Analiza e paklitakselit (Taxol) CAS 33069-62-4 (HPLC) 97,0~102,0%

Paklitaksel
C47H51NO14 853.91
Acidi benzenepropanoik, -(benzoilamino)--hidroksi-, 6,12b-bis(acetiloksi)-12-(benzoiloksi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahidro-4,11-dihidroksi-4a,8,13,13-tetrametil-5-okso-7,11-metano-1H-ciklodeka[3,4]benz[1,2-b]okset-9-il ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodekahidro-4,6, 9,11,12,12b-hekzahidroksi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciklodeka[3,4]-benz[1,2-b]okset-5-one 6, 12b-diacetat, 12-benzoat, 9-ester me (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilizoserinë [33069-62-4].
Paklitaksel përmban jo më pak se 97,0 për qind dhe jo më shumë se 102,0 për qind të C47H51NO14, e llogaritur në bazë anhidër, pa tretës.
[Kujdes-Paclitaxel është citotoksik.Duhet treguar shumë kujdes për të parandaluar thithjen e grimcave të Paclitaxel dhe ekspozimin e lëkurës ndaj tij.]
Paketimi dhe ruajtja - Ruani në kontejnerë të ngushtë, rezistente ndaj dritës dhe ruani në temperaturë të kontrolluar të dhomës.
Etiketimi-Etiketimi tregon llojin e procesit të përdorur për prodhimin e materialit dhe testin e komponimeve të ngjashme me të cilin materiali përputhet.
Standardet e referencës USP <11>-
USP Endotoksina RS
USP Paclitaxel RS Kliko për të parë strukturën
Përbërja A RS e lidhur me paklitakselin USP
Cefalomanina.
Komponimi B RS i lidhur me paklitakselin USP
10-Deacetil-7-Epipaklitaksel.
USP Paclitaxel Papastërti Mixture RS
Përzierje e Paclitaxel dhe përbërësve të mëposhtëm të lidhur: analog propil, cefalomaninë, sek-butil analog, analog n-butil, analog benzil, bakatin VI, analog pentil dhe 7-epipaclitaksel.
Identifikimi -
A: Absorbimi infra të kuqe <197K>.
B: Koha e mbajtjes së pikut kryesor në kromatogramin e përgatitjes së analizës korrespondon me atë në kromatogramin e preparatit Standard, siç është marrë në analizë.
Rrotullimi specifik 781S: midis 49.0 dhe 55.0 në 20, llogaritur në bazë anhidër, pa tretës.
Tretësira testuese: 10 mg për mL, në metanol.
Testet e numërimit të mikrobeve <61> dhe testet për mikroorganizmat e specifikuar <62>-Numri total i mikrobeve aerobike nuk i kalon 100 cfu për g.Ai plotëson kërkesat e testeve për mungesën e Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, specieve Salmonella dhe Escherichia coli.
Endotoksina bakteriale 85-Përmban jo më shumë se 0,4 USP Njësi Endotoksine për mg paklitaksel.
Uji, Metoda Ic <921>: jo më shumë se 4.0%.
Mbetjet në ndezje <281>: jo më shumë se 0,2%.
Metalet e rënda, Metoda II <231>: 0,002%.
Komponimet e ngjashme -
testi 1 (për materialin e etiketuar si të izoluar nga burimet natyrore)-Nëse materiali përputhet me këtë provë, etiketimi tregon se ai plotëson testin 1 të përbërjeve të lidhura me USP.
Diluent-Përgatiteni siç udhëzohet në analizë.
Tretësira A-Përgatitja e acetonitrilit të filtruar dhe të degazuar.
Zgjidhja B-Përgatitni ujë të filtruar dhe të degazuar.
Faza e lëvizshme - Përdorni përzierje të ndryshueshme të tretësirës A dhe tretësirës B siç udhëzohet për sistemin kromatografik.Bëni rregullime nëse është e nevojshme (shih Përshtatshmëria e sistemit nën Kromatografia 621).
Tretësirë ​​e përshtatshmërisë së sistemit - Shpërndani sasitë e peshuara me saktësi të Komponimit A RS të lidhur me USP Paclitaxel dhe Komponimit B RS të lidhur me USP Paclitaxel në metanol për të marrë një tretësirë ​​që ka përqendrime të njohura prej rreth 10 µg të secilit për mL.Transferoni 5,0 mL të kësaj solucioni në një balonë vëllimore 50 ml, holloni me Diluent deri në vëllim dhe përzieni.
Tretësirë ​​standarde - Shpërndani, me ndihmën e sonikacionit, një sasi të peshuar saktë të USP Paclitaxel RS në Diluent dhe holloni në mënyrë sasiore dhe hap pas hapi nëse është e nevojshme, me Diluent për të marrë një tretësirë ​​që ka një përqendrim të njohur prej rreth 5 µg për mL.
Zgjidhja e testit-Përdorni preparatin e analizës.
Sistemi kromatografik (shih Kromatografia <621>)-Kromatografi i lëngshëm është i pajisur me një detektor 227 nm dhe një kolonë 4,6 mm × 25 cm që përmban paketimin 5 μm L43.Shpejtësia e rrjedhës është rreth 2.6 ml në minutë.Temperatura e kolonës mbahet në 30. Kromatografi programohet si më poshtë.
Koha (minuta) Tretësira A (%) Tretësirë ​​B (%) Elucioni
0–35 35 65 isokratike
35–60 35®80 65®20 gradient linear
60–70 80®35 20®65 gradient linear
70–80 35 65 isokratikKromatografoni zgjidhjen e përshtatshmërisë së sistemit dhe regjistroni përgjigjet e pikut siç udhëzohet për Procedurën: kohët e mbajtjes relative janë rreth 0,78 për përbërjen A të lidhur me paklitakselin dhe 0,86 për përbërjen e lidhur me paklitakselin B (në raport me kohën e mbajtjes për paklitakselin e marrë nga zgjidhja e testit);dhe rezolucioni, R, ndërmjet përbërjes A të lidhur me paklitakselin dhe përbërjes B të lidhur me paklitakselin nuk është më pak se 1.0.Kromatografoni tretësirën standarde dhe regjistroni përgjigjet e pikut siç udhëzohet për Procedurën: devijimi standard relativ për injeksione të përsëritura nuk është më shumë se 2.0%.
Procedura-Injektoni një vëllim (rreth 15 µL) të tretësirës së provës në kromatograf, regjistroni kromatogramin dhe matni sipërfaqet për majat kryesore.Llogaritni përqindjen e secilës papastërti në pjesën e paklitakselit të marrë me formulën:
100 (e premte / rU)
në të cilin F është faktori relativ i përgjigjes për çdo kulm papastërtie (shih Tabelën 1 për vlerat);ri është zona e pikut për çdo papastërti individuale;dhe rU është zona e pikut për paklitaksel.
Tabela 1
Koha relative e mbajtjes Faktori relativ i përgjigjes (F) Kufiri i emrit (%)
0,24 1,29 Bakatina III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetilpaklitaksel 0,5
0,57 1,00 7-Xylosylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomaninë (përbërja A e lidhur me paklitakselin) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihidrocefalomaninë a21
0,86 1,00 10-Deacetil-7-epipaklitaksel (komponimi B i lidhur me paklitakselin) 0,5
1,10 1,00 Benzil analog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehidropaklitaksel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomanine 0,3
1,85 1,00 7-Epipaklitaksel 0,5
1 Rezolucioni mund të jetë i paplotë për këto maja, në varësi të sasive relative të pranishme;shuma e a1 dhe a2 nuk është më shumë se 0,5%.
2 Rezolucioni mund të jetë i paplotë për këto maja, në varësi të sasive relative të pranishme;shuma e b1 dhe b2 nuk është më shumë se 0,5%.
3 Emri i mëposhtëm kimik i është caktuar përbërjes përkatëse, analoge benzil: Bakatin III 13-ester me (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)acid propanoik.
Përveç mos tejkalimit të kufijve për papastërtitë e lidhura me paclitaxel në Tabelën 1, nuk gjendet më shumë se 0.1% e çdo papastërti tjetër të vetme;dhe nuk gjendet më shumë se 2.0% e papastërtive totale.
testi 2 (për materialin e etiketuar si të prodhuar nga një proces gjysmë sintetik) - Nëse materiali përputhet me këtë provë, etiketimi tregon se ai plotëson testin 2 të përbërjeve të lidhura me USP.
Diluent-Përdor acetonitril.
Zgjidhja A-Përdorni një përzierje të filtruar dhe të degazuar të ujit dhe acetonitrilit (3:2).
Zgjidhja B-Përdor acetonitril të filtruar dhe të degazuar.
Faza e lëvizshme - Përdorni përzierje të ndryshueshme të tretësirës A dhe tretësirës B siç udhëzohet për sistemin kromatografik.Bëni rregullime nëse është e nevojshme (shih Përshtatshmëria e sistemit nën Kromatografia 621).
Tretësirë ​​e përshtatshmërisë së sistemit - Shpërndani sasitë e peshuara me saktësi të USP Paclitaxel RS dhe USP Paclitaxel Related Compound B RS në tretës, duke tundur dhe sonikuar nëse është e nevojshme, për të marrë një zgjidhje me përqendrime të njohura përkatësisht rreth 0,96 mg dhe 0,008 mg për mL.
Tretësira e provës-Transferoni rreth 10 mg Paclitaxel, të peshuar me saktësi, në një balonë vëllimore 10 ml, shpërndajeni dhe holloni me Diluent deri në vëllim, tundeni dhe sonikoni nëse është e nevojshme dhe përzieni.
Sistemi kromatografik (shih Kromatografia 621) - Kromatografi i lëngshëm është i pajisur me një detektor 227 nm dhe një kolonë 4,6 mm × 15 cm që përmban paketimin L1 3 μm.Shpejtësia e rrjedhës është rreth 1.2 ml në minutë.Temperatura e kolonës mbahet në 35. Kromatografi programohet si më poshtë.
Koha (minuta) Tretësira A (%) Tretësirë ​​B (%) Elucioni
0-20 100 0 isokratike
20-60 100®10 0®90 gradient linear
60-62 10®100 90®0 gradient linear
62-70 100 0 isokratikKromatografoni zgjidhjen e përshtatshmërisë së Sistemit dhe regjistroni përgjigjet e pikut siç udhëzohet për Procedurën: kohët relative të mbajtjes janë rreth 0,94 për përbërjen B të lidhur me paklitakselin dhe 1,0 për paklitakselin;rezolucioni, R, ndërmjet përbërjes B të lidhur me paklitaksel dhe paklitakselit nuk është më pak se 1.2;dhe devijimi standard relativ për injeksione të përsëritura nuk është më shumë se 2.0%.
Procedura-Injektoni vëllime të barabarta (rreth 15 µL) të Diluentit dhe tretësirës së provës në kromatograf, regjistroni kromatogramet dhe matni sipërfaqet për të gjitha majat.Shpërfillni çdo kulm për shkak të Diluentit.Llogaritni përqindjen e secilës papastërti në pjesën e paklitakselit të marrë me formulën:
100 (e premte / rs)
në të cilin F është faktori relativ i përgjigjes për çdo papastërti (shih Tabelën 2 për vlerat);ri është zona e pikut për çdo papastërti të marrë nga tretësira e provës;dhe rs është shuma e sipërfaqeve të të gjitha majave të marra nga zgjidhja Test.
Tabela 2
Koha relative e mbajtjes Faktori relativ i përgjigjes (F) Kufiri i emrit (%)
0,11 1,24 10-Deacetilbakatin III 0,1
0,20 1,29 Bakatina III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradues2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetilpaklitaksel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaklitaksel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Unaza e oksetanit e hapur, acetil dhe benzoil migruan 2 x 1
0,921 1,00 10-Acetoacetilpaklitaksel x2
0,941 1,00 10-Deacetil-7-epipaklitaksel (komponimi B i lidhur me paklitaksel) x3
1,37 1,00 7-Epipaklitaksel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaklitaksel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paklitaksel 0,3
1 Rezolucioni mund të jetë i paplotë për këto maja, në varësi të sasive relative të pranishme;shuma e x1, x2 dhe x3 nuk është më shumë se 0.4%.
2 Emrat e mëposhtëm kimikë u janë caktuar komponimeve përkatëse Photodegradant;Unaza e oksetanit u hap, acetil dhe benzoil migruan;dhe 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradues
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloksi-5,13-dihidroksi-4,16,17,17-tetrametil-8-oksa- 3-okso-12-fenilkarboniloksipentakiklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
Unaza e oksetanit u hap, acetil dhe benzoil migruan
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloksi-1,2,4,7-tetrahidroksi-8,12,15,15-tetrametil-9-okso- 4-(fenilkarboniloksimetil)triciklo[9.3.1.03,8]pentadek-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
10,13-Zinxhiri i dyfishtë paklitaksel
Bakatina III 13-ester me (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)acid propanoik, 10-ester me (2S,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino ) acid propanoik
Përveç mos tejkalimit të kufijve për papastërtitë e lidhura me paclitaxel në Tabelën 2, nuk gjendet më shumë se 0.1% e çdo papastërti tjetër të vetme;dhe nuk gjendet më shumë se 2.0% e papastërtive totale.
testi 3 (për materialin e etiketuar si të prodhuar nga një proces fermentimi i qelizave bimore) - Nëse materiali përputhet me këtë provë, etiketimi tregon se ai plotëson Testin 3 të përbërjeve të lidhura me USP.
Zgjidhja A-Përgatitni një përzierje të filtruar dhe të degazuar të ujit dhe acetonitrilit (3:2).
Tretësira B-Përgatit acetonitrilin e filtruar dhe të degazuar.
Faza e lëvizshme - Përdorni përzierje të ndryshueshme të tretësirës A dhe tretësirës B siç udhëzohet për sistemin kromatografik.Bëni rregullime nëse është e nevojshme (shih Përshtatshmëria e sistemit nën Kromatografia 621).
Tretësirë ​​e përshtatshmërisë së sistemit - Shpërndani përzierjen e papastërtisë së paclitaxel USP RS në acetonitril, duke sonikuar nëse është e nevojshme, për të marrë një zgjidhje me një përqendrim të njohur prej rreth 1 mg për mL.
Tretësirë ​​standarde - Shpërndani një sasi të saktë të peshuar të USP Paclitaxel RS në acetonitril, duke sonikuar nëse është e nevojshme, për të marrë një zgjidhje me një përqendrim të njohur prej rreth 1 mg për mL.
Tretësira testuese-Transferoni rreth 10 mg Paclitaxel, të peshuar me saktësi, në një balonë vëllimore 10 ml.Treteni dhe holloni me acetonitril deri në vëllim, duke sonikuar nëse është e nevojshme dhe përzieni.
Sistemi kromatografik (shih Kromatografia 621) - Kromatografi i lëngshëm është i pajisur me një detektor 227 nm dhe një kolonë 4,6 mm × 15 cm që përmban paketimin L1 3 μm.Shpejtësia e rrjedhës është rreth 1.2 ml në minutë.Kromatografi programohet si më poshtë.
Koha (minuta) Tretësira A (%) Tretësirë ​​B (%) Elucioni
0-28 100 0 isokratike
28-33 100®98 0®2 gradient linear
33–58 98®10 2®90 gradient linear
58-60 10 90 isokratike
60-63 10®100 90®0 gradient linear
63-70 100 0 isokratikKromatografoni zgjidhjen e përshtatshmërisë së sistemit dhe regjistroni përgjigjet e pikut siç udhëzohet për Procedurën: rezolucioni, R, ndërmjet paklitakselit dhe analogut të benzilit nuk është më i vogël se 1,8.Kromatografoni tretësirën standarde dhe regjistroni përgjigjet e pikut siç udhëzohet për Procedurën: devijimi standard relativ për injeksione të përsëritura nuk është më shumë se 2.0%.[shënim—Për qëllimin e identifikimit të pikut, kohët e përafërta relative të mbajtjes janë dhënë në tabelën 3. Kohët e mbajtjes relative maten kundrejt paklitakselit.]
Tabela 3
Kufiri kohor i mbajtjes së emrit relativ (%)
Propil analog1 0,54 0,2
Cefalomanin (përbërja A e lidhur me paklitaksel) 0,76 0,5
sek-Butil analog2 0,81 0,2
n-Butil analog3 0,89 0,1
Benzil analog 1,10 0,4
Bakatina VI 1,23 0,2
Pentil analog4 1,31 0,2
7-Epipaklitaksel 1,51 0,4
1 Emri i mëposhtëm kimik i është caktuar përbërjes përkatëse analoge të propilit: Bakatin III 13-ester me (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroksi-3-fenilpropanoik acid.
2 Emri kimik i mëposhtëm i është caktuar përbërjes përkatëse sec-analogu i Butilit: Bakatin III 13-ester me (2R,3S)-2-hidroksi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanoik acid.
3 Emri kimik i mëposhtëm i është caktuar përbërjes përkatëse analoge n-Butil: Bakatin III 13-ester me (2S,3S)-2-hidroksi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanoik acid.
4 Emri i mëposhtëm kimik i është caktuar përbërjes përkatëse analoge Pentil: Bakatin III 13-ester me (2R,3S)-3-(heksanoilamino)-2-hidroksi-3-fenilpropanoik acid.
Procedura-Injektoni një vëllim (rreth 12 µL) të tretësirës së provës në kromatograf, regjistroni kromatogramin dhe matni sipërfaqet për të gjitha majat.Llogaritni përqindjen e secilës papastërti në pjesën e paklitakselit të marrë me formulën:
100 (ri / rU)
në të cilën ri është përgjigja e çdo papastërtie individuale;dhe rU është shuma e sipërfaqeve të të gjitha majave të marra nga tretësira Test.Përveç mos tejkalimit të kufijve për papastërtitë e lidhura me paclitaxel në Tabelën 3, nuk gjendet më shumë se 0.1% e çdo papastërti tjetër të vetme;dhe nuk gjendet më shumë se 2.0% e papastërtive totale.
analiza-
Diluent-Përgatitni një përzierje të metanolit dhe acidit acetik (200:1).
Faza e lëvizshme-Përgatitni një përzierje të filtruar dhe të degazuar të ujit dhe acetonitrilit (11:9).Bëni rregullime nëse është e nevojshme (shih Përshtatshmëria e sistemit nën Kromatografia 621).
Përgatitja standarde - Shpërndani, duke përdorur sonikacion nëse është e nevojshme, një sasi të peshuar saktë të USP Paclitaxel RS në Diluent dhe holloni në mënyrë sasiore dhe shkallë-shkallë nëse është e nevojshme, me Diluent për të përftuar një tretësirë ​​që ka një përqendrim të njohur prej rreth 1 mg për mL.
Përgatitja e analizës-Transferoni rreth 10 mg Paclitaxel, të peshuar me saktësi, në një balonë vëllimore 10 ml.Treteni në Diluent, duke përdorur sonikacion nëse është e nevojshme, holloni me Diluent deri në vëllim dhe përzieni.
Sistemi kromatografik (shih Kromatografia <621>)-Kromatografi i lëngshëm është i pajisur me një detektor 227 nm dhe një kolonë 4,6 mm × 25 cm që përmban paketimin 5 μm L43.Shpejtësia e rrjedhës është rreth 1.5 ml në minutë.Kromatografoni përgatitjen standarde dhe regjistroni përgjigjet e pikut siç udhëzohet për Procedurën: faktori i bishtit është midis 0.7 dhe 1.3;dhe devijimi standard relativ për injeksione të përsëritura nuk është më shumë se 1.5%.
Procedura-Injektoni vëllime të barabarta (rreth 10 µL) të preparatit Standard dhe të përgatitjes së analizës në kromatograf, regjistroni kromatogramet dhe matni sipërfaqet për majat kryesore.Llogaritni sasinë, në mg, të C47H51NO14 në pjesën e paklitakselit të marrë me formulën:
10C (rU / rS)
në të cilën C është përqendrimi, në mg për mL, i USP Paclitaxel RS në preparatin Standard;dhe rU dhe rS janë përgjigjet e pikut për paclitaxel të marra nga preparati i analizës dhe preparati Standard, respektivisht.