Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Ensaio (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Ácido benzenopropanóico, -(benzoilamino)--hidroxi-, 6,12b-bis(acetiloxi)-12-(benzoiloxi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahidro-4,11-di-hidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-5-oxo-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-il éster, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahidro-4,6, 9,11,12,12b-hexahidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-ona 6, 12b-diacetato, 12-benzoato, 9-éster com (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina [33069-62-4].
Paclitaxel contém não menos que 97,0 por cento e não mais que 102,0 por cento de C47H51NO14, calculado na base anidra, livre de solvente.
[Cuidado-Paclitaxel é citotóxico.Deve-se tomar muito cuidado para evitar a inalação de partículas de Paclitaxel e a exposição da pele a ele.]
Embalagem e armazenamento - Preserve em recipientes fechados e resistentes à luz e armazene em temperatura ambiente controlada.
Rotulagem-A rotulagem indica o tipo de processo usado para produzir o material e o teste de compostos relacionados com o qual o material está em conformidade.
Padrões de referência da USP <11>-
USP Endotoxina RS
USP Paclitaxel RS Clique para ver a estrutura
Composto A RS Relacionado ao Paclitaxel USP
Cefalomanina.
Composto B RS Relacionado ao Paclitaxel USP
10-Desacetil-7-Epipaclitaxel.
Mistura de Impurezas de Paclitaxel USP RS
Mistura de Paclitaxel e os seguintes compostos relacionados: análogo de propilo, cefalomanina, análogo de sec-butilo, análogo de n-butilo, análogo de benzilo, bacatina VI, análogo de pentilo e 7-epipaclitaxel.
Identificação-
A: Absorção de infravermelho <197K>.
B: O tempo de retenção do pico maior no cromatograma da preparação do Ensaio corresponde ao do cromatograma da preparação Padrão, conforme obtido no Ensaio.
Rotação específica 781S: entre 49,0 e 55,0 a 20, calculado na base anidra, sem solvente.
Solução de teste: 10 mg por mL, em metanol.
Testes de enumeração microbiana <61> e Testes para microrganismos especificados <62>-A contagem microbiana aeróbica total não excede 100 cfu por g.Atende aos requisitos dos testes de ausência de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, espécies de Salmonella e Escherichia coli.
Endotoxinas bacterianas 85-Não contém mais de 0,4 Unidade de Endotoxina USP por mg de paclitaxel.
Água, Método Ic <921>: não mais que 4,0%.
Resíduo na ignição <281>: não mais que 0,2%.
Metais pesados, Método II <231>: 0,002%.
Compostos Relacionados-
teste 1 (para material rotulado como isolado de fontes naturais) - Se o material estiver em conformidade com este teste, a rotulagem indica que ele atende ao Teste 1 de compostos relacionados à USP.
Diluente-Prepare conforme indicado no Ensaio.
Solução A-Preparar acetonitrila filtrada e desgaseificada.
Solução B-Preparar água filtrada e desgaseificada.
Fase móvel - Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico.Faça ajustes, se necessário (consulte Adequação do sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema - Dissolva quantidades pesadas com precisão de USP Paclitaxel Related Compound A RS e USP Paclitaxel Related Compound B RS em metanol para obter uma solução com concentrações conhecidas de cerca de 10 µg de cada por mL.Transferir 5,0 mL desta solução para balão volumétrico de 50 mL, diluir com Diluente até o volume e misturar.
Solução padrão - Dissolva, com o auxílio de sonicação, uma quantidade precisamente pesada de USP Paclitaxel RS em Diluente e dilua quantitativamente e gradualmente, se necessário, com Diluente para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 5 µg por mL.
Solução de teste-Use a preparação de ensaio.
Sistema cromatográfico (consulte Cromatografia <621>) - O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227 nm e uma coluna de 4,6 mm × 25 cm que contém L43 de empacotamento de 5 µm.A taxa de fluxo é de cerca de 2,6 mL por minuto.A temperatura da coluna é mantida a 30 ºC. O cromatógrafo é programado da seguinte forma.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0–35 35 65 isocrático
35–60 35®80 65®20 gradiente linear
60–70 80®35 20®65 gradiente linear
70–80 35 65 isocraticCromatografia da solução de adequação do sistema e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,78 para o composto A relacionado ao paclitaxel e 0,86 para o composto B relacionado ao paclitaxel (em relação ao tempo de retenção para o paclitaxel obtido de a solução de Teste);e a resolução, R, entre o composto A relacionado com paclitaxel e o composto B relacionado com paclitaxel não é inferior a 1,0.Faça a cromatografia da solução padrão e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: o desvio padrão relativo para injeções repetidas não é superior a 2,0%.
Procedimento-Injete um volume (cerca de 15 µL) da solução de teste no cromatógrafo, registre o cromatograma e meça as áreas dos picos principais.Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
100(Sex / rU)
em que F é o fator de resposta relativo para cada pico de impureza (consulte a Tabela 1 para obter os valores);ri é a área de pico para cada impureza individual;e rU é a área do pico para o paclitaxel.
tabela 1
Tempo de retenção relativo Fator de resposta relativo (F) Limite de nome (%)
0,24 1,29 Bacatina III 0,2
0,53 1,00 10-Desacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanina (composto A relacionado ao Paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Diidrocefalomanina a21
0,86 1,00 10-Desacetil-7-epipaclitaxel (composto B relacionado ao paclitaxel) 0,5
1,10 1,00 Benzil análogo3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Desidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomanina 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 A resolução pode ser incompleta para esses picos, dependendo das quantidades relativas presentes;a soma de a1 e a2 não é superior a 0,5%.
2 A resolução pode ser incompleta para esses picos, dependendo das quantidades relativas presentes;a soma de b1 e b2 não é superior a 0,5%.
3 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado, análogo de benzila:Bacatina III 13-éster com ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)propanóico.
Além de não exceder os limites para impurezas relacionadas ao paclitaxel na Tabela 1, não é encontrado mais de 0,1% de qualquer outra impureza única;e não mais do que 2,0% do total de impurezas é encontrado.
teste 2 (para material rotulado como produzido por um processo semissintético)— Se o material estiver em conformidade com este teste, a rotulagem indica que ele atende ao Teste 2 de compostos relacionados à USP.
Diluente-use acetonitrila.
Solução A-Use uma mistura filtrada e desgaseificada de água e acetonitrila (3:2).
Solução B-Use acetonitrila filtrada e desgaseificada.
Fase móvel - Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico.Faça ajustes, se necessário (consulte Adequação do sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema - Dissolva quantidades pesadas com precisão de USP Paclitaxel RS e USP Paclitaxel Related Compound B RS em diluente, agitando e sonicando se necessário, para obter uma solução com concentrações conhecidas de cerca de 0,96 mg e 0,008 mg por mL, respectivamente.
Solução de teste-Transfira cerca de 10 mg de Paclitaxel, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 10 mL, dissolva e dilua com Diluente até o volume, agitando e sonicando se necessário, e misture.
Sistema cromatográfico (consulte Cromatografia 621)— O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227 nm e uma coluna de 4,6 mm × 15 cm que contém L1 de empacotamento de 3 µm.A taxa de fluxo é de cerca de 1,2 mL por minuto.A temperatura da coluna é mantida a 35 ºC. O cromatógrafo é programado da seguinte forma.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0-20 100 0 isocrático
20-60 100®10 0®90 gradiente linear
60-62 10®100 90®0 gradiente linear
62-70 100 0 isocráticoCromatografia da solução de adequação do sistema e registro das respostas de pico conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,94 para o composto B relacionado ao paclitaxel e 1,0 para o paclitaxel;a resolução, R, entre o composto B relacionado com paclitaxel e o paclitaxel não é inferior a 1,2;e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (cerca de 15 µL) do diluente e da solução de teste no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas de todos os picos.Ignore quaisquer picos devidos ao diluente.Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
100(sex/rs)
em que F é o fator de resposta relativo para cada impureza (ver Tabela 2 para valores);ri é a área de pico para cada impureza obtida da solução de teste;e rs é a soma das áreas de todos os picos obtidos da solução Teste.
mesa 2
Tempo de retenção relativo Fator de resposta relativo (F) Limite de nome (%)
0,11 1,24 10-Desacetilbacatina III 0,1
0,20 1,29 Bacatina III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradante2 0,1
0,47 1,00 10-Desacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaclitaxel-2-pentenoato 0,7
0,921 1,00 Anel oxetano aberto, acetil e benzoíla migraram 2 x1
0,921 1,00 10-acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Desacetil-7-epipaclitaxel (composto B relacionado ao paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-bacatina III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 A resolução pode ser incompleta para esses picos, dependendo das quantidades relativas presentes;a soma de x1, x2 e x3 não é maior que 0,4%.
2 Os seguintes nomes químicos são atribuídos aos compostos relacionados Fotodegradante;Anel oxetano aberto, acetil e benzoil migrados;e 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradante
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloxi-5,13-di-hidroxi-4,16,17,17-tetrametil-8-oxa- 3-oxo-12-fenilcarboniloxipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoato
Anel oxetano aberto, acetil e benzoíla migraram
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloxi-1,2,4,7-tetrahidroxi-8,12,15,15-tetrametil-9-oxo- 4-(fenilcarboniloximetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoato
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Bacatina III 13-éster com ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanóico, 10-éster com (2S,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino) ) ácido propanóico
Além de não exceder os limites para impurezas relacionadas ao paclitaxel na Tabela 2, não é encontrado mais de 0,1% de qualquer outra impureza única;e não mais do que 2,0% do total de impurezas é encontrado.
teste 3 (para material rotulado como produzido por um processo de fermentação de células vegetais)— Se o material estiver em conformidade com este teste, a rotulagem indica que ele atende ao Teste 3 de compostos relacionados à USP.
Solução A-Prepare uma mistura filtrada e desgaseificada de água e acetonitrila (3:2).
Solução B-Preparar acetonitrila filtrada e desgaseificada.
Fase móvel - Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico.Faça ajustes, se necessário (consulte Adequação do sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema - Dissolver USP Paclitaxel Impurity Mixture RS em acetonitrila, sonicando se necessário, para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 1 mg por mL.
Solução padrão - Dissolva uma quantidade pesada com precisão de USP Paclitaxel RS em acetonitrila, sonicando se necessário, para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 1 mg por mL.
Solução de teste-Transfira cerca de 10 mg de Paclitaxel, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 10 mL.Dissolva e dilua com acetonitrila até o volume, sonicando se necessário, e misture.
Sistema cromatográfico (consulte Cromatografia 621)— O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227 nm e uma coluna de 4,6 mm × 15 cm que contém L1 de empacotamento de 3 µm.A taxa de fluxo é de cerca de 1,2 mL por minuto.O cromatógrafo é programado da seguinte forma.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0-28 100 0 isocrático
28-33 100®98 0®2 gradiente linear
33–58 98®10 2®90 gradiente linear
58-60 10 90 isocrático
60-63 10®100 90®0 gradiente linear
63-70 100 0 isocraticCromatografia da solução de adequação do sistema e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: a resolução, R, entre o paclitaxel e o análogo de benzila não é inferior a 1,8.Faça a cromatografia da solução padrão e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: o desvio padrão relativo para injeções repetidas não é superior a 2,0%.[nota—Para fins de identificação do pico, os tempos de retenção relativos aproximados são fornecidos na Tabela 3. Os tempos de retenção relativos são medidos em relação ao Paclitaxel.]
Tabela 3
Limite de tempo de retenção relativo de nome (%)
Propil análogo1 0,54 0,2
Cefalomanina (composto A relacionado ao Paclitaxel) 0,76 0,5
sec-Butil análogo2 0,81 0,2
n-Butil análogo3 0,89 0,1
Benzil análogo 1,10 0,4
Bacatina VI 1,23 0,2
Pentil análogo4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado Propil análogo: Bacatina III 13-éster com ácido (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropanóico.
2 O seguinte nome químico é atribuído ao composto análogo de sec-butila: 13-éster de bacatina III com ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanóico.
3 O seguinte nome químico é atribuído ao composto análogo de n-butila: Bacatina III 13-éster com ácido (2S,3S)-2-hidroxi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanóico.
4 O seguinte nome químico é atribuído ao composto análogo de Pentil:Bacatina III 13-éster com ácido (2R,3S)-3-(hexanoilamino)-2-hidroxi-3-fenilpropanóico.
Procedimento-Injete um volume (cerca de 12 µL) da solução de teste no cromatógrafo, registre o cromatograma e meça as áreas de todos os picos.Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
100(ri/rU)
em que ri é a resposta de cada impureza individual;e rU é a soma das áreas de todos os picos obtidos da solução Teste.Além de não exceder os limites para impurezas relacionadas ao paclitaxel na Tabela 3, não é encontrado mais de 0,1% de qualquer outra impureza única;e não mais do que 2,0% do total de impurezas é encontrado.
Ensaio-
Diluente-Preparar uma mistura de metanol e ácido acético (200:1).
Fase móvel-Prepare uma mistura filtrada e desgaseificada de água e acetonitrila (11:9).Faça ajustes, se necessário (consulte Adequação do sistema em Cromatografia 621).
Preparação padrão - Dissolva, usando sonicação, se necessário, uma quantidade pesada com precisão de USP Paclitaxel RS em Diluente e dilua quantitativamente e gradualmente, se necessário, com Diluente para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 1 mg por mL.
Preparação do ensaio - Transfira cerca de 10 mg de Paclitaxel, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 10 mL.Dissolva em Diluente, usando sonicação se necessário, dilua com Diluente até o volume e misture.
Sistema cromatográfico (consulte Cromatografia <621>) - O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227 nm e uma coluna de 4,6 mm × 25 cm que contém L43 de empacotamento de 5 µm.A taxa de fluxo é de cerca de 1,5 mL por minuto.Faça a cromatografia da preparação padrão e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: o fator de cauda está entre 0,7 e 1,3;e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 1,5%.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (cerca de 10 µl) da preparação padrão e da preparação de ensaio no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas dos picos principais.Calcule a quantidade, em mg, de C47H51NO14 na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
10C(rU / rS)
em que C é a concentração, em mg por mL, de USP Paclitaxel RS na preparação Padrão;e rU e rS são as respostas de pico para paclitaxel obtidas a partir da preparação de ensaio e da preparação padrão, respectivamente.