Ursodeoxicholsyra (UDCA) CAS 128-13-2 analys 99,0~101,0%

URSODEOXYKOLSYRA
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINITION
3a,7p-dihydroxi-5p-cholan-24-syra.
Innehåll: 99,0 procent till 101,0 procent (torkat ämne).
TECKEN
Utseende: vitt eller nästan vitt pulver.
Löslighet: praktiskt taget olöslig i vatten, fritt löslig i etanol (96 procent), lätt löslig i aceton, praktiskt taget olöslig i metylenklorid.
mp: ca 202℃.
IDENTIFIERING
Första identifieringen: A.
Andra identifieringen: B, C.
A. Infraröd absorptionsspektrofotometri (2.2.24).
Jämförelse: Ursodeoxycholsyra CRS.
B. Undersök kromatogrammen som erhölls i testet för förorening C.
Resultat: den huvudsakliga fläcken i kromatogrammet som erhålls med testlösning (b) liknar i position, färg och storlek den huvudsakliga fläcken i kromatogrammet som erhålls med referenslösning (a).
C. Lös upp cirka 10 mg i 1 mL svavelsyra R. Tillsätt 0,1 mL formaldehydlösning R och låt stå i 5 min.Tillsätt 5 ml vatten R. Den erhållna suspensionen är grönblå.
TESTER
Specifik optisk rotation (2.2.7): + 58,0 till + 62,0 (torkat ämne).
Lös 0,500 g i vattenfri etanol R och späd till 25,0 ml med samma lösningsmedel.
Förorening C. Tunnskiktskromatografi (2.2.27).
Lösningsmedelsblandning: vatten R, aceton R (10:90 V/V).
Testlösning (a).Lös upp 0,40 g av ämnet som ska undersökas i lösningsmedelsblandningen och späd till 10 ml med lösningsmedelsblandningen.
Testlösning (b).Späd 1 mL testlösning (a) till 10 mL med lösningsmedelsblandningen.
Referenslösning (a).Lös 40 mg ursodeoxicholsyra CRS i lösningsmedelsblandningen och späd till 10 ml med lösningsmedelsblandningen.
Referenslösning (b).Lös 20 mg litokolsyra CRS (orenhet C) i lösningsmedelsblandningen och späd till 10,0 ml med lösningsmedelsblandningen (lösning A).Späd 2,0 mL av denna lösning till 100,0 mL med lösningsmedelsblandningen.
Referenslösning (c).Till 5 mL lösning A tillsätt 10 mg chenodeoxicholsyra CRS (förorening A) och späd till 50 mL med lösningsmedelsblandningen.
Platta: TLC silikagelplatta R.
Mobil fas: isättika R, aceton R, metylenklorid R (1:30:60 V/V/V).
Användning: 5μL.
Utveckling: över 2/3 av plattan.
Torkning: vid 120 ℃ i 10 min.
Detektion: Spraya omedelbart med en 47,6 g/L lösning av fosfomolybdensyra R i en blandning av 1 volym svavelsyra R och 20 volymer isättika R och värm till 120 ℃ tills blå fläckar uppträder på en ljusare bakgrund.
Systemlämplighet: referenslösning (c):
- kromatogrammet visar två tydligt separerade huvudfläckar.
Gräns: testlösning (a):
-orenhet C: någon fläck som beror på förorening C är inte mer intensiv än den huvudsakliga fläcken i kromatogrammet som erhålls med referenslösning (b) (0,1 procent).
Relaterade substanser.Vätskekromatografi (2.2.29).
Lösningsmedelsblandning: metanol R, mobil fas (10:90 V/V).
Testlösning.Lös upp 60 mg av ämnet som ska undersökas i lösningsmedelsblandningen och späd till 20,0 mL med lösningsmedelsblandningen.
Referenslösning (a).Lös upp innehållet i en injektionsflaska med ursodeoxicholsyra för systemlämplighet CRS (innehåller föroreningar A och H) i 1,0 mL av lösningsmedelsblandningen.
Referenslösning (b).Späd 1,0 mL av testlösningen till 100,0 mL med lösningsmedelsblandningen.Späd 1,0 mL av denna lösning till 10,0 mL med lösningsmedelsblandningen.
Kolumn:
-storlek: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stationär fas: ändkapslad oktadecylsilyl kiselgel förkromatografi R (5 μm);
- Temperatur: 40℃ ± 1℃.
Mobil fas: blanda 30 volymer acetonitril R, 37 volymer av en 0,78 g/L lösning av natriumdivätefosfat R justerad till pH 3 med fosforsyra R och 40 volymer metanol R.
Flödeshastighet: 0,8 ml/min.
Detektion: refraktometer vid 35 ± 1 ℃.
Injektion: 150 μL.
Körtid: 4 gånger retentionstiden för Ursodeoxicholsyra.
Identifiering av föroreningar: använd kromatogrammet som medföljer ursodeoxicholsyra för systemlämplighet CRS och kromatogrammet erhållet med referenslösning (a) för att identifiera topparna på grund av föroreningar A och H.
Relativ retention med hänvisning till ursodeoxicholsyra (retentionstid = ca 14 min): orenhet H = ca 0,9;förorening A = ca 2,8.
Systemlämplighet: referenslösning (a):
-upplösning: minst 1,5 mellan topparna på grund av förorening H och ursodeoxicholsyra.
Gränser:
- förorening A: inte mer än 10 gånger arean av huvudtoppen i kromatogrammet som erhålls med referenslösning (b) (1,0 procent).
-ospecificerade föroreningar: för varje förorening, inte mer än arean av huvudtoppen i kromatogrammet som erhålls med referenslösning (b) (0,10 procent).
- Totalt: inte mer än 15 gånger arean av huvudtoppen i kromatogrammet som erhålls med referenslösning (b) (1,5 procent).
-bortseendegräns: 0,5 gånger arean av huvudtoppen i kromatogrammet erhållet med referenslösning (b) (0,05 procent).
Tungmetaller (2.4.8): max 20 ppm.
1,0 g överensstämmer med test C. Bered referenslösningen med 2 mL blystandardlösning (10 ppm Pb) R.
Förlust vid torkning (2.2.32): maximalt 1,0 procent, bestämt på 1 000 g genom torkning i ugn vid 105 ℃.
Sulfataska (2.4.14): högst 0,1 procent, bestämt på 1,0 g.
ANALYSERA
Lös 0,350 g i 50 mL etanol (96 procent) R, tidigare neutraliserat till 0,2 mL fenolftaleinlösning R. Tillsätt 50 mL vatten R och titrera med 0,1 M natriumhydroxid tills en rosa färg erhålls.
1 ml 0,1 M natriumhydroxid motsvarar 39,26 mg C24H40O4.
ORENSIGHETER
Angivna föroreningar: A, C.
Andra påvisbara föroreningar (följande ämnen skulle, om de förekommer i en tillräcklig nivå, detekteras av ett eller annat av testerna i monografin. De begränsas av det allmänna acceptanskriteriet för andra/ospecificerade föroreningar och/eller av den allmänna monografin Ämnen för farmaceutiskt bruk (2034). Det är därför inte nödvändigt att identifiera dessa föroreningar för att påvisa överensstämmelse. Se även 5.10.
Kontroll av föroreningar i substanser för farmaceutiskt bruk): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihydroxi-5β-cholan-24-oic acid (chenodeoxicholsyra),
B. 3α,7α,12α-trihydroxi-5β-cholan-24-oic acid (cholsyra),
C. 3α-hydroxi-5β-cholan-24-oic acid (litocholsyra),
D. 3α,7β,12α-trihydroxi-5β-cholan-24-oic acid (ursocholsyra),
E. 3α,12α-dihydroxi-5β-cholan-24-oic acid (deoxicholsyra),
F. 3α-hydroxi-7-oxo-5β-cholan-24-oic acid,
G. metyl 3α,7β-dihydroxi-5β-cholan-24-oat,
H. 3β,7β-dihydroxi-5β-cholan-24-oic acid,
I. 5p-kolan-3a,7p,24-triol.