Урсодезоксихолевая кислота (УДХК) Анализ CAS 128-13-2 99,0~101,0%

УРСОДЕОКСИХОЛЕВАЯ КИСЛОТА
C24H40O4 Мр 392,6[128-13-2]
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
3α,7β-дигидрокси-5β-холан-24-овая кислота.
Состав: от 99,0% до 101,0% (сухое вещество).
ПЕРСОНАЖИ
Внешний вид: белый или почти белый порошок.
Растворимость: практически нерастворим в воде, легко растворим в этаноле (96%), мало растворим в ацетоне, практически не растворим в хлористом метилене.
т.пл.: около 202℃.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Первая идентификация: А.
Вторая идентификация: B, C.
А. Инфракрасная абсорбционная спектрофотометрия (2.2.24).
Сравнение: CRS урсодезоксихолевой кислоты.
B. Изучите хроматограммы, полученные в тесте, на примеси C.
Результаты: основное пятно на хроматограмме, полученное с испытуемым раствором (б), аналогично по положению, цвету и размеру основному пятну на хроматограмме, полученному с раствором сравнения (а).
В. Растворить около 10 мг в 1 мл серной кислоты Р. Добавить 0,1 мл раствора формальдегида Р и выдержать 5 мин.Прибавляют 5 мл воды Р. Полученная взвесь имеет зеленовато-голубой цвет.
ИСПЫТАНИЯ
Удельное оптическое вращение (2.2.7): от + 58,0 до + 62,0 (сухое вещество).
Растворяют 0,500 г в этаноле безводном Р и доводят до 25,0 мл тем же растворителем.
Примесь C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Смесь растворителей: вода Р, ацетон Р (10:90 об./об.).
Тестовый раствор (а).Растворяют 0,40 г исследуемого вещества в смеси растворителей и доводят смесью растворителей до 10 мл.
Тестовый раствор (б).Разбавьте 1 мл испытуемого раствора (а) до 10 мл смесью растворителей.
Эталонный раствор (а).Растворяют 40 мг CRS урсодезоксихолевой кислоты в смеси растворителей и разбавляют смесью растворителей до 10 мл.
Эталонный раствор (б).Растворяют 20 мг CRS литохолевой кислоты (примесь C) в смеси растворителей и разбавляют до 10,0 мл смесью растворителей (раствор A).Разбавьте 2,0 мл этого раствора до 100,0 мл смесью растворителей.
Эталонный раствор (с).К 5 мл раствора А добавляют 10 мг ХКР хенодезоксихолевой кислоты (примесь А) и доводят смесью растворителей до 50 мл.
Пластина: ТСХ пластина с силикагелем R.
Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р, ацетон Р, метиленхлорид Р (1:30:60 об/об/об).
Применение: 5 мкл.
Развитие: более 2/3 пластины.
Сушка: при 120℃ в течение 10 мин.
Обнаружение: немедленно опрыскать раствором 47,6 г/л фосфорно-молибденовой кислоты Р в смеси 1 объема серной кислоты Р и 20 объемов ледяной уксусной кислоты Р и нагреть при 120°С до появления голубых пятен на более светлом фоне.
Пригодность системы: эталонный раствор (c):
- на хроматограмме видны 2 четко разделенных основных пятна.
Ограничение: тестовое решение (а):
- примесь С: любое пятно, обусловленное примесью С, не более интенсивное, чем основное пятно на хроматограмме, полученной с раствором сравнения (b) (0,1%).
Связанные вещества.Жидкостная хроматография (2.2.29).
Смесь растворителей: метанол Р, подвижная фаза (10:90 об./об.).
Тестовое решение.Растворяют 60 мг испытуемого вещества в смеси растворителей и доводят смесью растворителей до 20,0 мл.
Эталонный раствор (а).Растворить содержимое флакона с урсодезоксихолевой кислотой для пригодности системы CRS (содержащей примеси A и H) в 1,0 мл смеси растворителей.
Эталонный раствор (б).Разбавьте 1,0 мл испытуемого раствора до 100,0 мл смесью растворителей.Разбавьте 1,0 мл этого раствора до 10,0 мл смесью растворителей.
Столбец:
-размер: l=0,25 м, Ø=4,6 мм;
-неподвижная фаза: октадецилсилилсиликагель с концевыми блоками дляхроматография Р (5 мкм);
- температура: 40 ℃ ± 1 ℃.
Подвижная фаза: смешать 30 объемов ацетонитрила Р, 37 объемов 0,78 г/л раствора натрия дигидрофосфата Р, доведенного до рН 3 фосфорной кислотой Р, и 40 объемов метанола Р.
Скорость потока: 0,8 мл/мин.
Обнаружение: рефрактометр при 35 ± 1 ℃.
Инъекция: 150 мкл.
Время действия: в 4 раза больше времени удерживания урсодезоксихолевой кислоты.
Идентификация примесей: используйте хроматограмму с урсодезоксихолевой кислотой для определения пригодности системы CRS и хроматограмму, полученную с раствором сравнения (а), для идентификации пиков, обусловленных примесями A и H.
Относительное удерживание по отношению к урсодезоксихолевой кислоте (время удерживания = около 14 мин): H примеси = около 0,9;примесь А = около 2,8.
Пригодность системы: эталонный раствор (а):
-разрешение: минимум 1,5 между пиками из-за примеси H и урсодезоксихолевой кислоты.
Ограничения:
- примесь А: не более чем в 10 раз превышает площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (1,0%);
-неуказанные примеси: для каждой примеси не более площади основного пика на хроматограмме, полученной с раствором сравнения (б) (0,10%);
- всего: не более чем в 15 раз больше площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (б) (1,5%);
- предел игнорирования: 0,5-кратная площадь основного пика на хроматограмме, полученная с раствором сравнения (b) (0,05%).
Тяжелые металлы (2.4.8): максимум 20 частей на миллион.
1,0 г соответствует испытанию C. Приготовьте раствор сравнения, используя 2 мл стандартного раствора свинца (10 ppm Pb) R.
Потери при сушке (2.2.32): максимум 1,0 %, определяемые на 1000 г при сушке в печи при 105°С.
Сульфатная зола (2.4.14): не более 0,1 % в расчете на 1,0 г.
ПРОБНЫЙ
0,350 г растворяют в 50 мл этанола (96%-ного) Р, предварительно нейтрализованного до 0,2 мл раствора фенолфталеина Р. Прибавляют 50 мл воды Р и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розовой окраски.
1 мл 0,1 М гидроксида натрия эквивалентен 39,26 мг C24H40O4.
ПРИМЕСИ
Указанные примеси: А, С.
Другие обнаруживаемые примеси (следующие вещества, если они присутствуют в достаточном количестве, могут быть обнаружены одним или другим тестом в монографии. Они ограничены общим критерием приемлемости для других/неуказанных примесей и/или общей монографии Вещества для фармацевтического применения (2034).Поэтому нет необходимости идентифицировать эти примеси для демонстрации соответствия.См. также 5.10.
Контроль примесей в веществах для фармацевтического применения): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-дигидрокси-5β-холан-24-овая кислота (хенодезоксихолевая кислота),
B. 3α,7α,12α-тригидрокси-5β-холан-24-овая кислота (холевая кислота),
C. 3α-гидрокси-5β-холан-24-овая кислота (литохолевая кислота),
D. 3α,7β,12α-тригидрокси-5β-холан-24-овая кислота (урсохолевая кислота),
E. 3α,12α-дигидрокси-5β-холан-24-овая кислота (дезоксихолевая кислота),
F. 3α-гидрокси-7-оксо-5β-холан-24-овая кислота,
G. метил 3α,7β-дигидрокси-5β-холан-24-оат,
H. 3β,7β-дигидрокси-5β-холан-24-овая кислота,
I. 5β-холан-3α,7β,24-триол.