Clorhidrat de gemcitabină CAS 122111-03-9 Standard API USP35

Clorhidrat de gemcitabină
C9H11F2N3O4.HCI 299,66
Citidină, 2′-deoxi-2′,2′-difluro-, monoclorhidrat.
Monoclorhidrat de 2′-deoxi-2′,2′-difluorocitidină (izomer p) [122111-03-9].
» Clorhidratul de gemcitabină conține nu mai puțin de 97,5 la sută și nu mai mult de 101,5 la sută C9H11F2N3O4·HCl, calculat pe baza de fapt.
[Atenție-Clorhidratul de gemcitabină este un agent citotoxic puternic.Trebuie avută mare grijă pentru a preveni inhalarea particulelor și expunerea pielii la acestea.]
Ambalare și depozitare-Conservați în recipiente etanșe.
Etichetare - Acolo unde este destinat utilizării la prepararea formelor de dozare injectabile, eticheta afirmă că este steril sau trebuie supus unei prelucrări ulterioare în timpul preparării formelor de dozare injectabile.
Standarde de referință USP <11>-
USP Citozină RS
USP Endotoxin RS
USP Clorhidrat de gemcitabină RS
Identificare-
A: Absorbție în infraroșu <197K>.
B: Îndeplinește cerințele testelor pentru clorură <191>.
Rotație specifică <781S>: între +43 și +50, la 20.
Soluție de testare: 10 mg per ml.
pH <791>: între 2,0 și 3,0, într-o soluție care conține 10 mg per ml.
Rezidu la aprindere <281>: nu mai mult de 0,1%.
Metale grele, Metoda I <231>: 0,001%.
Puritatea cromatografică-
Soluția A- Se procedează conform instrucțiunilor pentru faza mobilă din test.
Soluția B-Se prepară metanol filtrat și degazat.
Faza mobilă - Folosiți amestecuri variabile de Soluție A și Soluție B conform instrucțiunilor din sistemul cromatografic.Efectuați ajustări, dacă este necesar (consultați Adecvarea sistemului la Cromatografie 621).
Soluție de adecvare a sistemului - Procedați conform instrucțiunilor din Test.
Soluție standard - Se dizolvă o cantitate cântărită cu precizie de USP Gemcitabină Clorhidrat RS și USP Citozină RS în apă și se diluează cantitativ și treptat, dacă este necesar, pentru a obține o soluție cu o concentrație cunoscută de aproximativ 2 µg per ml din fiecare.
Soluție de testare - Se transferă aproximativ 50 mg de clorhidrat de gemcitabină, cântărite cu precizie, într-un balon cotat de 25 ml, se dizolvă și se diluează cu apă până la volum și se amestecă.
Sistem cromatografic (vezi Cromatografia 621) - Se procedează conform instrucțiunilor din Test.Cromatograful este programat după cum urmează.
Timp (minute) Soluție A (%) Soluție B (%) Eluare
0–8 97 3 izocratic
8–13 97®50 3®50 gradient liniar
13–20 50 50 izocratic
20–25 50®97 50®3 reechilibrare
Se cromatografiază soluția de adecvare a sistemului și se înregistrează răspunsurile de vârf conform indicațiilor pentru Procedură: timpii de retenție relativi sunt de aproximativ 0,5 pentru gemcitabină -anomer și 1,0 pentru gemcitabină;rezoluția, R, între gemcitabină -anomer și gemcitabină nu este mai mică de 8,0;iar factorul de decantare pentru gemcitabină nu este mai mare de 1,5.Se cromatografiază soluția standard și se înregistrează răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: timpii relativi de retenție sunt de aproximativ 0,1 pentru citozină și 1,0 pentru gemcitabină;abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2,0%.
Procedură - Injectați separat un volum (aproximativ 20 µL) de soluție standard și soluție de testare în cromatograf, înregistrați cromatograma și măsurați toate răspunsurile de vârf.Calculați procentul de citozină din porția de gemcitabină luată cu formula:
2,5(Cc/W)(rt/rs)
în care Cc este concentrația de USP Citozină RS în soluția standard, în µg per ml;W este greutatea, în mg, a Gemcitabinei luate;rt este răspunsul de vârf pentru citozină în soluția de testare;iar rs este răspunsul pentru citozină în soluția standard: nu se găsește mai mult de 0,1% din citozină.Calculați procentul fiecărei impurități, altele decât citozină, în porția de gemcitabină luată cu formula:
2,5(Cs/W)(ri/rs)
în care Cs este concentrația de clorhidrat de gemcitabină USP RS în soluția standard, în µg per ml;W este greutatea, în mg, a Gemcitabinei luate;ri este răspunsul de vârf pentru fiecare impuritate din soluția de testare;și rs este răspunsul datorat gemcitabinei în soluția standard: nu se găsește mai mult de 0,1% de gemcitabină -anomer sau orice altă impuritate individuală;iar suma tuturor impurităților nu este mai mare de 0,2%.Excludeți din suma tuturor impurităților orice vârfuri care sunt sub limita de cuantificare (0,02%).
Alte cerințe-Acolo unde eticheta afirmă că clorhidratul de gemcitabină este steril, acesta îndeplinește cerințele pentru endotoxine bacteriene și sterilitate sub gemcitabină pentru injecție.În cazul în care eticheta afirmă că clorhidratul de gemcitabină trebuie supus unei prelucrări ulterioare în timpul preparării formelor de dozare injectabilă, aceasta îndeplinește cerințele pentru Endotoxine bacteriene din Gemcitabină pentru injecție.
Test-
Faza mobilă - Se prepară o soluție filtrată și degazată care conține 13,8 g de fosfat de sodiu monobazic și 2,5 ml de acid fosforic în 1000 ml de apă.[notă- pH-ul acestei soluții este între 2,4 și 2,6.]
Soluție adecvată pentru sistem - Transferați aproximativ 10 mg de clorhidrat de gemcitabină într-un flacon mic, adăugați 4 ml dintr-o soluție care conține 168 mg de hidroxid de potasiu per ml de metanol, acoperiți strâns și sonicați.Se încălzește la 55°C timp de 6 până la 16 ore, se lasă să se răcească și se transferă conținutul într-un balon cotat de 100 ml cu spălări succesive cu acid fosforic 1% (v/v).Se diluează cu acid fosforic 1% până la volum și se amestecă.[notă-Această soluție conține aproximativ 0,02 mg per ml de gemcitabină α-anomer.]
Preparat standard - Se dizolvă o cantitate cântărită cu precizie de USP Gemcitabin Hydrochloride RS în apă și se diluează cantitativ, și treptat, dacă este necesar, cu apă pentru a obține o soluție cu o concentrație cunoscută de aproximativ 0,1 mg per ml.
Pregătirea testului - Se transferă aproximativ 20 mg de clorhidrat de gemcitabină, cântărite cu precizie, într-un balon cotat de 200 ml, se dizolvă și se diluează cu apă până la volum și se amestecă.
Sistem cromatografic (vezi Cromatografia <621>)-Cromatograful lichid este echipat cu un detector de 275 nm și o coloană de 4,6 mm × 25 cm care conține garnitura L7 de 5 µm.Debitul este de aproximativ 1,2 ml pe minut.Cromatografiați soluția de adecvare a sistemului și înregistrați răspunsurile de vârf conform indicațiilor pentru Procedură: rezoluția, R, între anomerul de gemcitabină și gemcitabină nu este mai mică de 8,0;iar factorul de decantare determinat din gemcitabină nu este mai mare de 1,5.Cromatografiați preparatul standard și înregistrați răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 1,0%.
Procedură - Se injectează separat volume egale (aproximativ 20 µL) de preparat standard și preparat de testare în cromatograf, înregistrați cromatogramele și măsurați răspunsurile pentru vârfurile majore.Calculați cantitatea, în mg, de C9H11F2N3O4·HCl în porția de clorhidrat de gemcitabină luată cu formula:
200C(rU / rS)
în care C este concentrația, în mg per ml, a clorhidratului de gemcitabină USP RS din preparatul standard;și rU și rS sunt răspunsurile de vârf obținute din preparatul de testare și, respectiv, din preparatul standard.