Čistost zdravila za hujšanje Orlistat CAS 96829-58-2 API 98,0~101,5 %

Orlistat
C29H53NO5 495,73
l-levcin, N-formil-, 1-[(3-heksil-4-okso-2-oksetanil)metil]dodecil ester, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-formil-l-levcin, ester z (3S,4S)-3-heksil-4-[(2S)-2-hidroksitridecil]-2-oksetanonom [96829-58-2].
OPREDELITEV
Orlistat vsebuje NLT 98,0 % in NMT 101,5 % C29H53NO5, računano na brezvodno osnovo brez topil.
IDENTIFIKACIJA
• A. Infrardeča absorpcija <197M>
• B. Retencijski čas glavnega vrha raztopine vzorca ustreza tistemu standardne raztopine, kot je dobljen s preizkusom.
ESEJ
• Postopek
[Opomba – Izogibajte se uporabi plastičnih bučk za pripravo ali zadrževanje katere koli raztopine v tej analizi.]
Mobilna faza: acetonitril, fosforjeva kislina in voda (860:0,05:140)
Standardna raztopina: 0,5 mg/ml USP Orlistata RS v mobilni fazi.Injicirajte takoj po pripravi ali shranite pri 5.
Raztopina vzorca: 0,5 mg/ml orlistata v mobilni fazi.Injicirajte takoj po pripravi ali shranite pri 5.
Kromatografski sistem
(Glejte Kromatografija <621>, Primernost sistema.)
Način: LC
Detektor: UV 195
Stolpec: 3,9 mm × 15 cm;4-µm pakiranje L1
Hitrost pretoka: 1,0 ml/min
Velikost injekcije: 20 µL
Sistemska primernost
Vzorec: Standardna raztopina
Zahteve glede primernosti
Relativni standardni odklon: NMT 2,0 %
Analiza
Vzorci: standardna raztopina in raztopina vzorca
Izračunajte odstotek orlistata (C29H53NO5) v odvzetem deležu orlistata:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = največji odziv raztopine vzorca
rS = največji odziv standardne raztopine
CS = koncentracija USP orlistata RS v standardni raztopini (mg/ml)
CU = koncentracija orlistata v raztopini vzorca (mg/ml)
Merila sprejemljivosti: 98,0 %-101,5 % na brezvodno osnovo brez topil
NEČISTOČE
Anorganske nečistoče
• Ostanek pri žarenju <281>: NMT 0,1 %
• Težke kovine, metoda II <231>: 20 ppm
Organske nečistoče
• Postopek 1: Omejitev orlistatu sorodne spojine A
Standardna raztopina: 0,1 mg/ml USP orlistatu sorodne spojine A RS v acetonu
Raztopina vzorca: 50 mg/ml orlistata v acetonu
Kromatografski sistem
(Glejte Kromatografija <621>, Tankoplastna kromatografija.)
Način: TLC
Adsorbent: 0,25 mm plast kromatografske mešanice silikagela
Prostornina nanosa: 10 µL
Sistem topil za razvijanje: toluen in etil acetat (4:1)
Raztopina za detekcijo: Prenesite 2,5 g fosfomolibdne kisline in 1 g cerijevega sulfata v 100 ml merilno bučko, raztopite in razredčite z metanolom do prostornine.
Analiza
Vzorci: standardna raztopina in raztopina vzorca
Odstranite ploščo in jo temeljito posušite na zraku.Posušeno ploščo poškropite z raztopino za odkrivanje in postavite ploščo v pečico pri 120 °C za 30 minut.
Merila sprejemljivosti: Kateri koli sekundarni madež iz raztopine vzorca, ki ustreza orlistatu sorodni spojini A, ni intenzivnejši od ustreznega madeža iz standardne raztopine (0,2 %).
• Postopek 2: Omejitev orlistatu sorodne spojine B
Standardna raztopina: 0,025 mg/ml USP orlistatu sorodne spojine B RS v metilen kloridu
Raztopina vzorca: 50 mg/ml orlistata v metilen kloridu
Raztopina vzorca z dodatkom: 50 mg/ml orlistata v standardni raztopini
Kromatografski sistem
(Glejte Kromatografija <621>, Primernost sistema.)
Način: GC
Detektor: Plamenska ionizacija
Kolona: 0,32 mm x 30 m taljen silicijev dioksid, prevlečen z 0,25 µm stacionarne faze G27
Temperatura kolone: ​​glejte spodnjo tabelo temperaturnih programov.
Začetna temperatura () Temperaturna rampa (/min) Končna temperatura () Čas zadrževanja pri končni temperaturi (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatura
Injektor: 270
Detektor: 280
Nosilni plin: Helij
Hitrost pretoka: 30 ml/min
Razmerje delitve: 10:1
Velikost injekcije: 2 µL
Sistemska primernost
Vzorec: Standardna raztopina
Zahteve glede primernosti
Relativni standardni odklon: NMT 10,0 %
Analiza
Vzorci: raztopina vzorca in raztopina vzorca z dodatkom
Izračunajte odstotek orlistatu sorodne spojine B v odvzetem deležu orlistata:
Rezultat = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = največji odziv orlistatu sorodne spojine B iz raztopine vzorca
rSP = največji odziv spojine B, povezane z orlistatom, iz raztopine vzorca z dodatkom
CS = koncentracija USP orlistatu sorodne spojine B RS v standardni raztopini (mg/ml)
CT = koncentracija orlistata v raztopini vzorca z dodatkom (mg/ml)
Merila sprejemljivosti: Najdeno je NMT 0,05 % orlistatu sorodne spojine B.
• 3. postopek
[Opomba – Izogibajte se uporabi plastičnih bučk za pripravo ali zadrževanje katere koli raztopine v tej analizi.]
Mobilna faza, standardna raztopina in raztopina vzorca: Pripravite, kot je navedeno v preizkusu.
Rešitev za primernost sistema: 10 µg/ml USP orlistata RS, 0,1 µg/ml USP orlistatu sorodne spojine C RS in 0,25 µg/ml USP orlistatu sorodne spojine D RS v mobilni fazi
Kromatografski sistem
(Glejte Kromatografija <621>, Primernost sistema.)
Nadaljujte po navodilih v preizkusu, razen za kromatografijo raztopine za ustreznost sistema.
Sistemska primernost
Primer: Rešitev ustreznosti sistema
Zahteve glede primernosti
Razmerje med signalom in šumom: NLT 3 za vrhove spojine C, povezane z orlistatom, in spojine D, povezane z orlistatom
Relativni standardni odklon: NMT 10,0 % za vrh orlistata
Analiza
Vzorci: standardna raztopina in raztopina vzorca
Izračunajte odstotek vsake nečistoče v odvzetem deležu orlistata:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = največji odziv za vsako posamezno nečistoto iz raztopine vzorca
rS = največji odziv USP orlistata RS iz standardne raztopine
CS = koncentracija USP orlistata RS v standardni raztopini (mg/ml)
CU = koncentracija orlistata v raztopini vzorca (mg/ml)
F = relativni odzivni faktor, kot je podan v tabeli nečistoč 1
Merila sprejemljivosti: Glej tabelo nečistoč 1.
Tabela nečistoč 1
Ime Relativni retencijski čas Relativni odziv Faktor Merila sprejemljivosti, NMT (%)
Formyleucinea 0,10 4,0 0,2
Orlistatu sorodna spojina C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerb z odprtim obročem 0,44 1,0 0,2
Orlistatu sorodna spojina D* 0,90 – izračunano v
Postopek 4
Orlistat amidek z odprtim obročem* 0,90 – izračunano v
Postopek 4
Orlistat 1,00 - -
d-levcin orlistat 1,18 1,0 0,2
Posamezna neidentificirana nečistoča - 1,0 0,1
* Koeluti v tem sistemu LC, določeni s postopkom 4.
N-formil-l-levcin.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formilamino-4-metil-pentanoiloksi]-2-heksil-3-hidroksi-heksadekanojska kislina.
c N-formil-1-levcin (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroksi-3-[1-fenil-R-etilkarbomoil]nonil]-dodecil ester.
d N-formil-d-levcin (S)-1-[[(2S,3S)-3-heksil-4-okso-2-oksetanil]metil]dodecil ester ali enantiomer.
• Postopek 4: Omejitev orlistatu sorodne spojine D
Mobilna faza: metanol in voda (83:17)
Raztopina za primernost sistema: 4 mg/ml USP orlistata RS oziroma 2,4 µg/ml USP orlistatu povezane spojine D RS v acetonitrilu
Standardna raztopina: 5,0 mg/ml USP Orlistata RS v acetonitrilu
Raztopina vzorca: 5,0 mg/ml orlistata v acetonitrilu
Kromatografski sistem
(Glejte kromatografijo 621, sistemska primernost.)
Način: LC
Detektor: 205 nm
Stolpec: 4,0 mm × 25 cm;5-µm pakiranje L7
Hitrost pretoka: 0,6 ml/min
Velikost injekcije: 20 µL
Sistemska primernost
Primer: Rešitev ustreznosti sistema
Zahteve glede primernosti
Razmerje med signalom in šumom: NLT 3 za vrh spojine D, povezane z orlistatom
Relativni standardni odklon: NMT 10,0 % za vrh orlistata
Analiza
Vzorci: standardna raztopina in raztopina vzorca
Izračunajte odstotek vsake nečistoče v odvzetem deležu orlistata:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = največji odziv za vsako posamezno nečistoto iz raztopine vzorca
rS = največji odziv za USP Orlistat RS iz standardne raztopine
CS = koncentracija USP Orlistata RS v standardni raztopini (µg/mL)
CU = koncentracija orlistata v raztopini vzorca (µg/mL)
F = relativni odzivni faktor, kot je dobljen v tabeli nečistoč 2
Merila sprejemljivosti: Glej tabelo nečistoč 2.
Tabela nečistoč 2
Ime Relativni retencijski čas Relativni odziv Faktor Merila sprejemljivosti, NMT (%)
Orlistatu sorodna spojina D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1,00 - -
Orlistat amide z odprtim obročem 1,25 4,3 0,1
N-formil-1-levcin (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroksi-3-[1-fenil-R-etilkarbomoil]nonil]-dodecil ester.
• Postopek 5: Omejitev orlistatu sorodne spojine E
Pufer: 0,4 N raztopina borata, naravnana na pH 10,2
Derivitizirajoče sredstvo: raztopina o-ftaldehida (OPA).[Opomba – Če ga ni mogoče dobiti komercialno, se lahko derivitizirajoče sredstvo pripravi kot 1 % 3-merkaptopropionske kisline in o-ftaldialdehida v 0,4 M raztopini boratnega pufra.]
Raztopina A: Prenesite 4,1 g natrijevega acetata trihidrata in 40 mg etilendiamintetraocetne kisline (EDTA) v 1-L merilno bučko.Raztopite v 950 ml vode in z 0,1 N natrijevim hidroksidom naravnajte pH na 7,2.Razredčimo z vodo do volumna, dodamo 2,5 ml tetrahidrofurana in premešamo.Filtrirajte in razplinite.
Raztopina B: Prenesite 2,7 g natrijevega acetata trihidrata in 40 mg EDTA v 1-L merilno bučko.Raztopite v 200 ml vode in z 0,1 N natrijevim hidroksidom naravnajte pH na 7,2.Dodamo 800 mL acetonitrila, filtriramo in razplinimo.
Mobilna faza: glejte spodnjo tabelo gradientov.
Čas (min) Raztopina A (%) Raztopina B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3.3
Standardna raztopina: Prenesite stehtano količino približno 0,2 mg spojine E RS, povezane z orlistatom USP, v 20-ml vialo s prostornino glave.Dodajte 10 ml 4 N natrijevega hidroksida in zaprite vialo.Vialo segrevajte na 100 °C 1 uro, nato pustite, da se ohladi na sobno temperaturo.2 mL dobljene raztopine prenesite v 50-mL merilno bučko in razredčite z vodo na prostornino.0,5 mL te raztopine dodajte 2,0 mL pufra in 0,5 mL derivatizacijskega sredstva.
Raztopina vzorca: Nadaljujte po navodilih za standardno raztopino, vendar namesto tega uporabite 25 mg orlistata, da nadomestite 0,2 mg USP orlistatu sorodne spojine E RS.
Kromatografski sistem
(Glejte Kromatografija <621>, Primernost sistema.)
Način: LC
Detektor: Fluorescenca 340 nm (vzbujanje);450 nm (emisija)
Stolpci
Zaščita: 2,1 mm × 2 cm;50-µm pakiranje L1
Analitično: 2,1 mm × 20 cm;pakiranje L1
Hitrost pretoka: 0,5 ml/min
Velikost injekcije: 20 µL
Sistemska primernost
Vzorec: Standardna raztopina
Zahteve glede primernosti
Relativni standardni odklon: NMT 6,0 % za vrh spojine E, povezane z orlistatom
Analiza
Vzorci: standardna raztopina in raztopina vzorca
Izračunajte odstotek te nečistoče v odvzetem deležu orlistata:
Rezultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = največji odziv za spojino E, povezano z orlistatom, v raztopini vzorca
rS = najvišji odziv za spojino, povezano z orlistatom USP, E RS v standardni raztopini
CS = koncentracija USP orlistatu sorodne spojine E RS v standardni raztopini (mg/mL)
CU = koncentracija orlistata v raztopini vzorca (mg/ml)
Merila sprejemljivosti
Posamezne nečistoče: najdemo NMT 0,2 % orlistatu sorodne spojine E.
Skupne nečistoče: Najdeno je NMT 1,0 % skupnih nečistoč, rezultati za postopke 1, 2, 3, 4 in 5 pa se dodajo.
POSEBNI TESTI
• Optična rotacija, specifična rotacija <781>
Raztopina vzorca: 30 mg/mL v dehidriranem alkoholu
Merila sprejemljivosti: med -48,0 in -51,0, pri 20
• Določanje vode, metoda Ic <921>: NMT 0,2 %
DODATNE ZAHTEVE
• Pakiranje in skladiščenje: Hraniti v dobro zaprtih posodah med 2 in 8 ℃.
• Referenčni standardi USP <11>
USP Orlistat RS
USP orlistatu sorodna spojina A RS
USP orlistatu sorodna spojina B RS
USP orlistatu sorodna spojina C RS
USP orlistatu sorodna spojina D RS
USP orlistatu sorodna spojina E RS
USP35