Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-tert-Butyl-L-Serine тозагии >98,5% (HPLC)

Тартиби тафтиш
1. Намуди зоҳирӣ
-- Санҷиши визуалӣ
2. Покӣ (HPLC)
2.1 Асбоб
Хроматографияи моеъи баландсифат, детектори PDA.
Тавозуни электронии таҳлилӣ
2.2 Реактив
Ацетонитрил (дараҷаи хроматографӣ), кислотаи trifloroacetic (дараҷаи хроматографӣ)
2.3 Шароитҳои хроматографӣ
2.3.1 Сутун: YMC-ODS-AM, 5 мкл, 250x4,6 мм
2.3.2 Дарозии мавҷи ошкор: INC220nm
Меъёри ҷараён: 1,0 мл/дақ
Андозаи намуна: 10 мкл (маълумот)
Халкунанда: ацетонитрил
Вақти ҷамъоварии маълумот: 25.00мин
2.4 Тайёрии марҳилаи мобилӣ
Марҳилаи мобилии А (0,1% оби кислотаи trifluoroacetic): азхудкунии дақиқ 2. Кислотаи trifluoroacetic Oml-ро бо об то 2000м1 ҳал кунед, хуб омехта кунед ва дегазизатсия кунед;
Марҳилаи мобилии B (0,1% кислотаи трифлуороацетикӣ acetonitril): азхудкунии дақиқ 2.0ml кислотаи trifluoroacetic ба 2000m1 бо acetonitril, омехта ва дегазизатсия илова карда шуд;
2.5 Барномаи градиентии марҳилаи мобилӣ
Вақт (дақ) A% B%
0,00 90 10
13.00 10 90
18.00 10 90
18.01 90 10
23.00 90 10
2.6 Тайёр кардани маҳлули намуна
Намунаи 0,1 г-ро бо ацетонитрил баркашед ва гудохта кунед ва то 100 мл маҳлул кунед, барои истифода хуб ҷунбонед, ё консентратсияи якхела.Дар баробари ду намуна тайёр кунед.
2.7 Муайян кардани намуна
Намунаро мувофиқи тартиби зерини интихоб таҳлил кунед:
Зиёда аз 1 тазриқи маҳлули холӣ
1 ҳалли намунаи дӯзандагӣ 1#
1 ҳалли намунаи дӯзандагӣ 2#
2.8 Ҳисобкунии натиҷаҳо
2.8.1 Усули нормализатсияи минтақаи қулла барои ҳисоб кардани тозагии HPLC бо тарғиби фазои холӣ истифода шуд.
2.8.2 Тағйирёбии миёнаи нисбии тозагии ду сӯзан набояд аз 1% зиёд бошад
2.8.3 Агар натиҷаҳои ҳарду тазриқ ба меъёрҳои қабул мувофиқат кунанд, тозагии миёна ҳамчун натиҷаи ниҳоӣ гирифта мешавад.
3, Нуқтаи обшавӣ -- Асбоби нуқтаи обшавии RY-1
4. Аз даст додани усули муайянкунии хушкшавӣ
4.1 Асбобҳо:
Пеши электрикии термостати-ли хушккунй, аз дах хазор як баланс.
4.2 Тартиб:
Дар шишаи ҳамвор вазн бо сарпӯши даҳони хокӣ бо вазни доимӣ ва аз ҳад зиёд хушкшуда, 1 грамм намунаро (то 0,0001 грамм дақиқ) вазн кунед.Намуна бояд дар қаъри шишаи тарозуи ғафсӣ на бештар аз 10 мм баробар паҳн шавад, дар танӯри доимии барқӣ хушк карда, дар ҳарорати 105-110 ℃ барои 3 соат хушк кунед ва сипас ба ҳуҷраи хушккунӣ гузаред, хунук кунед. ба ҳарорати хонагӣ ва вазн кунед.
Ҳисоб: талафоти вазни хушк %= (M1-M2) ÷M×100
Дар куҷо: M1: массаи намуна ва шишаи вазн пеш аз хушк кардан, г
M2: Массаи намуна ва шишаи вазн пас аз хушккунӣ, г
М: Массаи намуна, грамм
5. Ротатсияи мушаххас
-- Гардиши мушаххас мувофиқи GB/T613-1988 чен карда мешавад
Омодасозии намуна: 0,5000 г намуна ба таври дақиқ баркашида шуда, ба шишаи ҳаҷмии 50 мл тоза ва хушк бо 20 мл этилацетати интиқол дода шуд.Шишаро маҳкам карда, ларзонданд, то этилацетати этилиро ҳал кунад.
Санҷиш: Пеш аз санҷиш нули гироскопро танзим кунед, пас найчаи озмоиширо бо маҳлули намуна пур кунед, кунҷи гардишро сабт кунед ва гардиши хоси намунаро бо формулаи зерин ҳисоб кунед.
[α]20/D= (r×50) ÷(L×W)
Дар куҷо:
[α]20/D: гардиши мушаххаси маҳлули намуна дар 25℃
r: гардиш дар 25℃ барои маҳлули намуна мушоҳида мешавад
50: Ҳаҷми маҳлули намунаро тайёр кунед (мл)
w: Вазни намуна (г)
L: Дарозии қубури оптикӣ (дм)
6. Таҳлили TCL
Омодасозии намуна: Намунаи 0,5000 г дақиқ баркашида шуда, ба як шишаи ҳаҷмии тоза ва хушки 50 мл кӯчонида шуд, 40 мл EtoH илова карда шуд, шиша пӯшонида шуда, барои об шудан ларзиш дода шуд ва сипас ба миқёс бо EtoH маҳлул карда шуд.
Омода кардани намунаи назоратӣ: 0,5000 г намунаро дақиқ баркашида, ба як шишаи ҳаҷмии тоза ва хушки 50 мл кӯчонида, 40 мл об ва 2 қатра кислотаи 6Н гидрохлорид илова карданд, шишаро пӯшониданд ва барои об шудан ҷунбониданд ва сипас ба тарозуи бо ботин ҳалшаванда маҳлул карда шуданд. об.Сипас 0,5 моеъи дар боло зикршударо гирифта, онро бо этанол дар шишаи ҳаҷми 100 мл ба намунаи истинод бо миқёси боқимондаи аминокислотаҳои 1,0% омехта кунед.
Намунаҳои 10 микролитр бо сӯзандоруи микронамуна гирифта шуданд ва намунаҳо дар лавҳаи силиконии GF254 ҷойгир карда шуданд.Барои нуқтаҳои муқоисавӣ мутаносибан 5 микролитр, 10 микролитр ва 15 микролитр плитаҳои холӣ гирифта шуданд.
Воситаи таҳиякунанда: n-butanol: кислотаи сиркои пиряхӣ: об =4:1:1.
Агенти таҳиякунандаи ранг: маҳлули 5% нингидрин метанол.
Амалиёти коркарди ранг: аввал, барои хушк кардани табақчаи силикагели таҳияшуда бо мӯйхушккунак истифода баред, сипас онро ба маҳлули 5% метаноли нингидрин тар кунед ва баъд хушк кунед ва дар оташдонҳои электрикӣ барои рушди ранг дар ҳарорати баланд пазед.
Ҳукм: Ба вақти ранги маҳсулот, андозаи нуқта, консентратсияи ранг ва муқоиса бо маҳсулоти назоратӣ нигаред, ҳукм кунед, ки он дар ин диапазон аст.