Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-terc-butyl-L-serín Čistota >98,5 % (HPLC)

Postupy inšpekcie
1. Vzhľad
-- Vizuálna kontrola
2. Čistota (HPLC)
2.1 Nástroj
Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia, PDA detektor.
Elektronické analytické váhy
2.2 Činidlo
Acetonitril (chromatografická kvalita), kyselina trifluóroctová (chromatografická kvalita)
2.3 Chromatografické podmienky
2.3.1 Stĺpec: YMC-ODS-AM, 5 μl, 250 x 4,6 mm
2.3.2 Detekčná vlnová dĺžka: INC220nm
Prietok: 1,0 ml/min
Veľkosť vzorky: 10 μl (referenčná)
Riedidlo: acetonitril
Čas zberu dát: 25,00 min
2.4 Príprava mobilnej fázy
Mobilná fáza A (0,1 % kyselina trifluóroctová voda): presná absorpcia 2. Zrieďte 0 ml kyseliny trifluóroctovej vodou na 2000 ml, dobre premiešajte a odplynite;
Mobilná fáza B (0,1 % acetonitril trifluóroctová kyselina): presná absorpcia 2,0 ml kyseliny trifluóroctovej sa zriedilo na 2000 ml acetonitrilom, premiešalo a odplynilo;
2.5 Gradientový program mobilnej fázy
Čas (min) A% B%
0,00 90 10
13,00 10 90
18:00 10 90
18.01 90 10
23,00 90 10
2.6 Príprava roztoku vzorky
Odvážte a rozpustite 0,1 g vzorky s acetonitrilom a zrieďte na 100 ml, pred použitím dobre pretrepte alebo na rovnakú koncentráciu.Pripravte dve vzorky paralelne.
2.7 Stanovenie vzorky
Analyzujte vzorku podľa nasledujúceho postupu odberu vzoriek:
Viac ako 1 injekcia slepého roztoku
1 vzorový roztok stehu 1#
1 vzorový roztok stehu 2#
2.8 Výpočet výsledku
2.8.1 Metóda normalizácie plochy píku sa použila na výpočet HPLC čistoty odpočítaním prázdneho priestoru.
2.8.2 Relatívna stredná odchýlka čistoty dvoch ihiel nesmie byť väčšia ako 1 %
2.8.3 Ak výsledky oboch nástrekov spĺňajú akceptačné kritériá, za konečný výsledok sa považuje priemerná čistota.
3, Bod topenia -- prístroj na meranie bodu topenia RY-1
4. Metóda detekcie straty sušením
4.1 Nástroje:
Elektrická termostatická sušiaca pec, zostatok jedna ku desaťtisíc.
4.2 Postup:
V plochej odvažovačke so zabrúseným uzáverom úst s konštantnou hmotnosťou a presušením odvážte 1 gram vzorky (s presnosťou na 0,0001 gramu).Vzorka by sa mala rovnomerne rozložiť na dno navažovačky s hrúbkou nie väčšou ako 10 mm, vložiť do elektrickej sušiacej pece s konštantnou teplotou, sušiť pri teplote 105 – 110 °C počas 3 hodín a potom premiestniť do sušiacej miestnosti, ochladiť na izbovú teplotu a odvážte.
Výpočet: Strata suchej hmotnosti %= (M1-M2) ÷M×100
Kde: M1: hmotnosť vzorky a navažovačky pred sušením, g
M2: Hmotnosť vzorky a navažovačky po vysušení, g
M: Hmotnosť vzorky, gram
5. Špecifická rotácia
-- Špecifická rotácia sa meria v súlade s GB/T613-1988
Príprava vzorky: 0,5000 g vzorky sa presne odvážilo a prenieslo do čistej a suchej 50 ml volumetrickej fľaše s 20 ml etylacetátu.Fľaša bola uzavretá a pretrepaná, aby sa rozpustil etylacetát.
Test: Pred testom nastavte nulu gyroskopu, potom naplňte skúmavku roztokom vzorky, zaznamenajte uhol vychýlenia a vypočítajte špecifickú rotáciu vzorky pomocou nasledujúceho vzorca.
[α]20/D= (r×50) ÷(D×W)
Kde:
[α]20/D: Špecifická rotácia roztoku vzorky pri 25 °C
r: Rotácia pozorovaná pri 25 °C pre roztok vzorky
50: Pripravte objem roztoku vzorky (ml)
w: Hmotnosť vzorky (g)
L: Dĺžka optickej trubice (dm)
6. Analýza TCL
Príprava vzorky: 0,5000 g vzorka sa presne odvážila a premiestnila do čistej a suchej 50 ml volumetrickej fľaše, pridalo sa 40 ml EtoH, fľaša sa uzavrela a pretrepala, aby sa rozpustila, a potom sa zriedila na mieru pomocou EtoH.
Príprava kontrolnej vzorky: 0,5000 g vzorka sa presne odvážila a preniesla do čistej a suchej 50 ml odmernej fľaše, pridalo sa 40 ml vody a 2 kvapky 6N kyseliny chlorovodíkovej, fľaša sa uzavrela a pretrepala, aby sa rozpustila, a potom sa zriedila na mieru s voda.Potom vezmite 0,5 vyššie uvedenej kvapaliny a zrieďte ju etanolom v 100 ml fľaštičke na referenčnú vzorku s 1,0 % stupnicou zvyškov aminokyselín.
Vzorky s objemom 10 mikrolitrov sa odobrali pomocou mikrovzorkovacej striekačky a vzorky sa umiestnili na silikónovú platňu GF254.Na porovnávacie body sa odobrali 5 mikrolitrové, 10 mikrolitrové a 15 mikrolitrové bodové platne.
Vyvolávacia látka: n-butanol: ľadová kyselina octová: voda = 4:1:1.
Činidlo vyvolávajúce farbu: 5% roztok ninhydrínu v metanole.
Operácia vyvolania farby: najprv pomocou sušiča vlasov vysušte vyvolanú silikagélovú platňu, potom ju ponorte do 5% roztoku ninhydrínu v metanole, potom vysušte vyfúkaním a pečte pri vysokej teplote v elektrickej peci na vyvinutie farby.
Posúdenie: Pozrite sa na čas zafarbenia produktu, veľkosť škvrny, koncentráciu farby a porovnanie s kontrolným produktom, posúďte, že je v tomto rozmedzí.