Orlistat CAS 96829-58-2 API Puritate medicament pentru pierderea în greutate 98,0~101,5%

Orlistat
C29H53NO5 495,73
l-leucină, N-formil-, 1-[(3-hexil-4-oxo-2-oxetanil)metil]dodecil ester, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-formil-l-leucină, ester cu (3S,4S)-3-hexil-4-[(2S)-2-hidroxitridecil]-2-oxetanonă [96829-58-2].
DEFINIȚIE
Orlistat conține NLT 98,0% și NMT 101,5% C29H53NO5, calculat pe bază anhidră, fără solvenți.
IDENTIFICARE
• A. Absorbție în infraroșu <197M>
• B. Timpul de retenție al vârfului major al soluției de probă corespunde cu cel al soluției standard, așa cum este obținut în test.
TEST
• Procedură
[Notă-Evitați utilizarea baloanelor de plastic pentru prepararea sau reținerea oricărei soluții în această analiză.]
Faza mobilă: acetonitril, acid fosforic și apă (860: 0,05: 140)
Soluție standard: 0,5 mg/mL de USP Orlistat RS în fază mobilă.Se injectează imediat după preparare sau se păstrează la 5.
Soluție de probă: 0,5 mg/mL de Orlistat în fază mobilă.Se injectează imediat după preparare sau se păstrează la 5.
Sistem cromatografic
(Consultați Cromatografia <621>, Adecvarea sistemului.)
Mod: LC
Detector: UV 195
Coloană: 3,9 mm × 15 cm;garnitură de 4 µm L1
Debit: 1,0 ml/min
Dimensiunea injecției: 20 µL
Adecvarea sistemului
Eșantion: soluție standard
Cerințe de adecvare
Abatere standard relativă: NMT 2,0%
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Calculați procentul de orlistat (C29H53NO5) din porția de Orlistat luată:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = răspunsul de vârf din soluția Probă
rS = răspunsul de vârf din soluția standard
CS = concentrația de USP Orlistat RS în soluția standard (mg/mL)
CU = concentrația de Orlistat în soluția de probă (mg/mL)
Criterii de acceptare: 98,0%-101,5% pe bază anhidră, fără solvenți
IMPURITĂŢI
Impurități anorganice
• Rezidu la aprindere <281>: NMT 0,1%
• Metale grele, Metoda II <231>: 20 ppm
Impurități organice
• Procedura 1: Limita compusului A legat de Orlistat
Soluție standard: 0,1 mg/mL de compus A RS înrudit cu Orlistat USP în acetonă
Soluție de probă: 50 mg/mL de Orlistat în acetonă
Sistem cromatografic
(Vezi Cromatografia <621>, Cromatografia în strat subțire.)
Mod: TLC
Adsorbant: strat de 0,25 mm de amestec cromatografic de silicagel
Volumul de aplicare: 10 µL
Sistem de solvent în dezvoltare: Toluen și acetat de etil (4:1)
Soluție de detectare: Se transferă 2,5 g de acid fosfomolibdic și 1 g de sulfat de cerric într-un balon cotat de 100 ml, se dizolvă și se diluează cu metanol până la volum.
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Scoateți placa și uscați-o bine la aer.Pulverizați placa uscată cu soluție de detectare și puneți placa într-un cuptor la 120°C timp de 30 de minute.
Criterii de acceptare: Orice punct secundar din soluția de probă corespunzător compusului A înrudit cu orlistat nu este mai intens decât spotul corespunzător din soluția standard (0,2%).
• Procedura 2: Limita compusului B înrudit cu Orlistat
Soluție standard: 0,025 mg/mL de USP Orlistat Related Compus B RS în clorură de metilen
Soluție de probă: 50 mg/mL de Orlistat în clorură de metilen
Soluție de probă cu vârf: 50 mg/mL de Orlistat în soluție standard
Sistem cromatografic
(Consultați Cromatografia <621>, Adecvarea sistemului.)
Mod: GC
Detector: ionizare cu flacără
Coloană: silice topită de 0,32 mm x 30 m, acoperită cu o fază staționară G27 de 0,25 µm
Temperatura coloanei: Consultați tabelul cu programe de temperatură de mai jos.
Temperatura inițială () Rampă de temperatură (/min) Temperatura finală () Timp de menținere la temperatura finală (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatura
Injector: 270
Detector: 280
Gaz purtător: Heliu
Debit: 30 ml/min
Raport de împărțire: 10:1
Dimensiunea injecției: 2 µL
Adecvarea sistemului
Eșantion: soluție standard
Cerințe de adecvare
Abatere standard relativă: NMT 10,0%
Analiză
Probe: soluție de probă și soluție de probă cu vârfuri
Calculați procentul de compus B înrudit cu orlistat în porția de Orlistat luată:
Rezultat = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = răspunsul de vârf al compusului B înrudit cu orlistat din soluția de probă
rSP = răspunsul de vârf al compusului B legat de orlistat din soluția de probă Spiked
CS = concentrația compusului B înrudit orlistat USP în soluția standard (mg/mL)
CT = concentrația de Orlistat în soluția de probă Spiked (mg/mL)
Criterii de acceptare: NMT se găsește 0,05% compus B înrudit cu orlistat.
• Procedura 3
[Notă-Evitați utilizarea baloanelor de plastic pentru prepararea sau reținerea oricărei soluții în această analiză.]
Fază mobilă, soluție standard și soluție de probă: Se prepară conform instrucțiunilor din test.
Soluție adecvată pentru sistem: 10 µg/mL de USP Orlistat RS, 0,1 µg/mL de compus C RS înrudit USP Orlistat și 0,25 µg/mL de compus D RS înrudit cu USP Orlistat în fază mobilă
Sistem cromatografic
(Consultați Cromatografia <621>, Adecvarea sistemului.)
Procedați conform instrucțiunilor din test, cu excepția cromatografiarii soluției adecvate a sistemului.
Adecvarea sistemului
Exemplu: soluție de adecvare a sistemului
Cerințe de adecvare
Raportul semnal-zgomot: NLT 3 pentru vârfurile compusului C înrudit cu orlistat și compusul D înrudit cu orlistat
Abatere standard relativă: NMT 10,0% pentru vârful orlistat
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Calculați procentul fiecărei impurități din porția de Orlistat luată:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = răspuns de vârf pentru fiecare impuritate individuală din soluția de probă
rS = răspunsul de vârf al USP Orlistat RS din soluția standard
CS = concentrația de USP Orlistat RS în soluția standard (mg/mL)
CU = concentrația de Orlistat în soluția de probă (mg/mL)
F = factor de răspuns relativ, așa cum este prezentat în tabelul 1 cu impurități
Criterii de acceptare: Vezi tabelul 1 cu impurități.
Tabelul de impurități 1
Nume Timp relativ de retenție Factor de răspuns relativ Criterii de acceptare, NMT (%)
Formileucineea 0,10 4,0 0,2
Compusul înrudit orlistat C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerb inel deschis 0,44 1,0 0,2
Compusul înrudit cu orlistat D* 0,90 - Calculat în
Procedura 4
Orlistat inel deschis amidec* 0,90 - Calculat în
Procedura 4
Orlistat 1.00 - -
d-Leucină orlistatd 1,18 1,0 0,2
Impuritate individuală neidentificată - 1,0 0,1
* Coeluții în acest sistem LC, determinate folosind Procedura 4.
o N-formil-l-leucină.
b Acid (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formilamino-4-metil-pentanoiloxi]-2-hexil-3-hidroxi-hexadecanoic.
c N-formil-l-leucină (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroxi-3-[1-fenil-R-etilcarbomoil]nonil]-dodecil ester.
d Ester sau enantiomer N-formil-d-leucină (S)-1-[[(2S,3S)-3-hexil-4-oxo-2-oxetanil]metil]dodecil.
• Procedura 4: Limita compusului D legat de Orlistat
Faza mobilă: metanol și apă (83:17)
Soluție adecvată pentru sistem: 4 mg/mL de USP Orlistat RS și, respectiv, 2,4 µg/mL de compus D RS înrudit cu USP Orlistat în acetonitril
Soluție standard: 5,0 mg/mL de USP Orlistat RS în acetonitril
Soluție de probă: 5,0 mg/mL de Orlistat în acetonitril
Sistem cromatografic
(Consultați Cromatografia 621, Adecvarea sistemului.)
Mod: LC
Detector: 205 nm
Coloană: 4,0 mm × 25 cm;garnitură de 5 µm L7
Debit: 0,6 ml/min
Dimensiunea injecției: 20 µL
Adecvarea sistemului
Exemplu: soluție de adecvare a sistemului
Cerințe de adecvare
Raportul semnal-zgomot: NLT 3 pentru vârful D compus legat de orlistat
Abatere standard relativă: NMT 10,0% pentru vârful orlistat
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Calculați procentul fiecărei impurități din porția de Orlistat luată:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = răspuns de vârf pentru fiecare impuritate individuală din soluția de probă
rS = răspuns de vârf pentru USP Orlistat RS din soluția standard
CS = concentrația de USP Orlistat RS în soluția standard (µg/mL)
CU = concentrația de Orlistat în soluția de probă (µg/mL)
F = factor de răspuns relativ, așa cum este obținut în Tabelul de impurități 2
Criterii de acceptare: Vezi tabelul 2 cu impurități.
Tabelul de impurități 2
Nume Timp relativ de retenție Factor de răspuns relativ Criterii de acceptare, NMT (%)
Compusul înrudit orlistat D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1.00 - -
Orlistat open ring amidea 1,25 4,3 0,1
un ester N-formil-l-leucină (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroxi-3-[1-fenil-R-etilcarbomoil]nonil]-dodecil.
• Procedura 5: Limita compusului E legat de Orlistat
Tampon: soluție de borat 0,4 N, ajustată la un pH de 10,2
Agent de derivatizare: soluție de o-ftaldehidă (OPA).[Notă-Dacă nu se poate obține comercial, agentul de derivatizare poate fi preparat ca 1% fiecare acid 3-mercaptopropionic și o-ftaldialdehidă în soluție tampon de borat 0,4 M.]
Soluția A: Se transferă 4,1 g de acetat de sodiu trihidrat și 40 mg de acid etilendiaminotetraacetic (EDTA) într-un balon cotat de 1 L.Se dizolvă în 950 ml de apă și se ajustează cu hidroxid de sodiu 0,1 N la un pH de 7,2.Se diluează cu apă la volum, se adaugă 2,5 ml de tetrahidrofuran și se amestecă.Se filtrează și se degazează.
Soluția B: Se transferă 2,7 g de acetat de sodiu trihidrat și 40 mg de EDTA într-un balon cotat de 1 l.Se dizolvă în 200 ml de apă și se ajustează cu hidroxid de sodiu 0,1 N la un pH de 7,2.Se adaugă 800 ml de acetonitril, se filtrează și se degazează.
Faza mobilă: vezi tabelul de gradient de mai jos.
Timp (min) Soluția A (%) Soluția B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3.3
Soluție standard: Transferați o cantitate cântărită de aproximativ 0,2 mg de compus înrudit USP Orlistat E RS într-un flacon de 20 ml cu spațiul capului.Adăugați 10 ml de hidroxid de sodiu 4 N și închideți flaconul.Se încălzește flaconul la 100 pentru 1 oră, apoi se lasă să se răcească la temperatura camerei.Se transferă 2 ml din soluția rezultată într-un balon cotat de 50 ml și se diluează cu apă până la volum.La 0,5 mL din această soluție se adaugă 2,0 mL de tampon și 0,5 mL de agent de derivatizare.
Soluție de probă: Procedați conform instrucțiunilor pentru soluția standard, dar utilizați în schimb 25 mg de Orlistat pentru a înlocui 0,2 mg de compus E RS înrudit cu Orlistat USP.
Sistem cromatografic
(Consultați Cromatografia <621>, Adecvarea sistemului.)
Mod: LC
Detector: Fluorescență 340 nm (excitație);450 nm (emisie)
Coloane
Apărătoare: 2,1-mm × 2-cm;garnitură de 50 µm L1
Analitic: 2,1 mm × 20 cm;ambalaj L1
Debit: 0,5 ml/min
Dimensiunea injecției: 20 µL
Adecvarea sistemului
Eșantion: soluție standard
Cerințe de adecvare
Abatere standard relativă: NMT 6,0% pentru vârful E al compusului legat de orlistat
Analiză
Probe: soluție standard și soluție probă
Calculați procentul acestei impurități în porția de Orlistat luată:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = răspunsul de vârf pentru compusul E înrudit cu orlistat în soluția de probă
rS = răspuns de vârf pentru compusul E RS înrudit cu Orlistat USP în soluția standard
CS = concentrația de compus E RS înrudit cu Orlistat USP în soluția standard (mg/mL)
CU = concentrația de Orlistat în soluția de probă (mg/mL)
Criteriul de acceptare
Impuritate individuală: NMT se găsește 0,2% compus E înrudit cu orlistat.
Total impurități: NMT se găsește 1,0% din totalul impurităților, fiind adăugate rezultatele pentru Procedurile 1, 2, 3, 4 și 5.
TESTE SPECIFICE
• Rotație optică, Rotație specifică <781>
Soluție de probă: 30 mg/mL în alcool deshidratat
Criterii de acceptare: Între -48,0 și -51,0, la 20
• Determinarea apei, metoda Ic <921>: NMT 0,2%
CERINȚE SUPLIMENTARE
• Ambalare și depozitare: Păstrați în recipiente bine închise între 2 și 8℃.
• Standarde de referință USP <11>
USP Orlistat RS
Compusul A înrudit Orlistat USP RS
Compusul B înrudit orlistat USP RS
USP Orlistat înrudit compus C RS
Compusul D RS înrudit cu Orlistat USP
USP Orlistat Related Compus E RS
USP35