Ursodeoksiholna kislina (UDCA) CAS 128-13-2 Test 99,0~101,0%

URSODEKSIHOLNA KISLINA
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
OPREDELITEV
3α,7β-dihidroksi-5β-holan-24-ojska kislina.
Vsebnost: 99,0 % do 101,0 % (posušena snov).
LIKI
Videz: bel ali skoraj bel prah.
Topnost: praktično netopen v vodi, dobro topen v etanolu (96 odstotkov), rahlo topen v acetonu, praktično netopen v metilen kloridu.
mp: približno 202 ℃.
IDENTIFIKACIJA
Prva identifikacija: A.
Druga identifikacija: B, C.
A. Infrardeča absorpcijska spektrofotometrija (2.2.24).
Primerjava: ursodeoksiholna kislina CRS.
B. Preglejte kromatograme, dobljene pri preskusu nečistoče C.
Rezultati: glavna lisa v kromatogramu, dobljenem s preskusno raztopino (b), je po položaju, barvi in ​​velikosti podobna glavni lisi v kromatogramu, dobljeni z referenčno raztopino (a).
C. Približno 10 mg raztopite v 1 ml žveplove kisline R. Dodajte 0,1 ml raztopine formaldehida R in pustite stati 5 min.Dodamo 5 mL vode R. Dobljena suspenzija je zelenomodra.
TESTI
Specifična optična rotacija (2.2.7): + 58,0 do + 62,0 (posušena snov).
0,500 g raztopimo v brezvodnem etanolu R in z istim topilom razredčimo na 25,0 ml.
Nečistoča C. Tankoplastna kromatografija (2.2.27).
Mešanica topil: voda R, aceton R (10:90 V/V).
Preskusna raztopina (a).0,40 g snovi, ki jo je treba preiskati, raztopite v mešanici topil in z mešanico topil razredčite na 10 ml.
Preskusna raztopina (b).Razredčite 1 ml preskusne raztopine (a) na 10 ml z mešanico topil.
Referenčna raztopina (a).Raztopite 40 mg ursodeoksiholne kisline CRS v mešanici topil in razredčite do 10 ml z mešanico topil.
Referenčna raztopina (b).Raztopite 20 mg litoholne kisline CRS (nečistoča C) v mešanici topil in razredčite na 10,0 ml z mešanico topil (raztopina A).Razredčite 2,0 ml te raztopine na 100,0 ml z mešanico topil.
Referenčna raztopina (c).V 5 mL raztopine A dodamo 10 mg kenodeoksiholne kisline CRS (nečistoča A) in razredčimo do 50 mL z mešanico topil.
Plošča: TLC silikagelna plošča R.
Mobilna faza: ledocetna kislina R, aceton R, metilenklorid R (1:30:60 V/V/V).
Uporaba: 5μL.
Razvitost: nad 2/3 plošče.
Sušenje: pri 120℃ 10 min.
Detekcija: takoj poškropimo s 47,6 g/L raztopino fosfomolibdne kisline R v mešanici 1 volumna žveplove kisline R in 20 volumnov ledocetne kisline R in segrevamo pri 120 ℃, dokler se na svetlejši podlagi ne pojavijo modri madeži.
Primernost sistema: referenčna rešitev (c):
- kromatogram kaže 2 jasno ločeni glavni lisi.
Meja: preskusna raztopina (a):
-nečistoča C: nobena lisa zaradi nečistoče C ni bolj intenzivna od glavne pege v kromatogramu, dobljenem z referenčno raztopino (b) (0,1 odstotka).
Sorodne snovi.Tekočinska kromatografija (2.2.29).
Mešanica topil: metanol R, mobilna faza (10:90 V/V).
Testna rešitev.Raztopite 60 mg snovi, ki jo želite preiskati, v mešanici topil in razredčite na 20,0 ml z mešanico topil.
Referenčna raztopina (a).Vsebino viale ursodeoksiholne kisline za sistemsko ustreznost CRS (ki vsebuje nečistoti A in H) raztopite v 1,0 ml mešanice topil.
Referenčna raztopina (b).Razredčite 1,0 ml preskusne raztopine na 100,0 ml z mešanico topil.Razredčite 1,0 ml te raztopine na 10,0 ml z mešanico topil.
Stolpec:
-mer: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stacionarna faza: oktadecilsilil silikagel s koncem zaprtim zakromatografija R (5 μm);
- temperatura: 40 ℃ ± 1 ℃.
Mobilna faza: zmešamo 30 vol. acetonitrila R, 37 vol. 0,78 g/L raztopine natrijevega dihidrogenfosfata R, naravnanega na pH 3 s fosforno kislino R, in 40 vol. metanola R.
Hitrost pretoka: 0,8 ml/min.
Zaznavanje: refraktometer pri 35 ± 1 ℃.
Injekcija: 150 μL.
Čas delovanja: 4-krat daljši od retencijskega časa ursodeoksiholne kisline.
Identifikacija nečistoč: uporabite kromatogram, priložen ursodeoksiholni kislini, za primernost sistema CRS in kromatogram, dobljen z referenčno raztopino (a), da identificirate vrhove zaradi nečistoč A in H.
Relativna retencija glede na ursodeoksiholno kislino (retenzijski čas = okoli 14 min): nečistoča H = okoli 0,9;nečistoča A = približno 2,8.
Primernost sistema: referenčna rešitev (a):
-ločljivost: najmanj 1,5 med vrhovi zaradi nečistoče H in ursodeoksiholne kisline.
Omejitve:
- nečistoča A: ne več kot 10-kratna površina glavnega vrha v kromatogramu, dobljenem z referenčno raztopino (b) (1,0 odstotka);
- nespecificirane nečistoče: za vsako nečistoto ne več kot površina glavnega vrha v kromatogramu, dobljenem z referenčno raztopino (b) (0,10 odstotka);
- skupno: ne več kot 15-kratna površina glavnega vrha v kromatogramu, pridobljenem z referenčno raztopino (b) (1,5 odstotka);
-meja neupoštevanja: 0,5-kratna površina glavnega vrha v kromatogramu, dobljenem z referenčno raztopino (b) (0,05 odstotka).
Težke kovine (2.4.8): največ 20 ppm.
1,0 g ustreza preskusu C. Pripravite referenčno raztopino z 2 mL standardne raztopine svinca (10 ppm Pb) R.
Izguba pri sušenju (2.2.32): največ 1,0 %, določeno na 1.000 g s sušenjem v sušilniku pri 105 °C.
Sulfatni pepel (2.4.14): največ 0,1 %, določeno na 1,0 g.
ESEJ
0,350 g raztopimo v 50 mL etanola (96 %) R, ki smo ga predhodno nevtralizirali na 0,2 mL raztopine fenolftaleina R. Dodamo 50 mL vode R in titriramo z 0,1 M natrijevim hidroksidom, dokler se ne obarva rožnato.
1 ml 0,1 M natrijevega hidroksida ustreza 39,26 mg C24H40O4.
NEČISTOČE
Specificirane nečistoče: A, C.
Druge zaznavne nečistoče (naslednje snovi bi bile, če bi bile prisotne v zadostni količini, zaznane z enim ali drugim testom v monografiji. Omejene so s splošnim merilom sprejemljivosti za druge/nedoločene nečistoče in/ali s splošno monografijo Snovi za farmacevtsko uporabo (2034).Zato ni treba identificirati teh nečistot za dokazovanje skladnosti.Glej tudi 5.10.
Kontrola nečistoč v snoveh za farmacevtsko uporabo): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihidroksi-5β-holan-24-ojska kislina (kenodeoksiholna kislina),
B. 3α,7α,12α-trihidroksi-5β-holan-24-ojska kislina (holna kislina),
C. 3α-hidroksi-5β-holan-24-ojska kislina (litoholna kislina),
D. 3α,7β,12α-trihidroksi-5β-holan-24-ojska kislina (ursoholna kislina),
E. 3α,12α-dihidroksi-5β-holan-24-ojska kislina (dezoksiholna kislina),
F. 3α-hidroksi-7-okso-5β-holan-24-ojska kislina,
G. metil 3α,7β-dihidroksi-5β-holan-24-oat,
H. 3β,7β-dihidroksi-5β-holan-24-ojska kislina,
I. 5β-holan-3α,7β,24-triol.