Ácido ursodesoxicólico (UDCA) CAS 128-13-2 Ensaio 99,0~101,0%

ÁCIDO URSODEOXICÓLICO
C24H40O4 Senhor 392,6[128-13-2]
DEFINIÇÃO
Ácido 3α,7β-dihidroxi-5β-colan-24-óico.
Teor: 99,0 por cento a 101,0 por cento (substância seca).
PERSONAGENS
Aparência: pó branco ou quase branco.
Solubilidade: praticamente insolúvel em água, facilmente solúvel em etanol (96 por cento), ligeiramente solúvel em acetona, praticamente insolúvel em cloreto de metileno.
pf: cerca de 202 ℃.
IDENTIFICAÇÃO
Primeira identificação: A.
Segunda identificação: B, C.
A. Espectrofotometria de absorção no infravermelho (2.2.24).
Comparação: Ácido Ursodesoxicólico CRS.
B. Examine os cromatogramas obtidos no teste de impureza C.
Resultados: a mancha principal do cromatograma obtido com a solução teste (b) é semelhante em posição, cor e tamanho à mancha principal do cromatograma obtido com a solução referência (a).
C. Dissolver cerca de 10 mg em 1 mL de ácido sulfúrico R. Adicionar 0,1 mL da solução de formol R e deixar em repouso por 5 min.Adicionar 5 mL de água R. A suspensão obtida é azul-esverdeada.
TESTES
Rotação óptica específica (2.2.7): + 58,0 a + 62,0 (substância seca).
Dissolver 0,500 g em etanol anidro R e diluir para 25,0 mL com o mesmo solvente.
Impureza C. Cromatografia em camada fina (2.2.27).
Mistura de solventes: água R, acetona R (10:90 V/V).
Solução de teste (a).Dissolver 0,40 g da substância a ser examinada na mistura de solventes e diluir para 10 mL com a mistura de solventes.
Solução de teste (b).Dilua 1 mL da solução de teste (a) para 10 mL com a mistura de solventes.
Solução de referência (a).Dissolva 40 mg de ácido ursodesoxicólico CRS na mistura de solventes e dilua para 10 mL com a mistura de solventes.
Solução de referência (b).Dissolva 20 mg de ácido litocólico CRS (impureza C) na mistura de solventes e dilua para 10,0 mL com a mistura de solventes (solução A).Dilua 2,0 mL desta solução para 100,0 mL com a mistura de solventes.
Solução de referência (c).A 5 mL da solução A adicionar 10 mg de ácido quenodesoxicólico CRS (impureza A) e diluir para 50 mL com a mistura de solventes.
Placa: placa de gel de sílica TLC R.
Fase móvel: ácido acético glacial R, acetona R, metilenocloreto R (1:30:60 V/V/V).
Aplicação: 5μL.
Desenvolvimento: mais de 2/3 da placa.
Secagem: a 120 ℃ por 10 min.
Detecção: pulverize imediatamente com uma solução de 47,6 g/L de ácido fosfomolibdico R em uma mistura de 1 volume de ácido sulfúrico R e 20 volumes de ácido acético glacial R e aqueça a 120 ℃ até que apareçam manchas azuis em um fundo mais claro.
Adequação do sistema: solução de referência (c):
- o cromatograma mostra 2 pontos principais claramente separados.
Limite: solução de teste (a):
- impureza C: qualquer mancha devido à impureza C não é mais intensa que a mancha principal no cromatograma obtido com a solução de referência (b) (0,1 por cento).
Substâncias relacionadas.Cromatografia líquida (2.2.29).
Mistura de solventes: metanol R, fase móvel (10:90 V/V).
Solução de teste.Dissolver 60 mg da substância a ser examinada na mistura de solventes e diluir para 20,0 mL com a mistura de solventes.
Solução de referência (a).Dissolva o conteúdo de um frasco de Ácido Ursodesoxicólico para adequação do sistema CRS (contendo impurezas A e H) em 1,0 mL da mistura de solventes.
Solução de referência (b).Dilua 1,0 mL da solução de teste para 100,0 mL com a mistura de solventes.Dilua 1,0 mL desta solução para 10,0 mL com a mistura de solventes.
Coluna:
-tamanho: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-fase estacionária: gel de sílica octadecilsilil com tampa final paracromatografia R (5 μm);
- temperatura: 40 ℃ ± 1 ℃.
Fase móvel: misturar 30 volumes de acetonitrila R, 37 volumes de uma solução 0,78 g/L de dihidrogenofosfato de sódio R ajustado para pH 3 com ácido fosfórico R e 40 volumes de metanol R.
Taxa de fluxo: 0,8 mL/min.
Detecção: refratômetro a 35 ± 1℃.
Injeção: 150 μL.
Tempo de execução: 4 vezes o tempo de retenção do Ácido Ursodesoxicólico.
Identificação de impurezas: utilizar o cromatograma fornecido com ácido ursodesoxicólico para adequação do sistema CRS e o cromatograma obtido com a solução de referência (a) para identificar os picos devidos às impurezas A e H.
Retenção relativa com referência ao ácido ursodesoxicólico (tempo de retenção = cerca de 14 min): impureza H = cerca de 0,9;impureza A = cerca de 2,8.
Adequação do sistema: solução de referência (a):
-resolução: mínimo de 1,5 entre os picos devido à impureza H e ácido ursodesoxicólico.
Limites:
- impureza A: não mais que 10 vezes a área do pico principal no cromatograma obtido com a solução de referência (b) (1,0 por cento);
-impurezas não especificadas: para cada impureza, não mais que a área do pico principal no cromatograma obtido com a solução de referência (b) (0,10 por cento);
- total: não mais que 15 vezes a área do pico principal no cromatograma obtido com a solução de referência (b) (1,5 por cento);
-desconsiderar limite: 0,5 vezes a área do pico principal no cromatograma obtido com a solução de referência (b) (0,05 por cento).
Metais pesados ​​(2.4.8): máximo 20 ppm.
1,0 g está de acordo com o teste C. Prepare a solução de referência usando 2 mL de solução padrão de chumbo (10 ppm Pb) R.
Perda na secagem (2.2.32): máximo 1,0 por cento, determinado em 1.000 g por secagem em estufa a 105 ℃.
Cinzas sulfatadas (2.4.14): máximo 0,1 por cento, determinado em 1,0 g.
ENSAIO
Dissolver 0,350 g em 50 mL de etanol (96 por cento) R, previamente neutralizado a 0,2 mL de solução de fenolftaleína R. Adicionar 50 mL de água R e titular com hidróxido de sódio 0,1 M até obter coloração rosa.
1 mL de hidróxido de sódio 0,1 M é equivalente a 39,26 mg de C24H40O4.
impurezas
Impurezas especificadas: A, C.
Outras impurezas detectáveis ​​(as seguintes substâncias, se presentes em um nível suficiente, seriam detectadas por um ou outro dos testes na monografia. Elas são limitadas pelo critério de aceitação geral para outras impurezas/não especificadas e/ou pela monografia geral Substâncias para uso farmacêutico (2034). Portanto, não é necessário identificar essas impurezas para demonstração de conformidade. Ver também 5.10.
Controle de impurezas em substâncias de uso farmacêutico): B, D, E, F, G, H, I.
A. Ácido 3α,7α-di-hidroxi-5β-colan-24-óico (ácido quenodesoxicólico),
B. ácido 3α,7α,12α-trihidroxi-5β-colan-24-óico (ácido cólico),
C. ácido 3α-hidroxi-5β-colan-24-óico (ácido litocólico),
D. Ácido 3α,7β,12α-trihidroxi-5β-colan-24-óico (ácido ursocólico),
E. Ácido 3α,12α-di-hidroxi-5β-colan-24-óico (ácido desoxicólico),
F. Ácido 3α-hidroxi-7-oxo-5β-colan-24-óico,
G. metil 3α,7β-di-hidroxi-5β-colan-24-oato,
H. Ácido 3β,7β-di-hidroxi-5β-colan-24-óico,
I. 5β-colano-3α,7β,24-triol.