Kyselina ursodeoxycholová (UDCA) CAS 128-13-2 test 99,0 ~ 101,0 %

KYSELINA URSODEOXYCHOLOVÁ
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINÍCIA
kyselina 3a,7p-dihydroxy-5p-cholán-24-ová.
Obsah: 99,0 % až 101,0 % (sušená látka).
POSTAVY
Vzhľad: biely alebo takmer biely prášok.
Rozpustnosť: prakticky nerozpustný vo vode, voľne rozpustný v etanole (96%), mierne rozpustný v acetóne, prakticky nerozpustný v metylénchloride.
mp: približne 202 ℃.
IDENTIFIKÁCIA
Prvá identifikácia: A.
Druhá identifikácia: B, C.
A. Infračervená absorpčná spektrofotometria (2.2.24).
Porovnanie: Ursodeoxycholová kyselina CRS.
B. Preskúmajte chromatogramy získané v skúške na prítomnosť nečistoty C.
Výsledky: Hlavná škvrna na chromatograme skúšaného roztoku (b) je polohou, farbou a veľkosťou podobná hlavnej škvrne na chromatograme porovnávacieho roztoku (a).
C. Asi 10 mg sa rozpustí v 1 ml kyseliny sírovej R. Pridá sa 0,1 ml formaldehydu RS a nechá sa 5 min.Pridá sa 5 ml vody R. Získaná suspenzia je zelenomodrá.
TESTY
Špecifická optická otáčavosť (2.2.7): + 58,0 až + 62,0 (sušená látka).
0,500 g sa rozpustí v etanole bezvodom R a zriedi sa rovnakým rozpúšťadlom na 25,0 ml.
Nečistota C. Chromatografia na tenkej vrstve (2.2.27).
Zmes rozpúšťadiel: voda R, acetón R (10:90 V/V).
Skúšobný roztok (a).0,40 g skúšanej látky sa rozpustí v zmesi rozpúšťadiel a zriedi sa zmesou rozpúšťadiel na 10 ml.
Skúšobný roztok (b).Zrieďte 1 ml testovacieho roztoku (a) na 10 ml zmesou rozpúšťadiel.
Referenčný roztok (a).40 mg kyseliny ursodeoxycholovej CRL sa rozpustí v zmesi rozpúšťadiel a zriedi sa zmesou rozpúšťadiel na 10 ml.
Referenčný roztok (b).V zmesi rozpúšťadiel sa rozpustí 20 mg kyseliny litocholovej CRS (nečistota C) a zriedi sa zmesou rozpúšťadiel (roztok A) na 10,0 ml.2,0 ml tohto roztoku sa zriedia zmesou rozpúšťadiel na 100,0 ml.
Referenčný roztok (c).K 5 ml roztoku A sa pridá 10 mg kyseliny chenodeoxycholovej CRS (nečistota A) a zmes sa zriedi na 50 ml.
Platňa: TLC platňa silikagélu R.
Mobilná fáza: ľadová kyselina octová R, acetón R, metylénchlorid R (1:30:60 V/V/V).
Aplikácia: 5μL.
Vývoj: cez 2/3 platne.
Sušenie: 10 minút pri 120 °C.
Dôkaz: Ihneď nastriekajte 47,6 g/l roztoku kyseliny fosfomolybdénovej R v zmesi 1 objemových dielov kyseliny sírovej R a 20 objemových dielov kyseliny octovej ľadovej R a zahrievajte pri 120 °C, kým sa na svetlejšom pozadí neobjavia modré škvrny.
Vhodnosť systému: referenčný roztok (c):
- chromatogram ukazuje 2 zreteľne oddelené hlavné škvrny.
Limit: testovací roztok (a):
- nečistota C: žiadna škvrna spôsobená nečistotou C nie je intenzívnejšia ako hlavná škvrna na chromatograme porovnávacieho roztoku (b) (0,1 %).
Príbuzné látky.Kvapalinová chromatografia (2.2.29).
Zmes rozpúšťadiel: metanol R, mobilná fáza (10:90 V/V).
Testovací roztok.60 mg skúšanej látky sa rozpustí v zmesi rozpúšťadiel a zriedi sa zmesou rozpúšťadiel na 20,0 ml.
Referenčný roztok (a).Rozpustite obsah liekovky kyseliny ursodeoxycholovej pre vhodnosť systému CRS (obsahujúcej nečistoty A a H) v 1,0 ml zmesi rozpúšťadiel.
Referenčný roztok (b).Zrieďte 1,0 ml testovaného roztoku na 100,0 ml zmesou rozpúšťadiel.1,0 ml tohto roztoku sa zriedi na 10,0 ml zmesou rozpúšťadiel.
Stĺpec:
-veľkosť: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stacionárna fáza: na konci uzavretý oktadecylsilyl silikagél prechromatografia R (5 um);
- teplota: 40 ℃ ± 1 ℃.
Mobilná fáza: zmiešajte 30 objemových dielov acetonitrilu R, 37 objemových dielov roztoku 0,78 g/l dihydrogenfosforečnanu sodného R upraveného na pH 3 kyselinou fosforečnou R a 40 objemových dielov metanolu R.
Prietok: 0,8 ml/min.
Detekcia: refraktometer pri 35 ± 1℃.
Injekcia: 150 μl.
Doba trvania: 4-násobok retenčného času kyseliny ursodeoxycholovej.
Identifikácia nečistôt: na identifikáciu píkov spôsobených nečistotami A a H použite chromatogram dodaný s kyselinou ursodeoxycholovou pre vhodnosť systému CRS a chromatogram získaný s referenčným roztokom (a).
Relatívna retencia vzhľadom na kyselinu ursodeoxycholovú (retenčný čas = približne 14 minút): nečistota H = približne 0,9;nečistota A = asi 2,8.
Vhodnosť systému: referenčný roztok (a):
-rozlíšenie: minimálne 1,5 medzi píkmi v dôsledku nečistoty H a kyseliny ursodeoxycholovej.
Obmedzenia:
- nečistota A: nie viac ako 10-násobok plochy hlavného píku na chromatograme porovnávacieho roztoku (b) (1,0 %);
-nešpecifikované nečistoty: pre každú nečistotu nie viac ako plocha hlavného píku na chromatograme porovnávacieho roztoku (b) (0,10 %);
- celkovo: nie viac ako 15-násobok plochy hlavného píku na chromatograme porovnávacieho roztoku (b) (1,5 %);
- nerešpektujte limit: 0,5-násobok plochy hlavného píku na chromatograme porovnávacieho roztoku (b) (0,05 %).
Ťažké kovy (2.4.8): maximálne 20 ppm.
1,0 g vyhovuje skúške C. Pripravte referenčný roztok s použitím 2 ml štandardného roztoku olova (10 ppm Pb) R.
Strata sušením (2.2.32): maximálne 1,0 %, stanovená na 1,000 g sušením v sušiarni pri 105 °C.
Síranový popol (2.4.14): najviac 0,1 %, stanovené na 1,0 g.
STANOVENIE
0,350 g sa rozpustí v 50 ml etanolu (96 %) R, vopred neutralizovaného na 0,2 ml fenolftaleínu roztoku R. Pridá sa 50 ml vody R a titruje sa hydroxidom sodným 0,1 M, kým sa nedosiahne ružové sfarbenie.
1 ml 0,1 M hydroxidu sodného zodpovedá 39,26 mg C24H40O4.
NEČISTOTY
Špecifikované nečistoty: A, C.
Iné zistiteľné nečistoty (nasledujúce látky, ak sú prítomné na dostatočnej úrovni, by sa dali zistiť jedným alebo druhým testom v monografii. Sú obmedzené všeobecným kritériom prijatia pre iné/nešpecifikované nečistoty a/alebo všeobecnou monografiou Látky na farmaceutické použitie (2034). Preto nie je potrebné identifikovať tieto nečistoty na preukázanie zhody. Pozri tiež 5.10.
Kontrola nečistôt v látkach na farmaceutické použitie: B, D, E, F, G, H, I.
A. Kyselina 3a,7a-dihydroxy-5p-cholán-24-ová (kyselina chenodeoxycholová),
B. Kyselina 3a,7a,12a-trihydroxy-5p-cholán-24-ová (kyselina cholová),
C. kyselina 3α-hydroxy-5β-cholán-24-ová (kyselina litocholová),
D. kyselina 3a,7p,12a-trihydroxy-5p-cholán-24-ová (kyselina ursocholová),
E. kyselina 3a,12a-dihydroxy-5p-cholán-24-ová (kyselina deoxycholová),
F. kyselina 3a-hydroxy-7-oxo-5p-cholán-24-ová,
G. metyl-3a,7p-dihydroxy-5p-cholán-24-oát,
H. kyselina 3p,7p-dihydroxy-5p-cholán-24-ová,
I. 5p-cholán-3a,7p,24-triol.