L-Tryptofan CAS 73-22-3 (H-Trp-OH) analys 98,5~101,5% Fabriks hög kvalitet

L-tryptofan (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) AJI 97 testmetod
Identifiering: Jämför det infraröda absorptionsspektrumet för provet med det för standarden med kaliumbromidskivmetoden.
Specifik rotation [α]20/D: Torkat prov, C=1, H2O löses upp genom uppvärmning
Lösningstillstånd (transmittans): 0,5 g i 20 ml 2 mol/L HCl, spektrofotometer, 430 nm, 10 mm celltjocklek.
Klorid (Cl): 0,7 g, A-1, ref: 0,40 ml 0,01 mol/L HCl
Ammonium (NH4): B-2
Sulfat (SO4): 1,2 g, (1), ref: 0,50 ml 0,005 mol/L H2SO4
Järn (Fe): 0,75 g, (2), ref: 1,5 ml Iron Std.(0,01 mg/ml)
Tungmetaller (Pb): 2,0 g, (4), ref: 2,0 ml Pb Std.(0,01 mg/ml)
Arsenik (As2O3): 2,0 g, (1), ref: 2,0 ml As2O3 Std.
Andra aminosyror: H2O, Lös upp genom uppvärmning (40℃) Testprov: 50μg, A-6-a, kontroll: L-Trp 0,25μg
Förlust vid torkning: vid 105 ℃ i 3 timmar.
Rester vid antändning (sulfaterad): AJI-test 13
Analys: Torkat prov, 200mg, (1), 3ml myrsyra, 50ml isättika, 0,1mol/L HCLO4 1ml=20,423mg C11H12N2O2
pH-test: 1,0 g i 100 ml H2O

L-tryptofan (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) USP35 testmetod
DEFINITION
Tryptofan innehåller NLT 98,5 % och NMT 101,5 % av C11H12N2O2, som L-tryptofan, beräknat på torkad basis.
IDENTIFIERING
A. INFRARÖD ABSORPTION <197K>
ANALYSERA
PROCEDUR
Provlösning: Placera 200 mg tryptofan i en 125 ml kolv.Lös upp i en blandning av 3 mL myrsyra och 50 mL isättika.
Analys: Titrera med 0,1 N perklorsyra VS, bestämning av endpoint potentiometriskt.Utför en blank bestämning och gör eventuella nödvändiga korrigeringar (se Titrimetri <541>).Varje ml 0,1 N perklorsyra motsvarar 20,42 mg C11H12N2O2.
Acceptanskriterier: 98,5%~101,5% på torkad basis
ORENSIGHETER
Oorganiska föroreningar
RESTANTÄNDNING <281>: NMT 0,1 %
KLORID OCH SULFAT, Klorid <221>: En portion på 0,73 g visar inte mer klorid än vad som motsvarar 0,50 ml 0,020 N saltsyra (0,05%).[OBS - Värm försiktigt provberedningen för att lösas upp om det behövs.]
KLORID OCH SULFAT, Sulfat <221>: En portion på 0,33 g visar inte mer sulfat än vad som motsvarar 0,10 ml 0,020 N svavelsyra (0,03%).[OBS - Värm försiktigt provberedningen för att lösas upp om det behövs.
JÄRN <241>: NMT 30 ppm
TUNGMETALLER, Metod II <231>: NMT 15ppm
Organiska föroreningar
PROCEDUR 1
Lösning A: Trifluorättiksyra i vatten (1 ml/L)
Lösning B: Trifluorättiksyra i en lösning av acetonitril och vatten (80:20) (1 mL/L trifluorättiksyralösning)
Standardlösning: 1,0 mg/L vardera av USP tryptofanrelaterad förening A RS och USP tryptofanrelaterad förening B RS i vatten
Provlösning: 10,0 mg/ml tryptofan i vatten
Systemlämplighetslösning: 1,0 mg/L USP tryptofanrelaterad förening B RS i vatten
Mobil fas: Se gradienttabellen nedan.

Kromatografiskt system (Se Kromatografi <621>, Systemlämplighet.)
Läge: LC
Detektor: UV 220 nm
Kolumn: 4,6 mm × 25 cm;5-µm packning L1
Kolonntemperatur: 30°
Flödeshastighet: 1 ml/min
Injektionsstorlek: 20 µL
Systemlämplighet
Exempel: Systemlämplighetslösning
Lämplighetskrav
Relativ standardavvikelse: NMT 5,0 %
Analys
Prover: Standardlösning och Provlösning
Beräkna procentandelen av varje ospecificerad förorening i den del av tryptofan som tas:
Resultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = topparea för varje ospecificerad förorening i provlösningen
rS = topparea för tryptofanrelaterad förening B i standardlösningen
CS = koncentration av USP Tryptofan-relaterad förening B RS i standardlösningen (µg/mL)
CU = koncentrationen av tryptofan i provlösningen (µg/ml)
Acceptanskriterier
Totala föroreningar 1: NMT 0,01 % av de totala föroreningarna som eluerar före tryptofantoppen
Totala föroreningar 2: NMT 0,03 % av de totala föroreningarna som eluerar efter tryptofantoppen.[OBS - Exkludera toppen för tryptofanrelaterad förening B.]
Tryptofanrelaterad förening A: Om en topp för tryptofanrelaterad förening A observeras i provlösningen, utför sedan testet för Procedur 2: Gräns ​​för tryptofanrelaterad förening A nedan.
PROCEDUR 2: GRÄNS FÖR TRYPTOFANRELATERAD FÖRENING A
Lösning A: 18 mM monobasiskt natriumfosfat, filtrerad och avgasad (pH 2,5) och acetonitril (9:1)
Lösning B: 10 mM monobasiskt natriumfosfat, filtrerad och avgasad (pH 2,5) och acetonitril (1:1)
Lösning C: Acetonitril i vatten (7:3)
Standardlösning: 0,1 mg/L USP tryptofanrelaterad förening A RS i vatten
Provlösning: 10,0 mg/ml tryptofan i vatten
Mobil fas: Se gradienttabellen nedan

Kromatografiskt system
(Se Kromatografi <621>, Systemlämplighet.)
Läge: LC
Detektor: UV 216 nm
Kolumn: 3,9 mm × 15 cm;5-µm packning L1
Kolonntemperatur: 30°
Flödeshastighet: 1 ml/min
Injektionsstorlek: 20 µL
Systemlämplighet
Prov: Standardlösning
Lämplighetskrav
Relativ standardavvikelse: NMT 5,0 %
Analys
Prover: Standardlösning och Provlösning
Beräkna procentandelen tryptofanrelaterad förening
A i den del av tryptofan som tas:
Resultat = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = topparea för tryptofanrelaterad förening A i provlösningen
rS = topparea för tryptofanrelaterad förening A i standardlösningen
CS = koncentration av USP tryptofanrelaterad förening A RS i standardlösningen (µg/ml)
CU = koncentrationen av tryptofan i provlösningen (µg/ml)
Acceptanskriterier: NMT 10 ppm
SPECIFIKA TEST
OPTISK ROTATION, specifik rotation <781S>: -29,4° till -32,8°
Provlösning: 10 mg/ml, i vatten.[OBS - Värm försiktigt för att lösas upp om det behövs.]
PH <791>: 5,5~7,0, i en lösning (1 på 100)
FÖRLUST VID TORKNING <731>: Torka ett prov vid 105° i 3 timmar: det tappar NMT 0,3 % av sin vikt.
YTTERLIGARE KRAV
FÖRPACKNING OCH LAGRING: Förvaras i väl tillslutna behållare
USP REFERENSSTANDARDER <11>
USP L-Tryptofan RS
USP Tryptofan-relaterad förening A RS
3,3'-[Etylidenbis(lH-indol-1,3-diyl)]bis[2S)-2-aminopropan]syra.C24H26N4O4 432,49
USP Tryptofan-relaterad förening B RS
2-acetamido-3-(lH-indol-3-yl)propansyra.C13H14N2O3 246,3