Analiza L-triptofan CAS 73-22-3 (H-Trp-OH) 98,5~101,5% Calitate înaltă din fabrică

L-triptofan (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) Metoda de testare AJI 97
Identificare: Comparați spectrul de absorbție în infraroșu al probei cu cel al standardului prin metoda discului cu bromură de potasiu.
Rotație specifică [α]20/D: Probă uscată, C=1, H2O se dizolvă prin încălzire
Starea soluției (transmisie): 0,5 g în 20 ml de 2 mol/L HCl, spectrofotometru, 430 nm, grosime celulei de 10 mm.
Clorura (Cl): 0,7 g, A-1, ref: 0,40 ml de 0,01 mol/L HCl
Amoniu (NH4): B-2
Sulfat (SO4): 1,2 g, (1), ref: 0,50 ml de 0,005 mol/L H2SO4
Fier (Fe): 0,75 g, (2), ref: 1,5 ml de Iron Std.(0,01 mg/ml)
Metale grele (Pb): 2,0 g, (4), ref: 2,0 ml de Pb Std.(0,01 mg/ml)
Arsenic (As2O3): 2,0 g, (1), ref: 2,0 ml de As2O3 Std.
Alți aminoacizi: H2O, se dizolvă prin încălzire (40℃) Probă de testare: 50μg, A-6-a, control: L-Trp 0,25μg
Pierdere la uscare: la 105℃ timp de 3 ore.
Reziduuri la aprindere (sulfatate): Testul AJI 13
Test: Probă uscată, 200 mg, (1), 3 ml acid formic, 50 ml acid acetic glacial, 0,1 mol/L HCLO4 1 ml=20,423 mg C11H12N2O2
Test pH: 1,0 g în 100 ml de H2O

L-triptofan (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) Metoda de testare USP35
DEFINIȚIE
Triptofanul conține NLT 98,5% și NMT 101,5% C11H12N2O2, ca L-triptofan, calculat pe bază uscată.
IDENTIFICARE
A. ABSORBIȚIA INFRAROSII <197K>
TEST
PROCEDURĂ
Soluție de probă: Puneți 200 mg de triptofan într-un balon de 125 ml.Se dizolvă într-un amestec de 3 ml de acid formic și 50 ml de acid acetic glacial.
Analiză: Se titrează cu acid percloric 0,1 N VS, determinându-se potențiometric punctul final.Efectuați o determinare în gol și faceți orice corecție necesară (a se vedea Titrimetria <541>).Fiecare mL de acid percloric 0,1 N este echivalent cu 20,42 mg de C11H12N2O2.
Criterii de acceptare: 98,5%~101,5% pe bază uscată
IMPURITĂŢI
Impurități anorganice
Aprinderea reziduurilor <281>: NMT 0,1%
CLORURĂ ȘI SULFAT, Clorura <221>: O porție de 0,73 g nu prezintă mai multă clorură decât corespunde la 0,50 mL de acid clorhidric 0,020 N (0,05%).[NOTĂ-Încălziți ușor preparatul de probă pentru a se dizolva, dacă este necesar.]
CLORURĂ ȘI SULFAT, Sulfat <221>: O porție de 0,33 g nu prezintă mai mult sulfat decât corespunde la 0,10 mL de acid sulfuric 0,020 N (0,03%).[NOTĂ-Încălziți ușor preparatul de probă pentru a se dizolva, dacă este necesar.
FIER <241>: NMT 30ppm
METALE GRE, Metoda II <231>: NMT 15 ppm
Impurități organice
PROCEDURA 1
Soluția A: acid trifluoracetic în apă (1 ml/L)
Soluția B: acid trifluoracetic într-o soluție de acetonitril și apă (80:20) (soluție de acid trifluoracetic 1 ml/L)
Soluție standard: 1,0 mg/L fiecare de compus A RS înrudit cu triptofan USP și compus B înrudit cu triptofan USP RS în apă
Probă de soluție: 10,0 mg/mL de triptofan în apă
Soluție adecvată pentru sistem: 1,0 mg/L de compus B RS înrudit cu triptofan USP în apă
Faza mobilă: vezi tabelul de gradient de mai jos.

Sistem cromatografic (vezi Cromatografia <621>, Adecvarea sistemului.)
Mod: LC
Detector: UV 220 nm
Coloană: 4,6 mm × 25 cm;garnitură de 5 µm L1
Temperatura coloanei: 30°
Debit: 1 ml/min
Dimensiunea injecției: 20 µL
Adecvarea sistemului
Exemplu: soluție de adecvare a sistemului
Cerință de adecvare
Abatere standard relativă: NMT 5,0%
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Calculați procentul fiecărei impurități nespecificate din porția de triptofan luată:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = aria de vârf a fiecărei impurități nespecificate din soluția de probă
rS = aria de vârf a compusului B înrudit cu triptofan în soluția standard
CS = concentrația de compus B înrudit cu triptofan USP RS în soluția standard (µg/mL)
CU = concentrația de triptofan în soluția de probă (µg/mL)
Criteriul de acceptare
Total impurități 1: NMT 0,01% din totalul impurităților eluate înainte de vârful triptofanului
Total impurități 2: NMT 0,03% din totalul impurităților eluând după vârful triptofanului.[NOTĂ-Excludeți vârful pentru compusul B înrudit cu triptofan.]
Compusul A înrudit cu triptofan: Dacă se observă un vârf pentru compusul A înrudit cu triptofan în soluția de probă, atunci efectuați testul pentru Procedura 2: Limita compusului A înrudit cu triptofan, de mai jos.
PROCEDURA 2: LIMITA COMPUSULUI INFERIT A TRIPTOFANului A
Soluție A: fosfat de sodiu monobazic 18 mM, filtrat și degazat (pH 2,5) și acetonitril (9:1)
Soluția B: fosfat de sodiu monobazic 10 mM, filtrat și degazat (pH 2,5) și acetonitril (1:1)
Soluția C: Acetonitril în apă (7:3)
Soluție standard: 0,1 mg/L de compus A RS înrudit cu triptofan USP în apă
Soluție de probă: 10,0 mg/mL de triptofan în apă
Faza mobilă: vezi tabelul de gradient de mai jos

Sistem cromatografic
(Consultați Cromatografia <621>, Adecvarea sistemului.)
Mod: LC
Detector: UV 216 nm
Coloană: 3,9 mm × 15 cm;garnitură de 5 µm L1
Temperatura coloanei: 30°
Debit: 1 ml/min
Dimensiunea injecției: 20 µL
Adecvarea sistemului
Eșantion: soluție standard
Cerință de adecvare
Abatere standard relativă: NMT 5,0%
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Calculați procentul de compus înrudit cu triptofan
A în porțiunea de triptofan luată:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = aria de vârf a compusului A înrudit cu triptofan din soluția Probă
rS = aria de vârf a compusului A înrudit cu triptofan în soluția standard
CS = concentrația de compus A înrudit cu triptofan USP RS în soluția standard (µg/mL)
CU = concentrația de triptofan în soluția de probă (µg/mL)
Criterii de acceptare: NMT 10 ppm
TESTE SPECIFICE
ROTATIE OPTICA, Rotatie specifica <781S>: de la -29,4° la -32,8°
Soluție de probă: 10 mg/mL, în apă.[NOTĂ-Se încălzește ușor pentru a se dizolva, dacă este necesar.]
PH <791>: 5,5~7,0, într-o soluție (1 din 100)
PIERDERE LA USCARE <731>: Uscați o probă la 105° timp de 3 ore: pierde NMT 0,3% din greutatea sa.
CERINȚE SUPLIMENTARE
AMBALARE ȘI DEPOZITARE: A se păstra în recipiente bine închise
STANDARDE DE REFERINȚĂ USP <11>
USP L-triptofan RS
Compusul A înrudit cu triptofan USP RS
Acid 3,3′-[Etilidenbis(1 H-indol-1,3-diil)]bis[2S)-2-aminopropanoic].C24H26N4O4 432,49
Compus B înrudit cu triptofan USP RS
Acid 2-acetamido-3-(1 H-indol-3-il)propanoic.C13H14N2O3 246,3