L-4-Nitrophenylalanine మిథైల్ ఈస్టర్ HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl అస్సే >98.5% (HPLC) ఫ్యాక్టరీ

L-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) యొక్క విశ్లేషణ పద్ధతి (CAS: 17193-40-7)
వివరణ: శుభ్రమైన మరియు పొడిగా ఉండే పెట్రీ డిష్‌లో సుమారు 2 గ్రా నమూనాను ఉంచండి మరియు నమూనా యొక్క రూపాన్ని గమనించండి.రిపోర్టింగ్: పరిశీలనను నివేదించండి
గుర్తింపు: HPLC ద్వారా క్రోమాటోగ్రాఫిక్ స్వచ్ఛతలో పొందిన సిస్టమ్ అనుకూలత తయారీ యొక్క క్రోమాటోగ్రామ్‌లోని ప్రధాన శిఖరం యొక్క నిలుపుదల సమయంతో పరీక్ష తయారీ యొక్క క్రోమాటోగ్రామ్‌లోని ప్రధాన శిఖరం యొక్క నిలుపుదల సమయాన్ని సరిపోల్చండి.
ఎండబెట్టడం వల్ల నష్టం: 105±2℃ వద్ద గ్లాస్-స్టాపర్డ్, నిస్సార బరువున్న బాటిల్‌ను 30 నిమిషాలు ఆరబెట్టండి.డెసికేటర్‌లో గది ఉష్ణోగ్రతకు చల్లబరచడానికి అనుమతించండి.స్టాపర్‌తో బరువున్న బాటిల్‌ను ఖచ్చితంగా తూకం వేయండి మరియు బరువును రికార్డ్ చేయండి (W1).1 నుండి 2g వరకు ఖచ్చితంగా బరువున్న పరీక్ష పదార్థాన్ని బరువు బాటిల్‌లోకి బదిలీ చేయండి.సున్నితంగా, పక్కకి వణుకుతూ, పరీక్ష నమూనాను దాదాపు 5 మిమీ లోతు వరకు ఆచరణాత్మకంగా సమానంగా పంపిణీ చేయండి.లోడ్ చేయబడిన వెయిటింగ్ బాటిల్‌ను తూకం వేయండి మరియు బరువును రికార్డ్ చేయండి (W2).లోడ్ చేసిన బాటిల్‌ను ఎండబెట్టే ఓవెన్‌లో ఉంచండి, స్టాపర్‌ను తీసివేసి, దానిని చాంబర్‌లో కూడా ఉంచండి.పరీక్ష నమూనాను 105±2℃ వద్ద 3 గంటల పాటు ఆరబెట్టండి.గదిని తెరిచిన తర్వాత, బాటిల్‌ను వెంటనే మూసివేసి, డెసికేటర్‌లో గది ఉష్ణోగ్రతకు రావడానికి అనుమతించండి.స్టాపర్‌తో వెయిటింగ్ బాటిల్‌ను ఖచ్చితంగా తూకం వేయండి మరియు బరువును తిరిగి పొందండి (W3).కింది సూత్రాన్ని ఉపయోగించి నమూనా ఎండబెట్టడంపై శాతం నష్టాన్ని లెక్కించండి:
ఎండబెట్టడంపై గణన నష్టం (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC ద్వారా Enantiomer కంటెంట్:
రసాయన & కారకాలు:
n-హెక్సేన్ AR గ్రేడ్
మిథనాల్ HPLC గ్రేడ్
ఐసోప్రొపైల్ ఆల్కహాల్ HPLC గ్రేడ్
డైథైలామైన్ AR గ్రేడ్
ప్రమాణాలు: L-4-Nitrophenylalanine మిథైల్ ఈస్టర్ HCl ప్రమాణం;L-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ HCl ఎన్యాంటియోమర్ ప్రమాణం
మొబైల్ దశ: n-హెక్సేన్, ఐసోప్రొపైల్ ఆల్కహాల్, మిథనాల్ మరియు డైథైలమైన్ (65:20:15:0.1 v/v/v/v) యొక్క సజాతీయ మిశ్రమాన్ని సిద్ధం చేయండి.
ఖాళీ తయారీ: 10-ml వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లో 2.5ml మిథనాల్‌ను బదిలీ చేయండి, మొబైల్ ఫేజ్‌తో వాల్యూమ్‌కు పలుచన చేసి కలపండి.
సిస్టమ్ అనుకూలత తయారీ:
10-ml వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లో L-4-Nitrophenylalanine మిథైల్ Ester HCl ప్రమాణం మరియు L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ఎన్‌యాంటియోమర్ స్టాండర్డ్‌లను ఖచ్చితంగా 5 mg బరువుతో బదిలీ చేయండి, సుమారు 2.5ml మిథనాల్‌లో కరిగించి, మొబైల్‌తో వాల్యూమ్‌కు తగ్గించండి. దశ మరియు మిక్స్.
పరీక్ష తయారీ:
10-మోల్ వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లో 5 మిల్లీగ్రాముల నమూనాను ఖచ్చితంగా బరువుగా ఉంచి బదిలీ చేయండి, సుమారు 2.5మి.లీ మిథనాల్‌లో కరిగించి, మొబైల్ ఫేజ్‌తో వాల్యూమ్‌కు పలుచన చేసి కలపాలి.
వాయిద్య పారామితులు:
పరికరం: ఇంజెక్టర్, పంప్, UV డిటెక్టర్ మరియు రికార్డర్‌తో కూడిన HPLC
కాలమ్: ChiralPak-IC (4.6mm x 250mm) 5 μ లేదా తత్సమానం
ప్రవాహం రేటు: 1.0 ml/నిమిషానికి
తరంగదైర్ఘ్యం: 260nm
ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్: 10 μL
కాలమ్ కోవెన్ ఉష్ణోగ్రత: 25℃
రన్ సమయం: 20 నిమిషాలు
విధానము
కింది క్రమంలో పేర్కొన్న విధంగా పరిష్కారాలను ఇంజెక్ట్ చేయండి.క్రోమాటోగ్రామ్‌లను రికార్డ్ చేయండి మరియు ప్రమాణాలను నిర్ధారించండి:
ఇంజెక్షన్ల వివరణ ఇంజెక్షన్ల సంఖ్య ప్రమాణం
ఖాళీ తయారీ 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl లేదా enantiomer యొక్క నిలుపుదల సమయంలో ఎటువంటి అంతరాయం కలిగించే శిఖరాన్ని గమనించకూడదు.
సిస్టమ్ అనుకూలత తయారీ
పరీక్ష తయారీ 1 నమూనాలోని ఎన్‌యాంటియోమర్ కంటెంట్‌ని గుర్తించడానికి టెస్ట్ క్రోమాటోగ్రామ్‌ని ఉపయోగించండి.
సాపేక్ష నిలుపుదల సమయాలు:
L-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ HCl 1.0
ఎన్యాంటియోమర్ సుమారు 1.11
L-4-Nitrophenylalanine మిథైల్ ఈస్టర్ HCl నిలుపుదల సమయం సుమారు 9.8 నిమిషాలు.
గణన: పరీక్ష తయారీ నుండి పొందిన క్రోమాటోగ్రామ్‌లో, ఎల్-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ హెచ్‌సిఎల్ మరియు ఎన్‌యాంటియోమర్‌లను ఆశించే అన్ని శిఖరాలను విస్మరించండి.ప్రాంతం సాధారణీకరణ పద్ధతి ద్వారా నమూనాలోని ఎన్‌యాంటియోమర్ కంటెంట్‌ను నివేదించండి.
HPLC ద్వారా క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్యూరిటీ మరియు ఇంప్యూరిటీస్:
రసాయన & కారకాలు:
డైఅమ్మోనియం ఫాస్ఫేట్ AR గ్రేడ్
ఫాస్పోరిక్ యాసిడ్ AR గ్రేడ్
మిథనాల్ HPLC గ్రేడ్
శుద్ధి చేసిన నీరు
ప్రమాణాలు
L-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ HCl ప్రమాణం
4-నైట్రో-ఎల్-ఫెనిలాలనైన్ మోనోహైడ్రేట్ ప్రమాణం
మొబైల్ ఫేజ్-A
1000ml శుద్ధి చేసిన నీటిలో 6.6 గ్రా డైఅమోనియం ఫాస్ఫేట్‌ను కరిగించండి.ఫాస్పోరిక్ యాసిడ్‌తో ఈ ద్రావణం యొక్క pHని 6.0కి సర్దుబాటు చేయండి.ఫిల్టర్ మరియు డీగాస్.ద్రావణం యొక్క pHని కొలిచే ముందు, pH మీటర్‌ను ప్రామాణిక బఫర్ ద్రావణం pH 4.01 మరియు 7.00తో కాలిబ్రేట్ చేయండి.
మొబైల్ ఫేజ్-బి
మిథనాల్ HPLC గ్రేడ్
సిస్టమ్ అనుకూలత తయారీ
50-ml వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లో L-4-Nitrophenylalanine మిథైల్ Ester HCl స్టాండర్డ్ మరియు 4-Nitro-L-ఫెనిలాలనైన్ మోనోహైడ్రేట్ స్టాండర్డ్‌ను ఖచ్చితంగా 25 mg బరువుతో బదిలీ చేయండి, మిథనాల్ మరియు మిక్స్‌తో వాల్యూమ్‌లో కరిగించండి.
పరీక్ష తయారీ:
ఖచ్చితంగా బరువు మరియు 50-ml వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లో 25 mg నమూనాను బదిలీ చేయండి, కరిగించి, మిథనాల్ మరియు మిక్స్‌తో వాల్యూమ్‌కు పలుచన చేయండి.
వాయిద్య పారామితులు:
పరికరం: ఇంజెక్టర్, పంప్, UV డిటెక్టర్ మరియు రికార్డర్‌తో కూడిన HPLC
కాలమ్: XTerra RP-18 (4.6mm x 150mm) 5 μ లేదా తత్సమానం
ప్రవాహం రేటు: 1.0 ml/నిమిషానికి
తరంగదైర్ఘ్యం: 265nm
ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్: 20 μL
కాలమ్ కోవెన్ ఉష్ణోగ్రత: 25℃
రన్ టైమ్: 45 నిమిషాలు
గ్రేడియంట్ ప్రోగ్రామ్
సమయం (నిమి) మొబైల్ ఫేజ్-ఎ % మొబైల్ ఫేజ్-బి %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
విధానం:
కింది క్రమంలో పేర్కొన్న విధంగా పరిష్కారాలను ఇంజెక్ట్ చేయండి.క్రోమాటోగ్రామ్‌లను రికార్డ్ చేయండి మరియు ప్రమాణాలను నిర్ధారించండి:
ఖాళీ తయారీ 1 L-4-Nitrophenylalanine మిథైల్ ఈస్టర్ HCl నిలుపుదల సమయంలో ఎటువంటి అంతరాయం కలిగించే శిఖరాన్ని గమనించకూడదు.
సిస్టమ్ అనుకూలత తయారీ 1 L-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ HCl పీక్ కోసం టైలింగ్ ఫ్యాక్టర్ 2.0 కంటే తక్కువ ఉండకూడదు
పరీక్ష తయారీ 1 క్రోమాటోగ్రాఫిక్ స్వచ్ఛత మరియు మలినాలను గుర్తించడానికి టెస్ట్ క్రోమాటోగ్రామ్‌ని ఉపయోగించండి.
సాపేక్ష నిలుపుదల సమయాలు:
L-4-నైట్రోఫెనిలాలనైన్ మిథైల్ ఈస్టర్ HCl 1.0 (నిలుపుదల సమయం సుమారు 11.4 నిమిషాలు)
4-నైట్రో-ఎల్-ఫెనిలాలనైన్ సుమారు 0.4
టోలున్ సుమారు 2.3
లెక్కలు:
పరీక్ష తయారీ నుండి పొందిన క్రోమాటోగ్రామ్‌లో, ఖాళీ దిద్దుబాటు తర్వాత, టోలున్ కారణంగా పీక్‌ను విస్మరించండి.ఏరియా సాధారణీకరణ పద్ధతి ద్వారా నమూనాలోని క్రోమాటోగ్రాఫిక్ స్వచ్ఛత, 4-నైట్రో-ఎల్-ఫెనిలాలనైన్ కంటెంట్ మరియు మొత్తం మలినాలను నివేదించండి.