Очищенность 98,0~101,5% лекарства потери веса Орлистат КАС 96829-58-2 API

Орлистат
C29H53NO5 495,73
1-лейцин, N-формил-, 1-[(3-гексил-4-оксо-2-оксетанил)метил]додециловый эфир, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-формил-1-лейцин, сложный эфир с (3S,4S)-3-гексил-4-[(2S)-2-гидрокситридецил]-2-оксетаноном [96829-58-2].
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Орлистат содержит NLT 98,0% и NMT 101,5% C29H53NO5 в пересчете на безводный растворитель.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
• A. Инфракрасное поглощение <197M>
• B. Время удерживания основного пика раствора образца соответствует времени удерживания стандартного раствора, полученному в анализе.
ПРОБНЫЙ
• Процедура
[Примечание. Избегайте использования пластиковых колб для приготовления или хранения любого раствора в этом анализе.]
Подвижная фаза: ацетонитрил, фосфорная кислота и вода (860:0,05:140).
Стандартный раствор: 0,5 мг/мл USP Orlistat RS в подвижной фазе.Вводить сразу после приготовления или хранить при 5.
Образец раствора: 0,5 мг/мл орлистата в подвижной фазе.Вводить сразу после приготовления или хранить при 5.
Хроматографическая система
(См. Хроматография <621>, Пригодность системы.)
Режим: ЛК
Детектор: УФ 195
Колонка: 3,9 мм × 15 см;Набивка 4 мкм L1
Скорость потока: 1,0 мл/мин.
Размер инъекции: 20 мкл
Пригодности системы
Образец: Стандартный раствор
Требования пригодности
Относительное стандартное отклонение: не более 2,0%
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора
Рассчитайте процентное содержание орлистата (C29H53NO5) в принятой порции орлистата:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = пиковый отклик от раствора образца
rS = пиковый отклик стандартного раствора
CS = концентрация USP Orlistat RS в стандартном растворе (мг/мл).
CU = концентрация орлистата в растворе образца (мг/мл)
Критерии приемлемости: 98,0–101,5 % в пересчете на безводную основу без растворителей.
ПРИМЕСИ
Неорганические примеси
• Остаток при прокаливании <281>: не более 0,1%
• Тяжелые металлы, метод II <231>: 20 частей на миллион
Органические примеси
• Процедура 1: Предельное содержание родственного орлистату соединения А
Стандартный раствор: 0,1 мг/мл USP Orlistat Related Compound A RS в ацетоне
Образец раствора: 50 мг/мл орлистата в ацетоне
Хроматографическая система
(См. Хроматография <621>, Тонкослойная хроматография.)
Режим: ТСХ
Адсорбент: слой 0,25 мм хроматографической смеси силикагелей.
Объем приложения: 10 мкл
Система проявляющих растворителей: толуол и этилацетат (4:1)
Раствор для обнаружения: 2,5 г фосфорно-молибденовой кислоты и 1 г сульфата церия переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ней и доводят до объема метанолом.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора
Снимите пластину и тщательно высушите ее на воздухе.Распылите на высушенную пластину раствор для обнаружения и поместите пластину в печь при 120°С на 30 мин.
Критерии приемлемости: любое вторичное пятно из раствора образца, соответствующего родственному орлистату соединению А, не более интенсивно, чем соответствующее пятно из стандартного раствора (0,2%).
• Процедура 2: Предельное содержание родственного орлистату соединения В
Стандартный раствор: 0,025 мг/мл USP Orlistat Related Compound B RS в метиленхлориде.
Образец раствора: 50 мг/мл орлистата в метиленхлориде.
Раствор пробы с добавлением: 50 мг/мл орлистата в стандартном растворе
Хроматографическая система
(См. Хроматография <621>, Пригодность системы.)
Режим: ГК
Детектор: Пламенно-ионизационный
Колонка: плавленый кварц 0,32 мм x 30 м, покрытая стационарной фазой G27 размером 0,25 мкм.
Температура колонки: см. таблицу температурных программ ниже.
Начальная температура () Изменение температуры (/мин) Конечная температура () Время выдержки при конечной температуре (мин)
50 4 170 -
170 30 300 30
Температура
Инжектор: 270
Детектор: 280
Газ-носитель: гелий
Скорость потока: 30 мл/мин.
Коэффициент разделения: 10:1
Размер инъекции: 2 мкл
Пригодности системы
Образец: Стандартный раствор
Требования пригодности
Относительное стандартное отклонение: не более 10,0%
Анализ
Образцы: раствор образца и раствор образца с добавлением
Рассчитайте процент родственного орлистату соединения В в принятой порции орлистата:
Результат = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = пиковый отклик родственного орлистату соединения B из раствора образца
rSP = пиковый отклик родственного орлистату соединения B из раствора пробы с добавками
CS = концентрация USP соединения B, родственного орлистату, в стандартном растворе (мг/мл).
CT = концентрация орлистата в растворе пробы с добавлением (мг/мл)
Критерии приемлемости: не более 0,05% соединения В, родственного орлистату.
• Процедура 3
[Примечание. Избегайте использования пластиковых колб для приготовления или хранения любого раствора в этом анализе.]
Подвижная фаза, стандартный раствор и раствор образца: приготовьте, как указано в анализе.
Раствор для пригодности системы: 10 мкг/мл USP Orlistat RS, 0,1 мкг/мл USP Orlistat Related Compound C RS и 0,25 мкг/мл USP Orlistat Related Compound D RS в подвижной фазе.
Хроматографическая система
(См. Хроматография <621>, Пригодность системы.)
Действуйте, как указано в анализе, за исключением хроматографии пригодного для системы раствора.
Пригодности системы
Образец: Решение о пригодности системы
Требования пригодности
Отношение сигнал/шум: NLT 3 для пиков соединения C, родственного орлистату, и соединения D, родственного орлистату.
Относительное стандартное отклонение: не более 10,0% для пика орлистата.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора
Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в принятой порции орлистата:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = пиковый отклик для каждой отдельной примеси из раствора образца
rS = пиковый ответ USP Orlistat RS из стандартного раствора.
CS = концентрация USP Orlistat RS в стандартном растворе (мг/мл).
CU = концентрация орлистата в растворе образца (мг/мл)
F = относительный коэффициент чувствительности, указанный в таблице примесей 1.
Критерии приемлемости: см. таблицу примесей 1.
Таблица примесей 1
Наименование Относительное время удерживания Относительный коэффициент отклика Критерии приемлемости, не более чем на 100% (%)
Формиллейцин 0,10 4,0 0,2
Родственное орлистату соединение C 0,13 33 0,05
Орлистат эпимерб с открытым кольцом 0,44 1,0 0,2
Соединение, родственное орлистату D* 0,90 - Рассчитано в
Процедура 4
Орлистат амидец с открытым кольцом* 0,90 - Рассчитано в
Процедура 4
Орлистат 1,00 - -
d-лейцин орлистатd 1,18 1,0 0,2
Индивидуальная неидентифицированная примесь - 1,0 0,1
* Коэлюенты в этой системе ЖХ, определенные с использованием Процедуры 4.
N-формил-1-лейцин.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-формиламино-4-метилпентаноилокси]-2-гексил-3-гидроксигексадекановая кислота.
c N-формил-1-лейцин (S)-1-[(2S,3S)-2-гидрокси-3-[1-фенил-R-этилкарбомоил]нонил]додециловый эфир.
d N-формил-d-лейцин(S)-1-[[(2S,3S)-3-гексил-4-оксо-2-оксетанил]метил]додециловый эфир или энантиомер.
• Процедура 4: Предельное содержание родственного орлистату соединения D
Подвижная фаза: метанол и вода (83:17)
Раствор для пригодности системы: 4 мг/мл USP Orlistat RS и 2,4 мкг/мл USP Orlistat Related Compound D RS в ацетонитриле, соответственно.
Стандартный раствор: 5,0 мг/мл USP Orlistat RS в ацетонитриле.
Образец раствора: 5,0 мг/мл орлистата в ацетонитриле.
Хроматографическая система
(См. Хроматография 621, Пригодность системы.)
Режим: ЛК
Детектор: 205 нм
Колонка: 4,0 мм × 25 см;Набивка 5 мкм L7
Скорость потока: 0,6 мл/мин.
Размер инъекции: 20 мкл
Пригодности системы
Образец: Решение о пригодности системы
Требования пригодности
Отношение сигнал/шум: NLT 3 для пика соединения D, родственного орлистату.
Относительное стандартное отклонение: не более 10,0% для пика орлистата.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора
Рассчитайте процентное содержание каждой примеси в принятой порции орлистата:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = пиковый отклик для каждой отдельной примеси из раствора образца
rS = пиковый ответ для USP Orlistat RS из стандартного раствора.
CS = концентрация USP Orlistat RS в стандартном растворе (мкг/мл).
CU = концентрация орлистата в растворе образца (мкг/мл)
F = относительный коэффициент отклика, полученный в таблице примесей 2.
Критерии приемлемости: см. таблицу примесей 2.
Таблица примесей 2
Наименование Относительное время удерживания Относительный коэффициент отклика Критерии приемлемости, не более чем на 100% (%)
Родственное орлистату соединение D 0,94 1,0 0,2
Орлистат 1,00 - -
Орлистат открытое кольцо амида 1,25 4,3 0,1
(S)-1-[(2S,3S)-2-гидрокси-3-[1-фенил-R-этилкарбомоил]нонил]додециловый эфир N-формил-1-лейцина.
• Процедура 5: Предельное содержание родственного орлистату соединения E
Буфер: 0,4 н. раствор бората, доведенный до pH 10,2.
Модифицирующий агент: раствор о-Фтальдегида (ОФА).[Примечание. Если нет возможности приобрести коммерческий агент, деривитизирующий агент можно приготовить в виде 1% 3-меркаптопропионовой кислоты и о-фталдиальдегида в 0,4 М боратном буферном растворе.]
Раствор A: Перенесите 4,1 г тригидрата ацетата натрия и 40 мг этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) в мерную колбу емкостью 1 л.Растворить в 950 мл воды и довести pH до 7,2 с помощью 0,1 н. гидроксида натрия.Разбавляют водой до нужного объема, добавляют 2,5 мл тетрагидрофурана и перемешивают.Фильтровать и дегазировать.
Раствор B: Перенесите 2,7 г тригидрата ацетата натрия и 40 мг ЭДТА в мерную колбу емкостью 1 л.Растворить в 200 мл воды и довести рН до 7,2 с помощью 0,1 н. гидроксида натрия.Добавляют 800 мл ацетонитрила, фильтруют и дегазируют.
Подвижная фаза: см. таблицу градиентов ниже.
Время (мин) Решение A (%) Решение B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3,3
45 96,7 3,3
Стандартный раствор: Перенесите взвешенное количество около 0,2 мг соединения E RS, родственного орлистату Фармакопеи США, в 20-мл флакон с свободным пространством над головой.Добавьте 10 мл 4 N гидроксида натрия и закройте флакон.Нагрейте флакон до 100°С в течение 1 ч, затем дайте остыть до комнатной температуры.2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят водой до нужного объема.К 0,5 мл этого раствора добавляют 2,0 мл буфера и 0,5 мл дериватизатора.
Образец раствора: действуйте, как указано для стандартного раствора, но вместо этого используйте 25 мг орлистата вместо 0,2 мг USP родственного орлистата соединения E RS.
Хроматографическая система
(См. Хроматография <621>, Пригодность системы.)
Режим: ЛК
Детектор: флуоресценция 340 нм (возбуждение);450 нм (излучение)
Столбцы
Защита: 2,1 мм × 2 см;Насадка 50 мкм L1
Аналитический: 2,1 мм × 20 см;упаковка L1
Скорость потока: 0,5 мл/мин.
Размер инъекции: 20 мкл
Пригодности системы
Образец: Стандартный раствор
Требования пригодности
Относительное стандартное отклонение: не более 6,0% для пика Е соединения, родственного орлистату.
Анализ
Образцы: стандартный раствор и образец раствора
Рассчитайте процентное содержание этой примеси в взятой порции орлистата:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = пиковый ответ для родственного орлистату соединения E в растворе образца.
rS = пиковый ответ для USP соединения E, родственного орлистату, RS в стандартном растворе.
CS = концентрация USP соединения E, родственного орлистату, в стандартном растворе (мг/мл).
CU = концентрация орлистата в растворе образца (мг/мл)
Критерии приемлемости
Индивидуальная примесь: NMT 0,2% родственного орлистату соединения E.
Общее количество примесей: не более 1,0% от общего количества примесей, результаты процедур 1, 2, 3, 4 и 5 суммируются.
СПЕЦИАЛЬНЫЕ ИСПЫТАНИЯ
• Оптическое вращение, Удельное вращение <781>
Образец раствора: 30 мг/мл в обезвоженном спирте
Критерии приемлемости: от -48,0 до -51,0, в 20 лет.
• Определение воды, метод Ic <921>: NMT 0,2%
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ
• Упаковка и хранение: Хранить в хорошо закрытых контейнерах при температуре от 2 до 8℃.
• Справочные стандарты USP <11>
USP Орлистат RS
USP Родственное соединение A с орлистатом RS
USP Родственное соединение орлистата B RS
USP Родственное соединение орлистата C RS
Соединение, родственное орлистату, USP D RS
USP Родственное соединение орлистата E RS
USP35