Analiza e Acidit Ursodeoksikolik (UDCA) CAS 128-13-2 99,0~101,0%

ACIDI URSODEOKSIKOLIK
C24H40O4 Mr 392.6[128-13-2]
PËRKUFIZIM
3α,7β-Dihidroksi-5β-kolan-24-oic acid.
Përmbajtja: 99,0 për qind deri në 101,0 për qind (substancë e tharë).
PERSONAZHET
Pamja: pluhur i bardhë ose pothuajse i bardhë.
Tretshmëria: praktikisht i patretshëm në ujë, lirisht i tretshëm në etanol (96 për qind), pak i tretshëm në aceton, praktikisht i pazgjidhshëm në klorur metilen.
mp: rreth 202 ℃.
IDENTIFIKIMI
Identifikimi i parë: A.
Identifikimi i dytë: B, C.
A. Spektrofotometria e përthithjes infra të kuqe (2.2.24).
Krahasimi: Acidi Ursodeoksikolik CRS.
B. Ekzaminoni kromatogramet e marra në test për papastërti C.
Rezultatet: pika kryesore në kromatogramin e marrë me tretësirën e provës (b) është e ngjashme në pozicion, ngjyrë dhe madhësi me pikën kryesore në kromatogramin e marrë me tretësirën referuese (a).
C. Tretni rreth 10 mg në 1 mL acid sulfurik R. Shtoni 0,1 mL tretësirë ​​formaldehidi R dhe lëreni të qëndrojë për 5 min.Shtoni 5 mL ujë R. Suspensioni i përftuar është i gjelbër-blu.
TESTET
Rrotullimi optik specifik (2.2.7): + 58.0 deri + 62.0 (substancë e tharë).
Shpërndani 0,500 g në etanol R anhidër dhe holloni në 25,0 mL me të njëjtin tretës.
Papastërti C. Kromatografia me shtresë të hollë (2.2.27).
Përzierje tretës: ujë R, aceton R (10:90 V/V).
Zgjidhja e provës (a).Shkrihet 0,40 g të substancës që do të ekzaminohet në përzierjen e tretësit dhe hollohet në 10 mL me përzierjen e tretësit.
Zgjidhja e provës (b).Holloni 1 mL tretësirë ​​testuese (a) në 10 mL me përzierjen e tretësit.
Zgjidhja referuese (a).Shpërndani 40 mg të acidit ursodeoksikolik CRS në përzierjen e tretësit dhe holloni në 10 mL me përzierjen e tretësit.
Zgjidhja e referencës (b).Shpërndani 20 mg acid litokolik CRS (papastërti C) në përzierjen e tretësit dhe holloni në 10,0 mL me përzierjen e tretësit (tretësira A).Holloni 2.0 mL të kësaj tretësire në 100.0 mL me përzierjen e tretësit.
Zgjidhja referuese (c).Në 5 mL tretësirë ​​A shtoni 10 mg acid kenodeoksikolik CRS (papastërti A) dhe holloni në 50 mL me përzierjen e tretësit.
Pllaka: Pllakë me xhel silicë TLC R.
Faza lëvizëse: acid acetik akullnajor R, aceton R, metileniklorur R (1:30:60 V/V/V).
Aplikimi: 5μL.
Zhvillimi: mbi 2/3 e pllakës.
Tharja: në 120℃ për 10 min.
Zbulimi: Spërkateni menjëherë me një tretësirë ​​47,6 g/L të acidit fosfomolibdik R në një përzierje prej 1 vëllimi të acidit sulfurik R dhe 20 vëllimeve të acidit acetik glacial R dhe ngroheni në 120℃ derisa njolla blu të shfaqen në një sfond më të lehtë.
Përshtatshmëria e sistemit: zgjidhja referuese (c):
- kromatogrami tregon 2 pika kryesore të ndara qartë.
Kufiri: zgjidhja e provës (a):
-papastërtia C: çdo njollë për shkak të papastërtisë C nuk është më intensive se pika kryesore në kromatogramë e marrë me tretësirën referuese (b) (0.1 për qind).
Substancat e lidhura.Kromatografia e lëngët (2.2.29).
Përzierje tretës: metanol R, faza e lëvizshme (10:90 V/V).
Zgjidhja testuese.Shkrihet 60 mg e substancës që do të ekzaminohet në përzierjen e tretësve dhe hollohet në 20,0 mL me përzierjen e tretësit.
Zgjidhja referuese (a).Shpërndani përmbajtjen e një shisheje me Acid Ursodeoksikolik për përshtatshmërinë e sistemit CRS (që përmban papastërti A dhe H) në 1,0 mL të përzierjes së tretësit.
Zgjidhja e referencës (b).Holloni 1,0 mL të tretësirës së provës në 100,0 mL me përzierjen e tretësit.Holloni 1.0 mL të kësaj tretësire në 10.0 mL me përzierjen e tretësit.
Kolona:
-madhësia: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-faza stacionare: xhel silicë oktadecilsilil me kapak fundor përkromatografia R (5 μm);
- temperatura: 40℃ ± 1℃.
Faza lëvizëse: përzieni 30 vëllime acetonitrili R, 37 vëllime të një solucioni prej 0,78 g/L të dihidrogjen fosfatit të natriumit R të rregulluar në pH 3 me acid fosforik R dhe 40 vëllime metanol R.
Shpejtësia e rrjedhjes: 0,8 mL/min.
Zbulimi: refraktometri në 35 ± 1℃.
Injeksion: 150 μL.
Koha e funksionimit: 4 herë koha e mbajtjes së Acidit Ursodeoksikolik.
Identifikimi i papastërtive: përdorni kromatogramin e furnizuar me acid ursodeoksikolik për përshtatshmërinë e sistemit CRS dhe kromatogramin e marrë me tretësirën referente (a) për të identifikuar majat për shkak të papastërtive A dhe H.
Mbajtja relative në lidhje me acidin ursodeoksikolik (koha e mbajtjes = rreth 14 min): papastërti H = rreth 0,9;papastërti A = rreth 2.8.
Përshtatshmëria e sistemit: zgjidhja referuese (a):
-rezolucion: minimumi 1.5 midis majave për shkak të papastërtisë H dhe acidit ursodeoksikolik.
Kufijtë:
- papastërtia A: jo më shumë se 10 herë sipërfaqja e pikut kryesor në kromatogramin e marrë me tretësirën referente (b) (1,0 përqind);
- papastërtitë e paspecifikuara: për çdo papastërti, jo më shumë se sipërfaqja e pikut kryesor në kromatogram, e marrë me tretësirën referente (b) (0,10 për qind);
- totali: jo më shumë se 15 herë sipërfaqja e pikut kryesor në kromatogramin e marrë me tretësirën referente (b) (1,5 përqind);
-kufiri i mospërfilljes: 0,5 herë sipërfaqja e pikut kryesor në kromatogramin e marrë me tretësirën referuese (b) (0,05 përqind).
Metalet e rënda (2.4.8): maksimumi 20 ppm.
1,0 g përputhet me testin C. Përgatitni tretësirën referuese duke përdorur 2 mL tretësirë ​​standarde të plumbit (10 ppm Pb) R.
Humbja gjatë tharjes (2.2.32): maksimumi 1.0 për qind, e përcaktuar në 1.000 g duke u tharë në furrë në 105℃.
Hiri i sulfatuar (2.4.14): maksimumi 0.1 përqind, i përcaktuar në 1.0 g.
VLERËSIM
Shkrihet 0,350 g në 50 mL etanol (96 për qind) R, i neutralizuar më parë në 0,2 mL tretësirë ​​fenolftalein R. Shtoni 50 mL ujë R dhe titroni me 0,1 M hidroksid natriumi derisa të përftohet një ngjyrë rozë.
1 mL hidroksid natriumi 0,1 M është i barabartë me 39,26 mg C24H40O4.
PAPApastërtitë
Papastërtitë e specifikuara: A, C.
Papastërti të tjera të zbulueshme (substancat e mëposhtme, nëse janë të pranishme në një nivel të mjaftueshëm, do të zbulohen nga njëra ose tjetra nga testet në monografi. Ato janë të kufizuara nga kriteri i përgjithshëm i pranimit për papastërtitë e tjera/të paspecifikuara dhe/ose nga monografia e përgjithshme Substancat për përdorim farmaceutik (2034). Prandaj nuk është e nevojshme të identifikohen këto papastërti për demonstrimin e pajtueshmërisë. Shih gjithashtu 5.10.
Kontrolli i papastërtive në substancat për përdorim farmaceutik): B, D, E, F, G, H, I.
A. Acidi 3α,7α-dihidroksi-5β-kolan-24-oik (acidi kenodeoksikolik),
B. Acidi 3α,7α,12α-trihidroksi-5β-kolan-24-oik (acidi kolik),
C. Acidi 3α-hidroksi-5β-kolan-24-oik (acidi litokolik),
D. 3α,7β,12α-trihidroksi-5β-kolan-24-oic acid (acidi ursokolik),
E. acid 3α,12α-dihidroksi-5β-kolan-24-oik (acidi deoksikolik),
F. Acidi 3α-hidroksi-7-okso-5β-kolan-24-oik,
G. metil 3α,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oate,
H. acid 3β,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oik,
I. 5β-kolan-3α,7β,24-triol.