Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл ЦАС 17193-40-7 Х-Пхе(4-НО2)-ОМе·ХЦл тест >98,5% (ХПЛЦ) фабрика

Метода анализе Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл (Х-Пхе(4-НО2)-ОМе·ХЦл) (ЦАС: 17193-40-7)
Опис: Ставите око 2 г узорка у чисту и суву петријеву посуду и посматрајте изглед узорка.Извештавање: Пријавите запажање
Идентификација: Упоредите време задржавања главног пика на хроматограму препарата за испитивање са временом задржавања главног пика у хроматограму припреме за прикладност система као што је добијено у хроматографској чистоћи помоћу ХПЛЦ.
Губитак при сушењу: Осушите плитку боцу за мерење са стакленим чепом на 105±2℃ 30 минута.Оставите да се охлади на собну температуру у ексикатору.Прецизно измерите боцу за мерење са чепом и забележите тежину (В1).Пребаците око 1 до 2 г тачно измерене количине испитиване супстанце у боцу за мерење.Лаганим, бочним протресањем, распоредите узорак за испитивање што је могуће равномерније на дубину од око 5 мм.Измерите напуњену боцу за мерење и забележите тежину (В2).Ставите напуњену боцу у сушару, уклоните чеп и оставите је такође у комори.Сушити тест узорак на 105±2℃ 3 сата.Након отварања коморе, одмах затворите боцу и оставите да се у ексикатору охлади на собну температуру.Прецизно измерити боцу за мерење са чепом и поновити тежину (В3).Израчунајте проценат губитка приликом сушења узорка користећи следећу формулу:
Прорачун Губитак при сушењу (% в/в)= (В2-В3) ÷ (В2-В1) к 100
Садржај енантиомера према ХПЛЦ:
Хемикалије и реагенси:
н-Хексан АР квалитета
Метанол ХПЛЦ квалитета
Изопропил алкохол ХПЛЦ граде
Диетиламин АР граде
Стандарди: Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл стандард;Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл енантиомер стандард
Мобилна фаза: Припремите хомогену смешу н-хексана, изопропил алкохола, метанола и диетиламина (65:20:15:0,1 в/в/в/в)
Празан препарат: Пренесите 2,5 мл метанола у волуметријску тиквицу од 10 мл, разблажите до запремине са мобилном фазом и промешајте.
Припрема за прикладност система:
Прецизно измерите и пренесите око 5 мг сваког од Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл стандарда и Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл енантиомера стандарда у волуметријску тиквицу од 10 мл, растворите у око 2,5 мл метанола, разблажите до запремине помоћу мобилног фаза и мешање.
Припрема теста:
Прецизно одмерити и пребацити око 5 мг узорка у волуметријску тиквицу од 10 мола, растворити у око 2,5 мл метанола, разблажити до запремине мобилном фазом и мешати.
Инструментални параметри:
Инструмент: ХПЛЦ опремљен са ињектором, пумпом, УВ детектором и рекордером
Колона: ЦхиралПак-ИЦ (4,6 мм к 250 мм) 5 μ или еквивалентно
Брзина протока: 1,0 мл/мин
Таласна дужина: 260нм
Запремина ињекције: 10 μЛ
Темп. клапне колоне: 25℃
Време трајања: 20 минута
Процедура
Убризгајте растворе као што је наведено у следећем редоследу.Снимите хроматограме и потврдите критеријуме:
Опис ињекција Критеријуми за број ињекција
Празан препарат 1 Не треба приметити ометајући пик у време задржавања Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл или енантиомера.
Припрема за прикладност система 1 Резолуција између Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл и пика енантиомера не би требало да буде мања од 2,0
Припрема теста 1 Користите тест хроматограм да одредите садржај енантиомера у узорку.
Релативна времена задржавања:
Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл 1.0
Енантиомер Око 1.11
Време задржавања Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл је око 9,8 минута.
Прорачун: У хроматограму добијеном из припреме теста, занемарите све пикове који очекују Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл и енантиомер.Извести садржај енантиомера у узорку методом нормализације површине.
Хроматографска чистоћа и нечистоће помоћу ХПЛЦ:
Хемикалије и реагенси:
Диамонијум фосфат АР граде
Фосфорна киселина АР граде
Метанол ХПЛЦ квалитета
Пречишћена вода
Стандарди
Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл стандард
Стандард 4-нитро-Л-фенилаланин монохидрат
Мобилна фаза-А
Растворити 6,6 г диамонијум фосфата у 1000 мл пречишћене воде.Подесите пХ овог раствора на 6,0 помоћу фосфорне киселине.Филтрирати и дегазирати.Пре мерења пХ раствора, калибришите пХ метар са стандардним пуферским раствором пХ 4,01 И 7,00.
Мобилна фаза-Б
Метанол ХПЛЦ квалитета
Припрема за прикладност система
Прецизно одмерити и пренети око 25 мг сваког стандарда Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл и стандарда 4-нитро-Л-фенилаланин монохидрата у мерицу од 50 мл, растворити и разблажити до запремине метанолом и мешати.
Припрема за тест:
Прецизно одмерити и пребацити око 25 мг узорка у волуметријску тиквицу од 50 мл, растворити и разблажити до запремине метанолом и мешати.
Инструментални параметри:
Инструмент: ХПЛЦ опремљен са ињектором, пумпом, УВ детектором и рекордером
Колона: КСТерра РП-18 (4,6 мм к 150 мм) 5 μ или еквивалентно
Брзина протока: 1,0 мл/мин
Таласна дужина: 265 нм
Запремина ињекције: 20 μЛ
Темп. клапне колоне: 25℃
Трајање: 45 минута
Градиент Програм
Време (мин) Мобилна фаза-А % Мобилна фаза-Б %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Процедура:
Убризгајте растворе као што је наведено у следећем редоследу.Снимите хроматограме и потврдите критеријуме:
Празан препарат 1 Не треба приметити ометајући пик у време задржавања Л-4-нитрофенилаланин метил естра ХЦл.
Припрема прикладности система 1 Фактор заостајања за Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл врх не би требало да буде мањи од 2,0
Припрема теста 1 Користите тест хроматограм да одредите хроматографску чистоћу и нечистоће.
Релативна времена задржавања:
Л-4-нитрофенилаланин метил естар ХЦл 1,0 (време задржавања око 11,4 минута)
4-нитро-Л-фенилаланин Око 0,4
Толуен Око 2.3
Прорачуни:
У хроматограму добијеном припремом за испитивање, након слепе корекције, занемарите пик због толуена.Навести хроматографску чистоћу, садржај 4-нитро-Л-фенилаланина и укупне нечистоће у узорку методом нормализације површине.