Paclitaxel (Taxol) Test CAS 33069-62-4 (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51N014 853,91
Acid benzenpropanoic, -(benzoilamino)--hidroxi-, 6,12b-bis(acetiloxi)-12-(benzoiloxi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahidro-4,11-dihidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-5-oxo-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-il ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahidro-4,6, 9,11,12,12b-hexahidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-onă 6, 12b-diacetat, 12-benzoat, 9-ester cu (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilizozerina [33069-62-4].
Paclitaxelul conține nu mai puțin de 97,0 la sută și nu mai mult de 102,0 la sută de C47H51NO14, calculat pe bază anhidră, fără solvenți.
[Atenție-Paclitaxelul este citotoxic.Trebuie avută mare grijă pentru a preveni inhalarea particulelor de Paclitaxel și expunerea pielii la acesta.]
Ambalare și depozitare - Păstrați în recipiente etanșe, rezistente la lumină și depozitați la temperatura controlată a camerei.
Etichetare - Etichetarea indică tipul de proces utilizat pentru producerea materialului și testul Compușilor înrudiți cu care materialul se conformează.
Standarde de referință USP <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Faceți clic pentru a vizualiza structura
Compusul A înrudit paclitaxel USP RS
Cefalomanina.
Compusul B înrudit cu paclitaxel USP RS
10-Deacetil-7-Epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Impurity Mixture RS
Amestec de paclitaxel și următorii compuși înrudiți: analog propil, cefalomanină, analog sec-butil, analog n-butil, analog benzii, baccatin VI, analog pentil și 7-epipaclitaxel.
Identificare-
A: Absorbție în infraroșu <197K>.
B: Timpul de retenție al vârfului major din cromatograma preparatului de testare corespunde cu cel din cromatograma preparatului standard, așa cum este obținut în test.
Rotație specifică 781S: între 49,0 și 55,0 la 20, calculată pe bază anhidră, fără solvenți.
Soluție de testare: 10 mg per ml, în metanol.
Teste de enumerare microbiană <61> și Teste pentru microorganisme specificate <62>-Numărul total de microbi aerobi nu depășește 100 ufc per g.Îndeplinește cerințele testelor pentru absența Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, speciile Salmonella și Escherichia coli.
Endotoxine bacteriene 85-Nu conține mai mult de 0,4 Unități de endotoxină USP per mg de paclitaxel.
Apă, Metoda Ic <921>: nu mai mult de 4,0%.
Rezidu la aprindere <281>: nu mai mult de 0,2%.
Metale grele, Metoda II <231>: 0,002%.
Compuși înrudiți-
testul 1 (pentru materialul etichetat ca izolat din surse naturale)-Dacă materialul respectă acest test, etichetarea indică faptul că îndeplinește testul 1 al compușilor înrudiți USP.
Diluant-Pregătiți conform instrucțiunilor din test.
Soluția A - Se prepară acetonitril filtrat și degazat.
Soluția B-Pregătiți apă filtrată și degazată.
Faza mobilă - Folosiți amestecuri variabile de Soluție A și Soluție B conform instrucțiunilor pentru sistemul cromatografic.Efectuați ajustări dacă este necesar (consultați Adecvarea sistemului la Cromatografie 621).
Soluție adecvată pentru sistem - Se dizolvă cantități cântărite cu precizie de compus A RS înrudit cu paclitaxel USP și Compus înrudit B RS de paclitaxel USP în metanol pentru a obține o soluție având concentrații cunoscute de aproximativ 10 ug din fiecare per ml.Se transferă 5,0 ml din această soluție într-un balon cotat de 50 ml, se diluează la volum cu Diluant și se amestecă.
Soluție standard - Se dizolvă, cu ajutorul sonicării, o cantitate cântărită cu precizie de USP Paclitaxel RS în Diluant și se diluează cantitativ, și treptat, dacă este necesar, cu Diluant pentru a obține o soluție având o concentrație cunoscută de aproximativ 5 µg per ml.
Soluție de testare-Utilizați preparatul de testare.
Sistem cromatografic (vezi Cromatografia <621>)-Cromatograful lichid este echipat cu un detector de 227 nm și o coloană de 4,6 mm × 25 cm care conține 5 µm de împachetare L43.Debitul este de aproximativ 2,6 ml pe minut.Temperatura coloanei este menținută la 30°C. Cromatograful este programat după cum urmează.
Timp (minute) Soluție A (%) Soluție B (%) Eluare
0–35 35 65 izocratic
35–60 35®80 65®20 gradient liniar
60–70 80®35 20®65 gradient liniar
70–80 35 65 izocraticCromatografiați soluția adecvată a sistemului și înregistrați răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: timpii relativi de retenție sunt de aproximativ 0,78 pentru compusul A înrudit cu paclitaxel și 0,86 pentru compusul B înrudit cu paclitaxel (față de timpul de retenție pentru paclitaxel obținut din soluția de testare);iar rezoluţia, R, între compusul A înrudit cu paclitaxel şi compusul B înrudit cu paclitaxel nu este mai mică de 1,0.Cromatografiați soluția standard și înregistrați răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2,0%.
Procedură - Injectați un volum (aproximativ 15 µL) de soluție de testare în cromatograf, înregistrați cromatograma și măsurați zonele pentru vârfurile majore.Calculați procentul fiecărei impurități din porția de paclitaxel luată cu formula:
100(vineri / rU)
în care F este factorul de răspuns relativ pentru fiecare vârf de impuritate (a se vedea tabelul 1 pentru valori);ri este aria de vârf pentru fiecare impuritate individuală;iar rU este aria de vârf pentru paclitaxel.
tabelul 1
Timp de retenție relativ Factor de răspuns relativ (F) Limită de nume (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanină (compusul A înrudit cu Paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihidrocefalomanină a21
0,86 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (compusul B înrudit cu paclitaxel) 0,5
1,10 1,00 Analog de benzil3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomanina 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Rezoluția poate fi incompletă pentru aceste vârfuri, în funcție de cantitățile relative prezente;suma a1 și a2 nu este mai mare de 0,5%.
2 Rezoluția poate fi incompletă pentru aceste vârfuri, în funcție de cantitățile relative prezente;suma b1 și b2 nu este mai mare de 0,5%.
3 Următoarea denumire chimică este atribuită compusului înrudit, analog benzii: 13-ester al baccatinei III cu acid (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)propanoic.
Pe lângă faptul că nu depășesc limitele pentru impuritățile legate de paclitaxel din Tabelul 1, nu se găsește mai mult de 0,1% din orice altă impuritate unică;și nu se găsesc mai mult de 2,0% din totalul impurităților.
testul 2 (pentru materialul etichetat ca fiind produs printr-un proces semisintetic) - Dacă materialul respectă acest test, etichetarea indică faptul că îndeplinește Testul 2 al compușilor înrudiți USP.
Diluant-Utilizați acetonitril.
Soluția A-Utilizați un amestec filtrat și degazat de apă și acetonitril (3:2).
Soluția B-Utilizați acetonitril filtrat și degazat.
Faza mobilă - Folosiți amestecuri variabile de Soluție A și Soluție B conform instrucțiunilor pentru sistemul cromatografic.Efectuați ajustări dacă este necesar (consultați Adecvarea sistemului la Cromatografie 621).
Soluție adecvată pentru sistem - Se dizolvă cantități cântărite cu precizie de USP Paclitaxel RS și USP Paclitaxel Related Compus B RS în diluant, agitând și sonicând dacă este necesar, pentru a obține o soluție având concentrații cunoscute de aproximativ 0,96 mg și, respectiv, 0,008 mg per ml.
Soluție de testare - Se transferă aproximativ 10 mg de Paclitaxel, cântărit cu precizie, într-un balon cotat de 10 ml, se dizolvă și se diluează cu Diluant la volum, agitând și sonicând dacă este necesar și se amestecă.
Sistem cromatografic (vezi Cromatografia 621) — Cromatograful lichid este echipat cu un detector de 227 nm și o coloană de 4,6 mm × 15 cm care conține garnitura L1 de 3 µm.Debitul este de aproximativ 1,2 ml pe minut.Temperatura coloanei este menținută la 35. Cromatograful este programat după cum urmează.
Timp (minute) Soluție A (%) Soluție B (%) Eluare
0-20 100 0 izocratic
20-60 100®10 0®90 gradient liniar
60-62 10®100 90®0 gradient liniar
62-70 100 0 izocraticCromatografiați soluția adecvată a sistemului și înregistrați răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: timpii de retenție relativi sunt de aproximativ 0,94 pentru compusul B înrudit cu paclitaxel și 1,0 pentru paclitaxel;rezoluția, R, între compusul B înrudit cu paclitaxel și paclitaxel nu este mai mică de 1,2;iar abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2,0%.
Procedură - Injectați separat volume egale (aproximativ 15 µL) de diluant și soluție de testare în cromatograf, înregistrați cromatogramele și măsurați zonele pentru toate vârfurile.Ignorați orice vârfuri datorate diluantului.Calculați procentul fiecărei impurități din porția de paclitaxel luată cu formula:
100 (vineri / rs)
în care F este factorul de răspuns relativ pentru fiecare impuritate (a se vedea tabelul 2 pentru valori);ri este aria de vârf pentru fiecare impuritate obținută din soluția de testare;iar rs este suma ariilor tuturor vârfurilor obținute din soluția de testare.
masa 2
Timp de retenție relativ Factor de răspuns relativ (F) Limită de nume (%)
0,11 1,24 10-Deacetilbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaclitaxel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Inel de oxetan deschis, acetil și benzoil migrat2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (compusul B înrudit cu paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Rezoluția poate fi incompletă pentru aceste vârfuri, în funcție de cantitățile relative prezente;suma x1, x2 și x3 nu este mai mare de 0,4%.
2 Următoarele denumiri chimice sunt atribuite compuşilor înrudiţi Fotodegradant;Inelul de oxetan s-a deschis, acetil și benzoil au migrat;și 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloxi-5,13-dihidroxi-4,16,17,17-tetrametil-8-oxa- 3-oxo-12-fenilcarboniloxipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoat
Inelul de oxetan s-a deschis, acetil și benzoil au migrat
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloxi-1,2,4,7-tetrahidroxi-8,12,15,15-tetrametil-9-oxo- 4-(fenilcarboniloximetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoat
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-ester cu acid (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoic, 10-ester cu (2S,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino) )acidul propanoic
Pe lângă faptul că nu se depășesc limitele pentru impuritățile legate de paclitaxel din Tabelul 2, nu se găsește mai mult de 0,1% din orice altă impuritate unică;și nu se găsesc mai mult de 2,0% din totalul impurităților.
testul 3 (pentru materialul etichetat ca fiind produs printr-un proces de fermentare a celulelor vegetale) – Dacă materialul respectă acest test, etichetarea indică faptul că îndeplinește Testul 3 al compușilor legați USP.
Soluția A - Se prepară un amestec filtrat și degazat de apă și acetonitril (3:2).
Soluția B-Se prepară acetonitril filtrat și degazat.
Faza mobilă - Folosiți amestecuri variabile de Soluție A și Soluție B conform instrucțiunilor pentru sistemul cromatografic.Efectuați ajustări dacă este necesar (consultați Adecvarea sistemului la Cromatografie 621).
Soluție adecvată pentru sistem - Se dizolvă USP Paclitaxel Impurity Mixture RS în acetonitril, sonicând dacă este necesar, pentru a obține o soluție cu o concentrație cunoscută de aproximativ 1 mg per ml.
Soluție standard - Se dizolvă o cantitate cântărită cu precizie de USP Paclitaxel RS în acetonitril, sonicând dacă este necesar, pentru a obține o soluție cu o concentrație cunoscută de aproximativ 1 mg per ml.
Soluție de testare - Se transferă aproximativ 10 mg de Paclitaxel, cântărit cu precizie, într-un balon cotat de 10 ml.Se dizolvă și se diluează cu acetonitril până la volum, sonicând dacă este necesar și se amestecă.
Sistem cromatografic (vezi Cromatografia 621) — Cromatograful lichid este echipat cu un detector de 227 nm și o coloană de 4,6 mm × 15 cm care conține garnitura L1 de 3 µm.Debitul este de aproximativ 1,2 ml pe minut.Cromatograful este programat după cum urmează.
Timp (minute) Soluție A (%) Soluție B (%) Eluare
0-28 100 0 izocratic
28-33 100®98 0®2 gradient liniar
33–58 98®10 2®90 gradient liniar
58-60 10 90 izocratic
60-63 10®100 90®0 gradient liniar
63-70 100 0 izocraticCromatografiază soluția adecvată a sistemului și înregistrează răspunsurile de vârf conform indicațiilor pentru Procedură: rezoluția, R, între paclitaxel și analogul benzii nu este mai mică de 1,8.Cromatografiați soluția standard și înregistrați răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2,0%.[notă—În scopul identificării vârfurilor, timpii de retenție relativi aproximativi sunt indicați în Tabelul 3. Timpii de retenție relativi sunt măsurați față de Paclitaxel.]
Tabelul 3
Limită de timp relativă de păstrare a numelui (%)
Analog de propil1 0,54 0,2
Cefalomanină (compusul A înrudit cu Paclitaxel) 0,76 0,5
sec-butil analog2 0,81 0,2
Analog de n-butil3 0,89 0,1
Analog de benzil 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentil analog4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Următoarea denumire chimică este atribuită compusului înrudit Analog de propil: 13-ester al baccatinei III cu acid (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropanoic.
2 Următoarea denumire chimică este atribuită compusului înrudit analog sec-butil: Baccatin III 13-ester cu acid (2R,3S)-2-hidroxi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanoic.
3 Următoarea denumire chimică este atribuită compusului înrudit analog n-butil: 13-ester al baccatinei III cu acid (2S,3S)-2-hidroxi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanoic.
4 Următoarea denumire chimică este atribuită compusului înrudit Pentil analog: 13-ester al baccatinei III cu acid (2R,3S)-3-(hexanoilamino)-2-hidroxi-3-fenilpropanoic.
Procedură - Injectați un volum (aproximativ 12 µL) de soluție de testare în cromatograf, înregistrați cromatograma și măsurați zonele pentru toate vârfurile.Calculați procentul fiecărei impurități din porția de paclitaxel luată cu formula:
100(ri / rU)
în care ri este răspunsul fiecărei impurități individuale;iar rU este suma ariilor tuturor vârfurilor obținute din soluția de testare.Pe lângă faptul că nu depășesc limitele pentru impuritățile legate de paclitaxel din Tabelul 3, nu se găsește mai mult de 0,1% din orice altă impuritate unică;și nu se găsesc mai mult de 2,0% din totalul impurităților.
Test-
Diluant - Se prepară un amestec de metanol și acid acetic (200:1).
Faza mobilă - Se prepară un amestec filtrat și degazat de apă și acetonitril (11:9).Efectuați ajustări dacă este necesar (consultați Adecvarea sistemului la Cromatografie 621).
Preparare standard - Se dizolvă, utilizând sonicare, dacă este necesar, o cantitate cântărită cu precizie de USP Paclitaxel RS în Diluant și se diluează cantitativ, și treptat, dacă este necesar, cu Diluant pentru a obține o soluție având o concentrație cunoscută de aproximativ 1 mg per ml.
Prepararea testului - Se transferă aproximativ 10 mg de Paclitaxel, cântărit cu precizie, într-un balon cotat de 10 ml.Se dizolvă în diluant, folosind sonicare dacă este necesar, se diluează cu diluant la volum și se amestecă.
Sistem cromatografic (vezi Cromatografia <621>)-Cromatograful lichid este echipat cu un detector de 227 nm și o coloană de 4,6 mm × 25 cm care conține 5 µm de împachetare L43.Debitul este de aproximativ 1,5 ml pe minut.Cromatografiați preparatul standard și înregistrați răspunsurile de vârf conform instrucțiunilor pentru Procedură: factorul de decantare este între 0,7 și 1,3;iar abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 1,5%.
Procedură - Se injectează separat volume egale (aproximativ 10 µL) de preparat standard și preparat de testare în cromatograf, înregistrați cromatogramele și măsurați zonele pentru vârfurile majore.Calculați cantitatea, în mg, de C47H51NO14 din porția de paclitaxel luată cu formula:
10C(rU / rS)
în care C este concentrația, în mg per ml, de USP Paclitaxel RS în preparatul standard;şi rU şi rS sunt răspunsurile de vârf pentru paclitaxel obţinute din preparatul de testare şi respectiv preparatul standard.