Acid ursodeoxicolic (UDCA) Test CAS 128-13-2 99,0~101,0%

ACID URSODEOXICOLIC
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINIȚIE
Acid 3a,7p-dihidroxi-5p-colan-24-oic.
Conținut: 99,0% până la 101,0% (substanță uscată).
PERSONAJELE
Aspect: pulbere albă sau aproape albă.
Solubilitate: practic insolubil în apă, liber solubil în etanol (96 la sută), ușor solubil în acetonă, practic insolubil în clorură de metilen.
p.t.: aproximativ 202℃.
IDENTIFICARE
Prima identificare: A.
A doua identificare: B, C.
A. Spectrofotometrie de absorbție în infraroșu (2.2.24).
Comparație: CRS acid ursodeoxicolic.
B. Examinați cromatogramele obținute în testul pentru impuritatea C.
Rezultate: pata principală din cromatograma obținută cu soluția de testat (b) este similară ca poziție, culoare și dimensiune cu pata principală din cromatograma obținută cu soluția de referință (a).
C. Se dizolvă aproximativ 10 mg în 1 mL de acid sulfuric R. Se adaugă 0,1 mL de soluție de formaldehidă R și se lasă să stea 5 min.Se adaugă 5 mL apă R. Suspensia obţinută este verzui-albastru.
TESTE
Rotație optică specifică (2.2.7): + 58,0 până la + 62,0 (substanță uscată).
Se dizolvă 0,500 g în etanol anhidru R și se diluează la 25,0 ml cu același solvent.
Impuritate C. Cromatografia în strat subțire (2.2.27).
Amestec de solvenți: apă R, acetonă R (10:90 V/V).
Soluția de testare (a).Se dizolvă 0,40 g din substanța de examinat în amestecul de solvenți și se diluează la 10 ml cu amestecul de solvenți.
Soluția de testare (b).Se diluează 1 mL de soluție de testat (a) la 10 mL cu amestecul de solvenți.
Soluție de referință (a).Se dizolvă 40 mg de acid ursodeoxicolic CRS în amestecul de solvenți și se diluează la 10 ml cu amestecul de solvenți.
Soluție de referință (b).Se dizolvă 20 mg de acid litocolic CRS (impuritate C) în amestecul de solvenți și se diluează la 10,0 mL cu amestecul de solvenți (soluția A).Se diluează 2,0 ml din această soluție la 100,0 ml cu amestecul de solvenți.
Soluție de referință (c).La 5 ml de soluție A se adaugă 10 mg de acid chenodeoxicolic CRS (impuritate A) și se diluează la 50 ml cu amestecul de solvenți.
Placă: placă de silicagel TLC R.
Faza mobilă: acid acetic glacial R, acetonă R, metilenclorura R (1:30:60 V/V/V).
Aplicare: 5μL.
Dezvoltare: peste 2/3 din farfurie.
Uscare: la 120℃ timp de 10 minute.
Detectare: pulverizați imediat cu o soluție de 47,6 g/L de acid fosfomolibdic R într-un amestec de 1 volum de acid sulfuric R și 20 de volume de acid acetic glacial R și încălziți la 120℃ până când pete albastre apar pe un fundal mai deschis.
Adecvarea sistemului: soluție de referință (c):
- cromatograma prezintă 2 pete principale clar separate.
Limită: soluție de testare (a):
-impuritate C: orice pată datorată impurității C nu este mai intensă decât pata principală din cromatograma obținută cu soluția de referință (b) (0,1 la sută).
Substante inrudite.Cromatografia lichidă (2.2.29).
Amestec de solvenți: metanol R, fază mobilă (10:90 V/V).
Soluție de testare.Se dizolvă 60 mg din substanța de examinat în amestecul de solvenți și se diluează la 20,0 mL cu amestecul de solvenți.
Soluție de referință (a).Se dizolvă conținutul unui flacon de acid ursodeoxicolic pentru compatibilitatea sistemului CRS (conținând impurități A și H) în 1,0 ml de amestec de solvenți.
Soluție de referință (b).Se diluează 1,0 mL din soluția de testat la 100,0 mL cu amestecul de solvenți.Se diluează 1,0 ml din această soluție la 10,0 ml cu amestecul de solvenți.
Coloană:
-dimensiune: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-faza staționară: silicagel octadecilsilil cu capat ptcromatografia R (5 μm);
- temperatura: 40℃ ± 1℃.
Faza mobilă: se amestecă 30 de volume de acetonitril R, 37 de volume dintr-o soluție de 0,78 g/L de dihidrogenofosfat de sodiu R ajustat la pH 3 cu acid fosforic R și 40 de volume de metanol R.
Debit: 0,8 ml/min.
Detectare: refractometru la 35 ± 1℃.
Injectare: 150 μL.
Timp de funcționare: de 4 ori timpul de retenție al acidului ursodeoxicolic.
Identificarea impurităților: utilizați cromatograma furnizată cu acid ursodeoxicolic pentru adecvarea sistemului CRS și cromatograma obținută cu soluția de referință (a) pentru a identifica vârfurile datorate impurităților A și H.
Retenție relativă cu referire la acidul ursodeoxicolic (timp de retenție = aproximativ 14 min): impuritate H = aproximativ 0,9;impuritatea A = aproximativ 2,8.
Adecvarea sistemului: soluție de referință (a):
-rezolutie: minim 1,5 intre varfuri datorita impuritatii H si acidului ursodeoxicolic.
Limite:
- impuritatea A: nu mai mult de 10 ori suprafața vârfului principal din cromatograma obținută cu soluția de referință (b) (1,0 la sută);
-impurități nespecificate: pentru fiecare impuritate, nu mai mult decât aria vârfului principal din cromatograma obținută cu soluția de referință (b) (0,10 la sută);
- total: nu mai mult de 15 ori suprafața vârfului principal din cromatograma obținută cu soluția de referință (b) (1,5 la sută);
-limita de ignorare: de 0,5 ori aria vârfului principal din cromatograma obţinută cu soluţia de referinţă (b) (0,05 la sută).
Metale grele (2.4.8): maxim 20 ppm.
1,0 g este conform testului C. Se prepară soluția de referință folosind 2 ml de soluție standard de plumb (10 ppm Pb) R.
Pierdere la uscare (2.2.32): maxim 1,0 la sută, determinată pe 1.000 g prin uscare în cuptor la 105℃.
Cenușă sulfatată (2.4.14): maxim 0,1 la sută, determinată pe 1,0 g.
TEST
Se dizolvă 0,350 g în 50 mL de etanol (96 la sută) R, neutralizat în prealabil la 0,2 mL de soluție de fenolftaleină R. Se adaugă 50 mL de apă R și se titrează cu hidroxid de sodiu 0,1 M până se obține o culoare roz.
1 ml de hidroxid de sodiu 0,1 M este echivalent cu 39,26 mg de C24H40O4.
IMPURITĂŢI
Impurități specificate: A, C.
Alte impurități detectabile (următoarele substanțe, dacă sunt prezente la un nivel suficient, ar fi detectate de unul sau altul dintre testele din monografie. Sunt limitate de criteriul general de acceptare pentru alte impurități/nespecificate și/sau de monografia generală Substanțe pentru uz farmaceutic (2034). Prin urmare, nu este necesar să se identifice aceste impurități pentru demonstrarea conformității. Vezi și 5.10.
Controlul impurităților din substanțele de uz farmaceutic): B, D, E, F, G, H, I.
A. Acid 3α,7α-dihidroxi-5β-colan-24-oic (acid chenodeoxicolic),
B. Acid 3α,7α,12α-trihidroxi-5β-colan-24-oic (acid colic),
C. acid 3α-hidroxi-5β-colan-24-oic (acid litocolic),
D. acid 3α,7β,12α-trihidroxi-5β-colan-24-oic (acid ursocolic),
E. acid 3α,12α-dihidroxi-5β-colan-24-oic (acid deoxicolic),
F. acid 3α-hidroxi-7-oxo-5β-colan-24-oic,
G. 3α,7β-dihidroxi-5β-colan-24-oat de metil,
H. acid 3p,7p-dihidroxi-5p-colan-24-oic,
I. 5p-colan-3a,7p,24-triol.