Orlistat CAS 96829-58-2 API Čistota lieku na chudnutie 98,0~101,5 %

Orlistat
C29H53N05 495,73
l-leucín, N-formyl-, 1-[(3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl)metyl]dodecylester, [2S-[2(R*),3]]-;
N-formyl-l-leucín, ester s (3S,4S)-3-hexyl-4-[(2S)-2-hydroxytridecyl]-2-oxetanonom [96829-58-2].
DEFINÍCIA
Orlistat obsahuje NLT 98,0 % a NMT 101,5 % C29H53NO5, vypočítané na bezvodom základe bez rozpúšťadla.
IDENTIFIKÁCIA
• A. Infračervená absorpcia <197M>
• B. Retenčný čas hlavného píku roztoku vzorky zodpovedá retenčnému času štandardného roztoku, ako bol získaný v teste.
STANOVENIE
• Postup
[Poznámka – Vyhnite sa používaniu plastových baniek na prípravu alebo zadržiavanie akéhokoľvek roztoku v tejto analýze.]
Mobilná fáza: acetonitril, kyselina fosforečná a voda (860:0,05:140)
Štandardný roztok: 0,5 mg/ml USP Orlistat RS v mobilnej fáze.Podávajte ihneď po príprave alebo uchovávajte pri 5.
Roztok vzorky: 0,5 mg/ml orlistatu v mobilnej fáze.Podávajte ihneď po príprave alebo uchovávajte pri 5.
Chromatografický systém
(Pozri Chromatografia <621>, Vhodnosť systému.)
Režim: LC
Detektor: UV 195
Stĺpec: 3,9 mm x 15 cm;4-um balenie L1
Prietok: 1,0 ml/min
Veľkosť injekcie: 20 ul
Vhodnosť systému
Vzorka: Štandardný roztok
Požiadavky na vhodnosť
Relatívna štandardná odchýlka: NMT 2,0 %
Analýza
Vzorky: Štandardný roztok a Vzorkový roztok
Vypočítajte percento orlistatu (C29H53NO5) v odobranej časti orlistatu:
Výsledok = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = maximálna odozva z roztoku vzorky
rS = maximálna odozva štandardného roztoku
CS = koncentrácia USP Orlistat RS v štandardnom roztoku (mg/ml)
CU = koncentrácia orlistatu v roztoku vzorky (mg/ml)
Kritériá prijatia: 98,0 % - 101,5 % na bezvodom základe bez rozpúšťadiel
NEČISTOTY
Anorganické nečistoty
• Zvyšok po zapaľovaní <281>: NMT 0,1 %
• Ťažké kovy, metóda II <231>: 20 ppm
Organické nečistoty
• Postup 1: Limit zlúčeniny A súvisiacej s orlistatom
Štandardný roztok: 0,1 mg/ml USP Orlistat príbuznej zlúčeniny A RS v acetóne
Roztok vzorky: 50 mg/ml orlistatu v acetóne
Chromatografický systém
(Pozri Chromatografia <621>, Tenkovrstvová chromatografia.)
Režim: TLC
Adsorbent: 0,25 mm vrstva chromatografickej silikagélovej zmesi
Aplikačný objem: 10 µl
Vyvíjací rozpúšťadlový systém: toluén a etylacetát (4:1)
Detekčný roztok: Preneste 2,5 g kyseliny fosfomolybdénovej a 1 g síranu ceričitého do 100 ml odmernej banky, rozpustite a zrieďte metanolom na požadovaný objem.
Analýza
Vzorky: Štandardný roztok a Vzorkový roztok
Vyberte platňu a dôkladne ju vysušte na vzduchu.Vysušenú platňu postriekajte detekčným roztokom a vložte platňu do sušiarne pri 120 °C na 30 minút.
Kritériá prijatia: Žiadna sekundárna škvrna z roztoku vzorky zodpovedajúca zlúčenine A súvisiacej s orlistatom nie je intenzívnejšia ako zodpovedajúca škvrna zo štandardného roztoku (0,2 %).
• Postup 2: Limit zlúčeniny B súvisiacej s orlistatom
Štandardný roztok: 0,025 mg/ml USP Orlistat príbuznej zlúčeniny B RS v metylénchloride
Roztok vzorky: 50 mg/ml orlistatu v metylénchloride
Roztok obohatenej vzorky: 50 mg/ml orlistatu v štandardnom roztoku
Chromatografický systém
(Pozri Chromatografia <621>, Vhodnosť systému.)
Režim: GC
Detektor: Ionizácia plameňa
Kolóna: 0,32 mm x 30 m tavený oxid kremičitý, potiahnutý 0,25 μm stacionárnou fázou G27
Teplota kolóny: Pozrite si tabuľku teplotných programov nižšie.
Počiatočná teplota () Nábeh teploty (/min) Konečná teplota () Čas udržania na konečnej teplote (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Teplota
Injektor: 270
Detektor: 280
Nosný plyn: hélium
Prietok: 30 ml/min
Pomer delenia: 10:1
Veľkosť injekcie: 2 ul
Vhodnosť systému
Vzorka: Štandardný roztok
Požiadavky na vhodnosť
Relatívna štandardná odchýlka: NMT 10,0 %
Analýza
Vzorky: Roztok vzorky a roztok obohatenej vzorky
Vypočítajte percentuálny podiel zlúčeniny B súvisiacej s orlistatom v odobranej časti orlistatu:
Výsledok = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = maximálna odozva zlúčeniny B príbuznej orlistatu z roztoku vzorky
rSP = maximálna odozva zlúčeniny B príbuznej orlistatu z roztoku obohatenej vzorky
CS = koncentrácia USP zlúčeniny B RS súvisiacej s orlistatom v štandardnom roztoku (mg/ml)
CT = koncentrácia orlistatu v roztoku obohatenej vzorky (mg/ml)
Kritériá prijatia: Nájdené NMT 0,05 % zlúčeniny B príbuznej orlistatu.
• Postup 3
[Poznámka – Vyhnite sa používaniu plastových baniek na prípravu alebo zadržiavanie akéhokoľvek roztoku v tejto analýze.]
Mobilná fáza, štandardný roztok a roztok vzorky: Pripravte sa podľa pokynov v teste.
Systém vhodnosti riešenia: 10 ug/ml USP Orlistat RS, 0,1 ug/ml USP Orlistat príbuzná zlúčenina C RS a 0,25 ug/ml USP Orlistat príbuzná zlúčenina D RS v mobilnej fáze
Chromatografický systém
(Pozri Chromatografia <621>, Vhodnosť systému.)
Postupujte podľa pokynov v teste, okrem chromatografie roztoku vhodnosti systému.
Vhodnosť systému
Ukážka: Riešenie vhodnosti systému
Požiadavky na vhodnosť
Pomer signálu k šumu: NLT 3 pre vrcholy zlúčeniny C príbuznej orlistatu a zlúčeniny D súvisiacej s orlistatom
Relatívna štandardná odchýlka: NMT 10,0 % pre vrchol orlistatu
Analýza
Vzorky: Štandardný roztok a Vzorkový roztok
Vypočítajte percento každej nečistoty v odobranej časti Orlistatu:
Výsledok = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = maximálna odozva pre každú jednotlivú nečistotu z roztoku vzorky
rS = maximálna odozva USP Orlistat RS zo štandardného roztoku
CS = koncentrácia USP Orlistat RS v štandardnom roztoku (mg/ml)
CU = koncentrácia orlistatu v roztoku vzorky (mg/ml)
F = relatívny faktor odozvy uvedený v tabuľke nečistôt 1
Kritériá prijatia: Pozri tabuľku nečistôt 1.
Tabuľka nečistôt 1
Názov Relatívna doba retencie Kritériá prijatia faktora relatívnej odozvy, NMT (%)
Formylleucinea 0,10 4,0 0,2
Zlúčenina príbuzná orlistatu C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerb s otvoreným kruhom 0,44 1,0 0,2
Zlúčenina príbuzná orlistatu D* 0,90 - Vypočítané v
Postup 4
Orlistat amidec s otvoreným krúžkom* 0,90 – vypočítané v
Postup 4
Orlistat 1,00 - -
d-leucín orlistatd 1,18 1,0 0,2
Jednotlivá neidentifikovaná nečistota - 1,0 0,1
*Koeluty v tomto LC systéme, stanovené podľa postupu 4.
N-formyl-1-leucín.
b Kyselina (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formylamino-4-metylpentanoyloxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadekánová.
c (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-fenyl-R-etylkarbomoyl]nonyl]dodecylester N-formyl-1-leucínu.
dN-Formyl-d-leucín (S)-1-[[(2S,3S)-3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl]metyl]dodecylester alebo enantiomér.
• Postup 4: Limit zlúčeniny D súvisiacej s orlistatom
Mobilná fáza: metanol a voda (83:17)
Systém vhodnosti riešenia: 4 mg/ml USP Orlistat RS a 2,4 µg/ml USP Orlistat príbuzná zlúčenina D RS v acetonitrile, v danom poradí
Štandardný roztok: 5,0 mg/ml USP Orlistat RS v acetonitrile
Roztok vzorky: 5,0 mg/ml orlistatu v acetonitrile
Chromatografický systém
(Pozri Chromatografia 621, Vhodnosť systému.)
Režim: LC
Detektor: 205 nm
Stĺpec: 4,0 mm x 25 cm;5-µm balenie L7
Prietok: 0,6 ml/min
Veľkosť injekcie: 20 ul
Vhodnosť systému
Ukážka: Riešenie vhodnosti systému
Požiadavky na vhodnosť
Pomer signálu k šumu: NLT 3 pre vrchol zlúčeniny D súvisiacej s orlistatom
Relatívna štandardná odchýlka: NMT 10,0 % pre vrchol orlistatu
Analýza
Vzorky: Štandardný roztok a Vzorkový roztok
Vypočítajte percento každej nečistoty v odobranej časti Orlistatu:
Výsledok = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = maximálna odozva pre každú jednotlivú nečistotu z roztoku vzorky
rS = maximálna odozva pre USP Orlistat RS zo štandardného roztoku
CS = koncentrácia USP Orlistat RS v štandardnom roztoku (µg/ml)
CU = koncentrácia orlistatu v roztoku vzorky (µg/ml)
F = relatívny faktor odozvy získaný v tabuľke nečistôt 2
Kritériá prijatia: Pozri tabuľku nečistôt 2.
Tabuľka nečistôt 2
Názov Relatívna doba retencie Kritériá prijatia faktora relatívnej odozvy, NMT (%)
Zlúčenina príbuzná orlistatu D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1,00 - -
Orlistat amid s otvoreným kruhom 1,25 4,3 0,1
(S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-fenyl-R-etylkarbomoyl]nonyl]-dodecylester N-formyl-1-leucínu.
• Postup 5: Limit zlúčeniny E súvisiacej s orlistatom
Pufor: 0,4 N roztok boritanu, upravený na pH 10,2
Derivitizačné činidlo: roztok o-ftaldehydu (OPA).[Poznámka - Ak nie je možné získať komerčne derivatizačné činidlo, možno ho pripraviť ako 1% kyselinu 3-merkaptopropiónovú a o-ftaldialdehyd v 0,4 M borátovom tlmivom roztoku.]
Roztok A: Preneste 4,1 g trihydrátu octanu sodného a 40 mg kyseliny etyléndiamíntetraoctovej (EDTA) do 1-litrovej odmernej banky.Rozpustite v 950 ml vody a upravte pomocou 0,1 N hydroxidu sodného na pH 7,2.Zrieďte vodou na požadovaný objem, pridajte 2,5 ml tetrahydrofuránu a premiešajte.Filtrovať a odplyňovať.
Roztok B: Preneste 2,7 g trihydrátu octanu sodného a 40 mg EDTA do 1-litrovej odmernej banky.Rozpustite v 200 ml vody a upravte pomocou 0,1 N hydroxidu sodného na pH 7,2.Pridajte 800 ml acetonitrilu, prefiltrujte a odplynite.
Mobilná fáza: Pozrite si tabuľku gradientov nižšie.
Čas (min) Roztok A (%) Roztok B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3,3
45 96,7 3,3
Štandardný roztok: Preneste odvážené množstvo približne 0,2 mg zlúčeniny E RS príbuznej USP Orlistat do 20 ml ampulky s priestorom pre hlavu.Pridajte 10 ml 4N hydroxidu sodného a liekovku uzavrite.Nádobku zahrievajte na 100 °C počas 1 hodiny, potom nechajte vychladnúť na izbovú teplotu.Preneste 2 ml výsledného roztoku do 50 ml odmernej banky a zrieďte vodou na požadovaný objem.K 0,5 ml tohto roztoku pridajte 2,0 ml pufra a 0,5 ml derivatizačného činidla.
Vzorkový roztok: Postupujte podľa pokynov pre štandardný roztok, ale namiesto toho použite 25 mg orlistatu na nahradenie 0,2 mg zlúčeniny E RS súvisiacej s USP orlistatom.
Chromatografický systém
(Pozri Chromatografia <621>, Vhodnosť systému.)
Režim: LC
Detektor: Fluorescencia 340 nm (excitácia);450 nm (emisie)
Stĺpce
Ochranný kryt: 2,1 mm × 2 cm;50-um balenie L1
Analytické: 2,1 mm x 20 cm;balenie L1
Prietok: 0,5 ml/min
Veľkosť injekcie: 20 ul
Vhodnosť systému
Vzorka: Štandardný roztok
Požiadavky na vhodnosť
Relatívna štandardná odchýlka: NMT 6,0 % pre vrchol zlúčeniny E súvisiacej s orlistatom
Analýza
Vzorky: Štandardný roztok a Vzorkový roztok
Vypočítajte percento tejto nečistoty v odobranej časti Orlistatu:
Výsledok = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = maximálna odozva pre zlúčeninu E príbuznú orlistatu v roztoku vzorky
rS = maximálna odozva pre zlúčeninu E RS príbuznú USP Orlistat v štandardnom roztoku
CS = koncentrácia USP zlúčeniny E RS súvisiacej s orlistatom v štandardnom roztoku (mg/ml)
CU = koncentrácia orlistatu v roztoku vzorky (mg/ml)
Kritériá prijateľnosti
Jednotlivá nečistota: NMT 0,2 % zlúčeniny E príbuznej orlistatu.
Celkové nečistoty: NMT Zistilo sa 1,0 % celkových nečistôt, výsledky pre postupy 1, 2, 3, 4 a 5 sa pripočítajú.
ŠPECIFICKÉ SKÚŠKY
• Optická rotácia, špecifická rotácia <781>
Roztok vzorky: 30 mg/ml v dehydrovanom alkohole
Kritériá prijatia: Medzi -48,0 a -51,0 pri 20
• Stanovenie vody, metóda Ic <921>: NMT 0,2 %
ĎALŠIE POŽIADAVKY
• Balenie a skladovanie: Uchovávajte v dobre uzavretých nádobách pri teplote 2 až 8 °C.
• Referenčné štandardy USP <11>
USP Orlistat RS
USP Orlistat príbuzná zlúčenina A RS
USP Orlistat príbuzná zlúčenina B RS
USP Orlistat príbuzná zlúčenina C RS
USP Orlistat príbuzná zlúčenina D RS
USP Orlistat príbuzná zlúčenina E RS
USP35