L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Assay >98.5% (HPLC) කර්මාන්ත ශාලාව

L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) විශ්ලේෂණය කිරීමේ ක්‍රමය (CAS: 17193-40-7)
විස්තරය: නියැදි ග්රෑම් 2 ක් පමණ පිරිසිදු හා වියලි පෙට්‍රි-ඩිෂ් එකක තබා නියැදියේ පෙනුම නිරීක්ෂණය කරන්න.වාර්තා කිරීම: නිරීක්ෂණ වාර්තා කරන්න
හඳුනාගැනීම: HPLC විසින් වර්ණදේහ සංශුද්ධතාවයෙන් ලබාගත් පරිදි පද්ධති යෝග්‍යතා ප්‍රපරේශනයේ ක්‍රෝමැටෝග්‍රෑම් හි ප්‍රධාන උච්චයේ රඳවා ගැනීමේ කාලය සමඟ පරීක්ෂණ සකස් කිරීමේ වර්ණදේහයේ ප්‍රධාන උච්චයේ රඳවා ගැනීමේ කාලය සසඳන්න.
වියලීමේ පාඩුව: වීදුරු-නැවතුම්, නොගැඹුරු බර බෝතලයක් 105±2℃ විනාඩි 30 ක් වියළන්න.ඩෙසිකේටරයක කාමර උෂ්ණත්වයට සිසිල් වීමට ඉඩ දෙන්න.බර කිරන බෝතලය නැවතුමකින් නිවැරදිව කිරා මැන බර සටහන් කරන්න (W1).නිවැරදිව කිරා මැන බැලූ ද්‍රව්‍ය ප්‍රමාණය ග්‍රෑම් 1 සිට 2 දක්වා කිරුම් බෝතලයට මාරු කරන්න.මෘදු, පැත්තකින් සෙලවීම මගින්, පරීක්ෂණ නියැදිය මිලිමීටර් 5ක් පමණ ගැඹුරට ප්‍රායෝගිකව හැකි තරම් ඒකාකාරව බෙදා හරින්න.පටවා ඇති කිරුම් බෝතලය කිරා මැන බලා බර සටහන් කරන්න (W2).පැටවූ බෝතලය වියළන උඳුන තුල තබන්න, නැවතුම ඉවත් කර කුටියේ ද තබන්න.පරීක්ෂණ නියැදිය 105±2℃ දී පැය 3ක් වියළන්න.කුටිය විවෘත කළ පසු, බෝතලය වහා වසා, ඩෙසිකේටරයක කාමර උෂ්ණත්වයට පැමිණීමට ඉඩ දෙන්න.බර කිරන බෝතලය නැවතුම සමඟ නිවැරදිව කිරා මැන බලා බර (W3).පහත සූත්‍රය භාවිතයෙන් නියැදිය වියළීමේ ප්‍රතිශතයේ පාඩුව ගණනය කරන්න:
වියලීමේදී ගණනය කිරීමේ පාඩුව (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC විසින් Enantiomer අන්තර්ගතය:
රසායනික සහ ප්රතික්රියාකාරක:
n-Hexane AR ශ්‍රේණිය
මෙතනෝල් HPLC ශ්‍රේණිය
Isopropyl ඇල්කොහොල් HPLC ශ්‍රේණිය
ඩයිඑතිලමයින් ඒආර් ශ්‍රේණිය
ප්රමිති: L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl සම්මතය;L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl enantiomer සම්මතය
ජංගම අදියර: n-Hexane, Isopropyl Alcohol, Methanol සහ Diethylamine (65:20:15:0.1 v/v/v/v) සමජාතීය මිශ්‍රණයක් සකස් කරන්න.
හිස් සකස් කිරීම: මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 2.5 ක් මිලි ලීටර් 10 පරිමාමිතික නළයකට මාරු කරන්න, ජංගම අදියර සමඟ පරිමාවට තනුක කර මිශ්ර කරන්න.
පද්ධති යෝග්‍යතා සකස් කිරීම:
නිවැරදිව කිරා මැන බලා L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ප්‍රමිතිය සහ L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl enantiomer ප්‍රමිතිය මිලිලීටර් 10ක පරිමාමිතික පෙට්ටියකට මිලිග්‍රෑම් 5 බැගින් මාරු කරන්න, මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 2.5ක් පමණ දියකර, ජංගම දුරකථන සමඟ පරිමාවට තනුක කරන්න. අදියර සහ මිශ්ර.
පරීක්ෂණ සූදානම:
නිවැරදිව කිරා මැන බලා නියැදි මිලිග්‍රෑම් 5ක් පමණ මෝල් 10 පරිමාමිතික නළයකට මාරු කරන්න, මෙතනෝල් මිලිලීටර් 2.5ක පමණ දියකර ජංගම අදියර සමඟ පරිමාවට තනුක කර මිශ්‍ර කරන්න.
උපකරණ පරාමිතීන්:
උපකරණය: HPLC ඉන්ජෙක්ටරය, පොම්පය, UV අනාවරකය සහ රෙකෝඩරය සහිත
තීරුව: ChiralPak-IC (4.6mm x 250mm) 5 μ හෝ ඊට සමාන
ප්රවාහ අනුපාතය: 1.0 ml / විනාඩි
තරංග ආයාමය: 260nm
එන්නත් පරිමාව: 10 μL
තීරු කෝවන් උෂ්ණත්වය: 25℃
ධාවන කාලය: විනාඩි 20 යි
පටිපාටිය
පහත දැක්වෙන අනුපිළිවෙලෙහි සඳහන් පරිදි විසඳුම් එන්නත් කරන්න.වර්ණදේහ සටහන් කර නිර්ණායක තහවුරු කරන්න:
එන්නත් විස්තරය එන්නත් කිරීමේ නිර්ණායක ගණන
හිස් සකස් කිරීම 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl හෝ enantiomer රඳවා තබා ගන්නා අවස්ථාවේ කිසිදු බාධාකාරී උච්චයක් නිරීක්ෂණය නොකළ යුතුය.
පද්ධති යෝග්‍යතාවය සකස් කිරීම 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl සහ enantiomer උපරිම අතර විභේදනය 2.0 ට නොඅඩු විය යුතුය.
පරීක්ෂණ සකස් කිරීම 1 නියැදියේ එන්ටියෝමර් අන්තර්ගතය තීරණය කිරීමට පරීක්ෂණ වර්ණදේහ භාවිතා කරන්න.
සාපේක්ෂ රඳවා ගැනීමේ වේලාවන්:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0
Enantiomer 1.11 ගැන
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl රඳවා ගැනීමේ කාලය විනාඩි 9.8ක් පමණ වේ.
ගණනය කිරීම: පරීක්ෂණ සකස් කිරීමෙන් ලබාගත් වර්ණදේහයේ, L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl සහ Enantiomer අපේක්ෂා කරන සියලුම මුදුන් නොසලකා හරින්න.ප්‍රදේශ සාමාන්‍යකරණ ක්‍රමය අනුව නියැදියේ ඇති එන්ටියෝමර් අන්තර්ගතය වාර්තා කරන්න.
HPLC විසින් වර්ණදේහ සංශුද්ධතාවය සහ අපද්‍රව්‍ය:
රසායනික සහ ප්රතික්රියාකාරක:
ඩයමෝනියම් පොස්පේට් AR ශ්‍රේණිය
පොස්පරික් අම්ලය AR ශ්‍රේණිය
මෙතනෝල් HPLC ශ්‍රේණිය
පිරිසිදු ජලය
ප්රමිති
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl සම්මතය
4-Nitro-L-Phenylalanine monohydrate සම්මතය
ජංගම අදියර-A
ඩයමෝනියම් පොස්පේට් ග්‍රෑම් 6.6 ක් පිරිසිදු ජලය මිලි ලීටර් 1000 ක දියකරන්න.පොස්පරික් අම්ලය සමඟ මෙම ද්‍රාවණයේ pH අගය 6.0 දක්වා සකසන්න.පෙරහන සහ වායුව.ද්‍රාවණයේ pH අගය මැනීමට පෙර, pH මීටරය සම්මත බෆර ද්‍රාවණය pH 4.01 සහ 7.00 සමඟ ක්‍රමාංකනය කරන්න.
ජංගම අදියර-B
මෙතනෝල් HPLC ශ්‍රේණිය
පද්ධති යෝග්‍යතා සකස් කිරීම
නිවැරදිව කිරා මැන බලා L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ප්‍රමිතිය සහ 4-Nitro-L-Phenylalanine monohydrate ප්‍රමිතිය මිලි ලීටර් 50 පරිමාමිතික පෙට්ටියකට මිලිග්‍රෑම් 25 බැගින් මාරු කර, මෙතනෝල් සමඟ පරිමාවට තනුක කර මිශ්‍ර කරන්න.
පරීක්ෂණ සකස් කිරීම:
නිවැරදිව කිරා මැන බලා මිලිග්‍රෑම් 25ක පමණ සාම්පලයක් මිලිලීටර් 50ක පරිමාමිතික නළයකට මාරු කර, මෙතනෝල් සමඟ පරිමාවට තනුක කර මිශ්‍ර කරන්න.
උපකරණ පරාමිතීන්:
උපකරණය: HPLC ඉන්ජෙක්ටරය, පොම්පය, UV අනාවරකය සහ රෙකෝඩරය සහිත
තීරුව: XTerra RP-18 (4.6mm x 150mm) 5 μ හෝ ඊට සමාන
ප්රවාහ අනුපාතය: 1.0 ml / විනාඩි
තරංග ආයාමය: 265nm
එන්නත් පරිමාව: 20 μL
තීරු කෝවන් උෂ්ණත්වය: 25℃
ධාවන කාලය: විනාඩි 45 යි
Gradient වැඩසටහන
කාලය (මිනි) ජංගම අදියර-A % ජංගම අදියර-B %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
පටිපාටිය:
පහත දැක්වෙන අනුපිළිවෙලෙහි සඳහන් පරිදි විසඳුම් එන්නත් කරන්න.වර්ණදේහ සටහන් කර නිර්ණායක තහවුරු කරන්න:
හිස් සකස් කිරීම 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl රඳවා තබා ගන්නා අවස්ථාවේ කිසිදු බාධාකාරී උච්චයක් නිරීක්ෂණය නොකළ යුතුය.
පද්ධති යෝග්‍යතා සකස් කිරීම 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl උච්චය සඳහා ටේලිං සාධකය 2.0 ට නොඅඩු විය යුතුය.
පරීක්ෂණ සකස් කිරීම 1 වර්ණදේහ සංශුද්ධතාවය සහ අපද්‍රව්‍ය තීරණය කිරීමට පරීක්ෂණ වර්ණදේහ භාවිතා කරන්න.
සාපේක්ෂ රඳවා ගැනීමේ වේලාවන්:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0 (රඳවා ගැනීමේ කාලය විනාඩි 11.4 ක් පමණ)
4-Nitro-L-Phenylalanine 0.4 පමණ
ටොලුයින් 2.3 පමණ
ගණනය කිරීම්:
පරීක්ෂණ සකස් කිරීමෙන් ලබාගත් වර්ණදේහයේ, හිස් නිවැරදි කිරීමෙන් පසුව, ටොලුයින් හේතුවෙන් උච්චය නොසලකා හරින්න.ප්‍රදේශ සාමාන්‍යකරණ ක්‍රමය අනුව නියැදියේ ඇති වර්ණදේහ සංශුද්ධතාවය, 4-Nitro-L-Phenylalanine අන්තර්ගතය සහ සම්පූර්ණ අපද්‍රව්‍ය වාර්තා කරන්න.