,3 0,1
um éster de N-formil-1-leucina (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroxi-3-[1-fenil-R-etilcarbomoil]nonil]-dodecil.
• Procedimento 5: Limite do Composto E Relacionado ao Orlistat
Tampão: solução de borato 0,4 N, ajustada para um pH de 10,2
Agente derivatizante: solução de o-ftaldeído (OPA).[Observação: se não for possível obter comercialmente, o agente de derivitização pode ser preparado como 1% de ácido 3-mercaptopropiônico e o-ftaldialdeído em solução tampão de borato 0,4 M.]
Solução A: Transferir 4,1 g de acetato de sódio trihidratado e 40 mg de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) para um balão volumétrico de 1 L.Dissolva em 950 mL de água e ajuste com hidróxido de sódio 0,1 N para um pH de 7,2.Diluir com água até o volume, adicionar 2,5 mL de tetrahidrofurano e misturar.Filtre e desgaseifique.
Solução B: Transferir 2,7 g de acetato de sódio trihidratado e 40 mg de EDTA para um balão volumétrico de 1 L.Dissolva em 200 mL de água e ajuste com hidróxido de sódio 0,1 N para um pH de 7,2.Adicionar 800 mL de acetonitrila, filtrar e desgaseificar.
Fase móvel: Veja a tabela de gradientes abaixo.
Tempo (min) Solução A (%) Solução B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3,3
45 96,7 3,3
Solução padrão: Transfira uma quantidade pesada de cerca de 0,2 mg do composto USP Orlistat Related E RS para um frasco de espaço livre de 20 mL.Adicione 10 mL de hidróxido de sódio 4 N e feche o frasco.Aqueça o frasco a 100 por 1 h, depois deixe esfriar até a temperatura ambiente.Transfira 2 mL da solução resultante para um balão volumétrico de 50 mL e complete o volume com água.A 0,5 mL desta solução adicionar 2,0 mL de Tampão e 0,5 mL de Derivatizante.
Solução de amostra: Proceda conforme indicado para a solução padrão, mas em vez disso use 25 mg de Orlistat para substituir os 0,2 mg de USP Orlistat Related Compound E RS.
Sistema cromatográfico
(Consulte Cromatografia <621>, Adequação do sistema.)
Modo: CL
Detector: Fluorescência 340 nm (excitação);450 nm (emissão)
colunas
Guarda: 2,1 mm × 2 cm;Gaxeta de 50 µm L1
Analítico: 2,1 mm × 20 cm;embalagem L1
Vazão: 0,5 mL/min
Tamanho da injeção: 20 µL
Adequação do sistema
Amostra: solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 6,0% para o pico E do composto relacionado ao orlistat
Análise
Amostras: solução padrão e solução de amostra
Calcule a porcentagem dessa impureza na porção de Orlistat tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = resposta de pico para o composto E relacionado ao orlistat na solução de amostra
rS = resposta de pico para USP Orlistat Related Compound E RS na solução padrão
CS = concentração de Composto E RS Relacionado ao Orlistat USP na solução Padrão (mg/mL)
CU = concentração de Orlistat na solução de amostra (mg/mL)
Critérios de aceitação
Impureza individual: NMT 0,2% do composto E relacionado ao orlistat é encontrado.
Total de impurezas: NMT 1,0% do total de impurezas é encontrado, sendo adicionados os resultados para os Procedimentos 1, 2, 3, 4 e 5.
TESTES ESPECÍFICOS
• Rotação Óptica, Rotação Específica <781>
Solução de amostra: 30 mg/mL em álcool desidratado
Critérios de aceitação: Entre -48,0 e -51,0, a 20
• Determinação de Água, Método Ic <921>: NMT 0,2%
REQUISITOS ADICIONAIS
• Embalagem e Armazenamento: Conservar em recipientes bem fechados entre 2 e 8℃.
• Padrões de referência da USP <11>
USP Orlistate RS
Composto A RS Relacionado ao Orlistat da USP
Composto B RS Relacionado ao Orlistat da USP
Composto C RS Relacionado ao Orlistat da USP
Composto D RS Relacionado ao Orlistat da USP
Composto E RS Relacionado ao Orlistat da USP
USP35