L-4-Nitrofenilalanine Metil Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Analiza >98.5% (HPLC) Fabrika

Metoda e Analizës së L-4-Nitrofenilalaninës Metil Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Përshkrimi: Vendosni rreth 2 g mostër në një enë petri të pastër dhe të thatë dhe vëzhgoni pamjen e mostrës.Raportimi: Raportoni vëzhgimin
Identifikimi: Krahasoni kohën e mbajtjes së pikut kryesor në kromatogramin e përgatitjes së provës me kohën e mbajtjes së pikut kryesor në kromatogramin e përgatitjes së përshtatshmërisë së sistemit siç është marrë në pastërtinë kromatografike me HPLC.
Humbja gjatë tharjes: Thajeni një shishe me tapë xhami dhe me peshë të cekët në 105±2℃ për 30 minuta.Lëreni të ftohet në temperaturën e dhomës në një tharëse.Peshoni me saktësi shishen e peshimit me tapë dhe shënoni peshën (W1).Transferoni rreth 1 deri në 2 g sasi të peshuar saktë të substancës së provës në shishen e peshimit.Me tundje të butë, anash, shpërndajeni kampionin e provës sa më shumë të jetë e mundur në një thellësi prej rreth 5 mm.Peshoni shishen e peshimit të ngarkuar dhe regjistroni peshën (W2).Vendoseni shishen e mbushur në furrën e tharjes, duke hequr tapën dhe duke e lënë gjithashtu në dhomë.Thani mostrën e provës në 105±2℃ për 3 orë.Me hapjen e dhomës, mbylleni shishen menjëherë dhe lëreni të vijë në temperaturën e dhomës në një tharëse.Peshoni me saktësi shishen e peshimit me tapë dhe shënoni peshën (W3).Llogaritni humbjen në përqindje gjatë tharjes së mostrës duke përdorur formulën e mëposhtme:
Llogaritja Humbja gjatë tharjes (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Përmbajtja e enantiomerit nga HPLC:
Kimikat dhe reagentët:
Klasa n-Heksan AR
Klasa e metanolit HPLC
Izopropil Alkooli HPLC i shkallës
Klasa e dietilaminës AR
Standardet: L-4-Nitrofenilalanine Metil Ester HCl standard;L-4-Nitrofenilalanine Metil Ester HCl Enantiomer standard
Faza e lëvizshme: Përgatitni një përzierje homogjene të n-Heksanit, Alkoolit Izopropil, Metanolit dhe Dietilaminës (65:20:15:0.1 v/v/v/v)
Përgatitja e zbrazët: Transferoni 2,5 ml metanol në një balonë vëllimore 10 ml, holloni në vëllim me fazën e lëvizshme dhe përzieni.
Përgatitja e përshtatshmërisë së sistemit:
Peshoni me saktësi dhe transferoni rreth 5 mg secili prej standardit L-4-Nitrofenilalanine Metil Ester HCl dhe L-4-Nitrofenilalaninës Methyl Ester HCl enantiomer në një balonë vëllimore 10 ml, shpërndahet në rreth 2,5 ml metanol, hollohet në vëllim me celular. fazë dhe përzierje.
Përgatitja e testit:
Peshoni me saktësi dhe transferoni rreth 5 mg kampion në një balonë vëllimore 10 mol, shpërndajeni në rreth 2,5 ml metanol, holloni në vëllim me fazën lëvizëse dhe përzieni.
Parametrat instrumental:
Instrumenti: HPLC i pajisur me injektor, pompë, detektor UV dhe Regjistrues
Kolona: ChiralPak-IC (4,6mm x 250mm) 5 μ ose ekuivalente
Shpejtësia e rrjedhjes: 1,0 ml/minutë
Gjatësia e valës: 260 nm
Vëllimi i injektimit: 10 μL
Temperatura e bashkimit të kolonës: 25℃
Koha e ekzekutimit: 20 minuta
Procedura
Injektoni tretësirat siç përmendet në sekuencën vijuese.Regjistroni kromatogramet dhe konfirmoni kriteret:
Përshkrimi i injeksioneve Numri i kritereve të injeksioneve
Përgatitja e zbrazët 1 Asnjë kulm ndërhyrës nuk duhet të vërehet në kohën e mbajtjes së L-4-Nitrofenilalaninës Metil Ester HCl ose enantiomerit.
Përgatitja e përshtatshmërisë së sistemit 1 Rezolucioni ndërmjet L-4-Nitrofenilalaninës Metil Ester HCl dhe pikut të enantiomerit duhet të jetë jo më pak se 2.0
Përgatitja e testit 1 Përdorni kromatogramin e provës për të përcaktuar përmbajtjen e enantiomerit në mostër.
Kohët relative të mbajtjes:
L-4-Nitrofenilalaninë Metil Ester HCl 1.0
Enantiomer Rreth 1.11
Koha e mbajtjes së L-4-Nitrofenilalaninës Metil Ester HCl është rreth 9.8 minuta.
Llogaritja: Në kromatogramin e marrë nga përgatitja e testit, shpërfillni të gjitha majat që presin L-4-Nitrofenilalaninë Metil Ester HCl dhe Enantiomer.Raportoni përmbajtjen e enantiomerit në kampion sipas metodës së normalizimit të zonës.
Pastërtia dhe papastërtitë kromatografike nga HPLC:
Kimikat dhe reagentët:
Klasa AR e fosfatit të diamonit
Klasa e acidit fosforik AR
Klasa e metanolit HPLC
Uji i pastruar
Standardet
L-4-Nitrofenilalanine Metil Ester HCl standard
Standardi i 4-Nitro-L-Fenilalaninës monohidrat
Mobile Faza-A
Në 1000 ml ujë të pastruar shpërndahen 6,6 g fosfat diamoni.Rregulloni pH-në e kësaj tretësire në 6.0 me acid fosforik.Filtroni dhe degazoni.Përpara se të matni pH-në e tretësirës, ​​kalibroni pH matësin me tretësirë ​​standarde tampon pH 4,01 DHE 7,00.
Mobile Faza-B
Klasa e metanolit HPLC
Përgatitja e Përshtatshmërisë së Sistemit
Peshoni me saktësi dhe transferoni rreth 25 mg secili prej standardeve L-4-Nitrofenilalanine Metil Ester HCl dhe 4-Nitro-L-Fenilalaninës monohidrat standarde në një balonë vëllimore 50 ml, shpërndajeni dhe holloni në vëllim me metanol dhe përzieni.
Përgatitja e testit:
Peshoni me saktësi dhe transferoni rreth 25 mg mostër në një balonë vëllimore 50 ml, shpërndajeni dhe holloni në vëllim me metanol dhe përzieni.
Parametrat instrumental:
Instrumenti: HPLC i pajisur me injektor, pompë, detektor UV dhe Regjistrues
Kolona: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ ose ekuivalente
Shpejtësia e rrjedhjes: 1,0 ml/minutë
Gjatësia e valës: 265 nm
Vëllimi i injektimit: 20 μL
Temperatura e bashkimit të kolonës: 25℃
Koha e ekzekutimit: 45 minuta
Programi i gradientit
Koha (min) Faza Mobile-A % Faza Mobile-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Procedura:
Injektoni tretësirat siç përmendet në sekuencën vijuese.Regjistroni kromatogramet dhe konfirmoni kriteret:
Përgatitja e zbrazët 1 Asnjë kulm ndërhyrës nuk duhet të vërehet në kohën e mbajtjes së L-4-Nitrofenilalaninës Metil Ester HCl.
Përgatitja e përshtatshmërisë së sistemit 1 Faktori i fundit për L-4-Nitrofenilalaninë Metil Ester HCl piku duhet të jetë jo më pak se 2.0
Përgatitja e provës 1 Përdorni kromatogramin e provës për të përcaktuar pastërtinë kromatografike dhe papastërtitë.
Kohët relative të mbajtjes:
L-4-Nitrofenilalaninë Metil Ester HCl 1.0 (koha e mbajtjes rreth 11.4 minuta)
4-Nitro-L-Fenilalaninë Rreth 0,4
Tolueni Rreth 2.3
Llogaritjet:
Në kromatogramin e marrë nga përgatitja e provës, pas korrigjimit të boshllëkut, shpërfillni pikun për shkak të toluenit.Raportoni pastërtinë kromatografike, përmbajtjen e 4-Nitro-L-fenilalaninës dhe papastërtitë totale në kampion sipas metodës së normalizimit të sipërfaqes.