Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 test (HPLC) 97,0~102,0 %

paklitaxel
C47H51N014 853,91
Kyselina benzénpropánová, -(benzoylamino)-hydroxy-, 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahydro-4,11-dihydroxy-4a,8,13,13-tetrametyl-5-oxo-7,11-metano-1 H-cyklodeka[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodekahydro-4,6, 9,11,12,12b-hexahydroxy-4a,8,13,13-tetrametyl-7,11-metano-5H-cyklodeka[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-ón 6, 12b-diacetát, 12-benzoát, 9-ester s (2R,3S)-N-benzoyl-3-fenylizoserínom [33069-62-4].
Paklitaxel obsahuje nie menej ako 97,0 percent a nie viac ako 102,0 percent C47H51NO14, vypočítané na bezvodom základe bez rozpúšťadla.
[Pozor – paklitaxel je cytotoxický.Je potrebné venovať veľkú pozornosť tomu, aby sa predišlo vdýchnutiu častíc paklitaxelu a vystaveniu pokožky.]
Balenie a skladovanie - Uchovávajte v tesných nádobách odolných voči svetlu a skladujte pri kontrolovanej izbovej teplote.
Označenie – Označenie označuje typ procesu použitého na výrobu materiálu a test súvisiacich zlúčenín, ktorému materiál vyhovuje.
Referenčné štandardy USP <11>-
USP Endotoxín RS
USP Paclitaxel RS Kliknutím zobrazíte štruktúru
USP paklitaxel príbuzná zlúčenina A RS
Cefalomanín.
USP paklitaxel príbuzná zlúčenina B RS
10-deacetyl-7-epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Impurity Mixture RS
Zmes paklitaxelu a nasledujúcich príbuzných zlúčenín: propylový analóg, cefalomanín, sek-butylový analóg, n-butylový analóg, benzylový analóg, baccatín VI, pentylový analóg a 7-epipaclitaxel.
Identifikácia-
A: Infračervená absorpcia <197K>.
B: Retenčný čas hlavného píku v chromatograme prípravku testu zodpovedá času na chromatograme štandardného prípravku získaného pri teste.
Špecifická rotácia 781S: medzi 49,0 a 55,0 pri 20 °C, vypočítané na bezvodom základe bez rozpúšťadla.
Testovaný roztok: 10 mg na ml v metanole.
Testy na stanovenie počtu mikroorganizmov <61> a Testy na špecifické mikroorganizmy <62> – Celkový počet aeróbnych mikroorganizmov nepresahuje 100 cfu na g.Spĺňa požiadavky testov na neprítomnosť Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella species a Escherichia coli.
Bakteriálne endotoxíny 85-Neobsahuje viac ako 0,4 USP endotoxínovej jednotky na mg paklitaxelu.
Voda, metóda Ic <921>: nie viac ako 4,0 %.
Zvyšok po zapálení <281>: nie viac ako 0,2 %.
Ťažké kovy, metóda II <231>: 0,002 %.
Súvisiace zlúčeniny-
test 1 (pre materiál označený ako izolovaný z prírodných zdrojov) – Ak materiál vyhovuje tomuto testu, označenie znamená, že spĺňa USP súvisiace zlúčeniny Test 1.
Riedidlo - pripravte podľa pokynov v teste.
Roztok A - Pripravte prefiltrovaný a odplynený acetonitril.
Roztok B – Pripravte prefiltrovanú a odplynenú vodu.
Mobilná fáza - Použite variabilné zmesi roztoku A a roztoku B podľa pokynov pre chromatografický systém.V prípade potreby vykonajte úpravy (pozri Vhodnosť systému v časti Chromatografia 621).
Roztok vhodnosti pre systém - Presne odvážené množstvá zlúčeniny A RS príbuznej s paklitaxelom a zlúčeniny B RS príbuznej s paklitaxelom podľa US patentu rozpustite v metanole, aby ste získali roztok so známymi koncentráciami asi 10 ug každého na ml.Preneste 5,0 ml tohto roztoku do odmernej banky s objemom 50 ml, zrieďte riedidlom na požadovaný objem a premiešajte.
Štandardný roztok - Pomocou sonikácie rozpustite presne odvážené množstvo USP Paclitaxel RS v riedidle a zrieďte kvantitatívne a v prípade potreby postupne riedidlom, aby ste získali roztok so známou koncentráciou asi 5 ug na ml.
Testovací roztok – použite prípravok testu.
Chromatografický systém (pozri Chromatografia <621>) - Kvapalinový chromatograf je vybavený 227 nm detektorom a 4,6 mm x 25 cm kolónou, ktorá obsahuje 5 μm náplň L43.Prietok je približne 2,6 ml za minútu.Teplota kolóny sa udržiava na 30 °C. Chromatograf je naprogramovaný nasledovne.
Čas (minúty) Roztok A (%) Roztok B (%) Elúcia
0–35 35 65 izokratické
35–60 35®80 65®20 lineárny gradient
60–70 80®35 20®65 lineárny gradient
70–80 35 65 izokratická chromatografia roztoku vhodnosti systému a zaznamenajte odozvy píku podľa pokynov pre postup: relatívne retenčné časy sú približne 0,78 pre zlúčeninu príbuznú paklitaxelu a 0,86 pre zlúčeninu príbuznú paklitaxelu B (vzhľadom na retenčný čas pre paclitaxel získaný z testovací roztok);a rozlíšenie R medzi zlúčeninou A príbuznou paklitaxelu a zlúčeninou B príbuznou paklitaxelu nie je menšie ako 1,0.Chromatografujte štandardný roztok a zaznamenajte maximálne odozvy podľa pokynov pre postup: relatívna štandardná odchýlka pre replikované injekcie nie je väčšia ako 2,0 %.
Postup - Nastreknite objem (asi 15 µl) testovacieho roztoku do chromatografu, zaznamenajte chromatogram a zmerajte plochy pre hlavné píky.Vypočítajte percento každej nečistoty v časti paklitaxelu podľa vzorca:
100 (pia / rU)
kde F je relatívny faktor odozvy pre každý vrchol nečistoty (hodnoty pozri v tabuľke 1);ri je plocha píku pre každú jednotlivú nečistotu;a rU je plocha píku paclitaxelu.
stôl 1
Relatívny retenčný čas Faktor relatívnej odozvy (F) Názov Limit (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xylozylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanín (zlúčenina A príbuzná paklitaxelu) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihydrocefalomanín a21
0,86 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (zlúčenina B príbuzná paklitaxelu) 0,5
1,10 1,00 Benzyl analóg 3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-epicefalomanín 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Rozlíšenie môže byť pre tieto píky neúplné, v závislosti od prítomných relatívnych množstiev;súčet a1 a a2 nie je väčší ako 0,5 %.
2 Rozlíšenie môže byť pre tieto píky neúplné, v závislosti od prítomných relatívnych množstiev;súčet b1 a b2 nie je väčší ako 0,5 %.
3 Nasledujúci chemický názov je priradený príbuznej zlúčenine, benzylovému analógu: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(2-fenylacetylamino)propánovou.
Okrem neprekročenia limitov pre nečistoty súvisiace s paklitaxelom v tabuľke 1 sa nenašlo viac ako 0,1 % akejkoľvek inej jednotlivej nečistoty;a nenašlo sa viac ako 2,0 % celkových nečistôt.
test 2 (pre materiál označený ako vyrobený polosyntetickým procesom)— Ak materiál vyhovuje tomuto testu, označenie znamená, že spĺňa USP súvisiace zlúčeniny Test 2.
Riedidlo - použite acetonitril.
Roztok A-Použite prefiltrovanú a odplynenú zmes vody a acetonitrilu (3:2).
Roztok B-Použite prefiltrovaný a odplynený acetonitril.
Mobilná fáza - Použite variabilné zmesi roztoku A a roztoku B podľa pokynov pre chromatografický systém.V prípade potreby vykonajte úpravy (pozri Vhodnosť systému v časti Chromatografia 621).
Roztok vhodnosti pre systém - Presne odvážené množstvá USP paklitaxelu RS a USP paklitaxelu príbuznej zlúčeniny B RS rozpustite v riedidle, v prípade potreby pretrepte a sonikujte, aby ste získali roztok so známymi koncentráciami približne 0,96 mg a 0,008 mg na ml.
Testovací roztok - Preneste približne 10 mg paclitaxelu, presne odváženého, ​​do 10 ml odmernej banky, rozpustite a zrieďte s riedidlom na požadovaný objem, v prípade potreby pretrepte a sonikujte a premiešajte.
Chromatografický systém (pozri Chromatografiu 621) – Kvapalinový chromatograf je vybavený 227 nm detektorom a 4,6 mm x 15 cm kolónou, ktorá obsahuje 3 µm náplň L1.Prietok je približne 1,2 ml za minútu.Teplota kolóny sa udržiava na 35 °C. Chromatograf je naprogramovaný nasledovne.
Čas (minúty) Roztok A (%) Roztok B (%) Elúcia
0-20 100 0 izokratické
20-60 100®100®90 lineárny gradient
60-62 10®100 90®0 lineárny gradient
62-70 100 0 izokratická chromatografia roztoku vhodnosti pre systém a zaznamenajte maximálne odozvy podľa pokynov pre postup: relatívne retenčné časy sú približne 0,94 pre zlúčeninu B príbuznú paklitaxelu a 1,0 pre paklitaxel;rozlíšenie, R, medzi paclitaxelovou zlúčeninou B a paclitaxelom nie je menšie ako 1,2;a relatívna štandardná odchýlka pre opakované injekcie nie je väčšia ako 2,0 %.
Postup – Samostatne vstreknite rovnaké objemy (asi 15 µl) riedidla a testovacieho roztoku do chromatografu, zaznamenajte chromatogramy a zmerajte plochy pre všetky píky.Neberte do úvahy žiadne vrcholy spôsobené riedidlom.Vypočítajte percento každej nečistoty v časti paklitaxelu podľa vzorca:
100 (piatok / rs)
kde F je relatívny faktor odozvy pre každú nečistotu (hodnoty pozri v tabuľke 2);ri je plocha píku pre každú nečistotu získanú z testovacieho roztoku;a rs je súčet plôch všetkých píkov získaných z testovacieho roztoku.
Tabuľka 2
Relatívny retenčný čas Faktor relatívnej odozvy (F) Názov Limit (%)
0,11 1,24 10-deacetylbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-debenzoylpaclitaxel-2-pentenoát 0,7
0,921 1,00 Oxetánový kruh otvorený, acetyl a benzoyl migrovali 2 x 1
0,921 1,00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (zlúčenina B príbuzná paklitaxelu) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetylpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Rozlíšenie môže byť pre tieto píky neúplné, v závislosti od prítomných relatívnych množstiev;súčet x1, x2 a x3 nie je väčší ako 0,4 %.
2 Nasledujúce chemické názvy sú priradené príbuzným zlúčeninám Fotodegradant;Oxetánový kruh sa otvoril, acetyl a benzoyl migrovali;a 10,13-bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihydroxy-4,16,17,17-tetrametyl-8-oxa- 3-oxo-12-fenylkarbonyloxypentacyklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanoát
Oxetánový kruh sa otvoril, acetyl a benzoyl migrovali
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahydroxy-8,12,15,15-tetrametyl-9-oxo- 4-(fenylkarbonyloxymetyl)tricyklo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanoát
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-ester s kyselinou (2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propánovou, 10-ester s (2S,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino) ) kyselina propánová
Okrem neprekročenia limitov pre nečistoty súvisiace s paklitaxelom v tabuľke 2 sa nenašlo viac ako 0,1 % akejkoľvek inej jednotlivej nečistoty;a nenašlo sa viac ako 2,0 % celkových nečistôt.
test 3 (pre materiál označený ako vyrobený procesom fermentácie rastlinných buniek) – Ak materiál vyhovuje tomuto testu, označenie znamená, že spĺňa USP súvisiace zlúčeniny Test 3.
Roztok A - Pripravte prefiltrovanú a odplynenú zmes vody a acetonitrilu (3:2).
Roztok B - Pripravte prefiltrovaný a odplynený acetonitril.
Mobilná fáza - Použite variabilné zmesi roztoku A a roztoku B podľa pokynov pre chromatografický systém.V prípade potreby vykonajte úpravy (pozri Vhodnosť systému v časti Chromatografia 621).
Roztok vhodnosti pre systém - Rozpustite zmes USP Paclitaxel Impurity Mixture RS v acetonitrile, v prípade potreby sonikujte, aby ste získali roztok so známou koncentráciou približne 1 mg na ml.
Štandardný roztok – Presne odvážené množstvo USP Paclitaxel RS rozpustite v acetonitrile, v prípade potreby sonikujte, aby ste získali roztok so známou koncentráciou približne 1 mg na ml.
Testovací roztok - Preneste približne 10 mg paclitaxelu, presne odváženého, ​​do 10 ml odmernej banky.Rozpustite a zrieďte acetonitrilom na objem, v prípade potreby sonikujte a premiešajte.
Chromatografický systém (pozri Chromatografiu 621) – Kvapalinový chromatograf je vybavený 227 nm detektorom a 4,6 mm x 15 cm kolónou, ktorá obsahuje 3 µm náplň L1.Prietok je približne 1,2 ml za minútu.Chromatograf je naprogramovaný nasledovne.
Čas (minúty) Roztok A (%) Roztok B (%) Elúcia
0-28 100 0 izokratické
28-33 100®98 0®2 lineárny gradient
33–58 98®10 2®90 lineárny gradient
58-60 10 90 izokratické
60-63 10®100 90®0 lineárny gradient
63-70 100 0 izokratická chromatografia roztoku vhodnosti pre systém a zaznamenajte maximálne odozvy podľa pokynov pre postup: rozlíšenie R medzi paklitaxelom a benzylovým analógom nie je menšie ako 1,8.Chromatografujte štandardný roztok a zaznamenajte maximálne odozvy podľa pokynov pre postup: relatívna štandardná odchýlka pre replikované injekcie nie je väčšia ako 2,0 %.[poznámka - Na účely identifikácie píkov sú približné relatívne retenčné časy uvedené v tabuľke 3. Relatívne retenčné časy sú merané proti paklitaxelu.]
Tabuľka 3
Limit relatívneho času uchovávania názvu (%)
Propylový analóg 1 0,54 0,2
Cefalomanín (zlúčenina A príbuzná paklitaxelu) 0,76 0,5
sek-butylový analóg2 0,81 0,2
n-butylový analóg3 0,89 0,1
Benzylový analóg 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentylový analóg4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Nasledujúci chemický názov je priradený príbuznej zlúčenine propylový analóg: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-fenylpropánovou.
2 Nasledujúci chemický názov je priradený príbuznej zlúčenine sek-butylový analóg: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-metylbutanoylamino)-3-fenylpropánovou.
3 Nasledujúci chemický názov je priradený príbuznej zlúčenine n-butylový analóg: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-fenylpropánovou.
4 Nasledujúci chemický názov je priradený príbuznej zlúčenine pentylový analóg: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-fenylpropánovou.
Postup - Nastreknite objem (asi 12 µl) testovacieho roztoku do chromatografu, zaznamenajte chromatogram a zmerajte plochy všetkých píkov.Vypočítajte percento každej nečistoty v časti paklitaxelu podľa vzorca:
100 (ri / rU)
kde ri je odozva každej jednotlivej nečistoty;a rU je súčet plôch všetkých píkov získaných z testovacieho roztoku.Okrem neprekročenia limitov pre nečistoty súvisiace s paklitaxelom v tabuľke 3 sa nenašlo viac ako 0,1 % akejkoľvek inej jednotlivej nečistoty;a nenašlo sa viac ako 2,0 % celkových nečistôt.
Skúška-
Riedidlo - pripravte zmes metanolu a kyseliny octovej (200:1).
Mobilná fáza - Pripravte prefiltrovanú a odplynenú zmes vody a acetonitrilu (11:9).V prípade potreby vykonajte úpravy (pozri Vhodnosť systému v časti Chromatografia 621).
Štandardná príprava - Rozpustite, ak je to potrebné, pomocou sonikácie, presne odvážené množstvo USP Paclitaxel RS v riedidle a zrieďte kvantitatívne av prípade potreby postupne riedidlom, aby ste získali roztok so známou koncentráciou asi 1 mg na ml.
Príprava testu - Preneste približne 10 mg paclitaxelu, presne odváženého, ​​do 10 ml odmernej banky.Rozpustite v riedidle, v prípade potreby použite sonikáciu, zrieďte riedidlom na požadovaný objem a premiešajte.
Chromatografický systém (pozri Chromatografia <621>) - Kvapalinový chromatograf je vybavený 227 nm detektorom a 4,6 mm x 25 cm kolónou, ktorá obsahuje 5 μm náplň L43.Prietok je približne 1,5 ml za minútu.Chromatografujte štandardný prípravok a zaznamenajte vrcholové odozvy podľa pokynov pre postup: chvostový faktor je medzi 0,7 a 1,3;a relatívna štandardná odchýlka pre opakované injekcie nie je väčšia ako 1,5 %.
Postup - Samostatne vstreknite rovnaké objemy (asi 10 µl) štandardného prípravku a prípravku testu do chromatografu, zaznamenajte chromatogramy a zmerajte plochy pre hlavné píky.Vypočítajte množstvo C47H51NO14 v mg v časti paklitaxelu podľa vzorca:
10C (rU / rS)
kde C je koncentrácia, v mg na ml, USP Paclitaxel RS v štandardnom prípravku;a rU a rS sú maximálne odozvy pre paclitaxel získané z prípravku testu a prípravku štandardu, v danom poradí.