L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Санҷиши >98,5% (HPLC) Завод

Усули таҳлили L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Тавсифи: Тақрибан 2 г намунаро дар як табақчаи тоза ва хушк ҷойгир кунед ва намуди намунаро мушоҳида кунед.Ҳисоботдиҳӣ: Дар бораи мушоҳида гузориш диҳед
Муайянкунӣ: Вақти нигоҳ доштани қуллаи асосӣ дар хроматограммаи омодагии озмоиширо бо вақти нигоҳ доштани қуллаи асосӣ дар хроматограммаи таҳияи мутобиқати система, ки дар тозагии хроматографӣ тавассути HPLC гирифта шудааст, муқоиса кунед.
Талафот ҳангоми хушккунӣ: Шишаи шишагини вазндорро дар ҳарорати 105±2℃ барои 30 дақиқа хушк кунед.Ба он иҷозат диҳед, ки то ҳарорати хонагӣ дар эксикатор хунук шавад.Шишаи тарозуро бо стопор дақиқ баркашед ва вазнро сабт кунед (W1).Тақрибан 1 то 2 г миқдори дақиқ баркашидашудаи моддаи санҷиширо ба шишаи вазн гузаронед.Бо нарм, паҳлӯ ба ларзиш, намунаи санҷиширо ба қадри имкон баробар ба чуқурии тақрибан 5 мм тақсим кунед.Шишаи тарозуи пурборро баркашед ва вазнро сабт кунед (W2).Шишаи боркардаро дар танӯри хушккунӣ ҷойгир кунед, стопорро хориҷ кунед ва онро низ дар камера гузоред.Намунаи санҷиширо дар 105±2℃ барои 3 соат хушк кунед.Ҳангоми кушодани камера, шишаро фавран пӯшед ва ба ҳарорати хонагӣ дар эксикатор иҷозат диҳед.Шишаи тарозуро бо стопор дақиқ баркашед ва вазнро дубора барқарор кунед (W3).Фоизи талафоти хушкшавии намунаро бо формулаи зерин ҳисоб кунед:
Талафоти ҳисобкунӣ ҳангоми хушккунӣ (% в/в)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Мазмуни энантиомер аз ҷониби HPLC:
Химиявӣ ва реактивҳо:
Синфи n-Hexane AR
Синфи метанол HPLC
Синфи спирти изопропилии HPLC
Синфи диэтиламин AR
Стандартҳо: стандарти L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl;Стандарти L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl enantiomer
Марҳилаи мобилӣ: Омезиши якхела аз n-гексан, спирти изопропил, метанол ва диэтиламин (65:20:15:0.1 v/v/v/v) тайёр кунед.
Тайёр кардани бланка: 2,5 мл метанолро ба колбаи ченаки 10 мл гузаронед, то ҳаҷм бо фазаи мобилӣ маҳлул кунед ва омехта кунед.
Омодасозии мутобиқати система:
Ба таври дақиқ баркашед ва тақрибан 5 мг аз ҳар яки стандарти L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ва L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl стандарти энантиомерро дар колбаи ҳаҷмии 10 мл интиқол диҳед, тақрибан дар 2,5 мл метанол гудохта, то ҳаҷм бо дастгоҳи мобилӣ об кунед. фаза ва омехта.
Тайёрии санҷиш:
Аниқтар баркашед ва тақрибан 5 мг намунаро ба колбачаи ҳаҷмии 10 молӣ интиқол диҳед, тақрибан дар 2,5 мл метанол об кунед, то ҳаҷм бо фазаи мобилӣ об кунед ва омехта кунед.
Параметрҳои инструменталӣ:
Асбоб: HPLC бо инжектор, насос, детектори ултрабунафш ва сабткунанда муҷаҳҳаз шудааст
Сутун: ChiralPak-IC (4,6 мм x 250 мм) 5 μ ё муодили
Суръати ҷараён: 1,0 мл/дақ
Дарозии мавҷ: 260 нм
Ҳаҷми тазриқ: 10 мкл
Ҳарорати сутун: 25 ℃
Вақти иҷро: 20 дақиқа
Тартиб
Маҳлулҳоро тавре, ки дар пайдарпаии зерин зикр шудааст, ворид кунед.Хроматограммаҳоро сабт кунед ва меъёрҳоро тасдиқ кунед:
Тавсифи тазриќї Шумораи тазриќї Меъёрњо
Омодакунии бланка 1 Дар вақти нигоҳ доштани L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ё энантиомер ҳеҷ гуна қуллаи дахолат набояд мушоҳида карда шавад.
Омодасозии мутобиқати система 1 Ҳал байни L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ва қуллаи энантиомер бояд на камтар аз 2,0 бошад.
Омодасозии санҷиш 1 Барои муайян кардани таркиби энантиомер дар намуна хроматограммаи санҷиширо истифода баред.
Вақти нигоҳдории нисбӣ:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0
Энантиомер Дар бораи 1.11
Вақти нигоҳдории L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl тақрибан 9,8 дақиқа аст.
Ҳисобкунӣ: Дар хроматограммае, ки аз омодагии санҷиш ба даст омадааст, ҳама қуллаҳои интизории L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ва Enantiomer-ро сарфи назар кунед.Дар бораи мундариҷаи энантиомер дар намуна бо усули нормализатсияи минтақа гузориш диҳед.
Покӣ ва наҷосати хроматографӣ аз ҷониби HPLC:
Химиявӣ ва реактивҳо:
Диаммоний фосфати дараҷаи AR
Кислотаи фосфорӣ дараҷаи AR
Синфи метанол HPLC
Оби тозашуда
Стандартҳо
Стандарт L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl
Стандарти 4-Нитро-Л-Фенилаланин моногидрат
Марҳилаи мобилӣ-А
6,6 г фосфати Диаммонийро дар 1000 мл оби тозашуда ҳал кунед.РН-и ин маҳлулро бо кислотаи фосфорӣ ба 6,0 танзим кунед.Филтр ва дегаз.Пеш аз чен кардани рН маҳлул, рН-метрро бо маҳлули буферии стандартии pH 4.01 ВА 7.00 калибр кунед.
Марҳилаи мобилӣ-B
Синфи метанол HPLC
Омодасозии мутобиқати система
Ба таври дақиқ баркашед ва тақрибан 25 мг аз ҳар яки стандарти L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl ва стандарти 4-Nitro-L-Phenylalanine моногидратро дар колбачаи ҳаҷмӣ 50 мл интиқол диҳед, дар зарфи 50 мл об кунед ва то ҳаҷм бо метанол об кунед ва омехта кунед.
Омодасозии санҷиш:
Ба таври дақиқ баркашед ва тақрибан 25 мг намунаро ба колбаи ҳаҷмии 50 мл интиқол диҳед, дар он об кунед ва то ҳаҷм бо метанол об кунед ва омехта кунед.
Параметрҳои инструменталӣ:
Асбоб: HPLC бо инжектор, насос, детектори ултрабунафш ва сабткунанда муҷаҳҳаз шудааст
Сутун: XTerra RP-18 (4,6 мм x 150 мм) 5 μ ё муодили
Суръати ҷараён: 1,0 мл/дақ
Дарозии мавҷ: 265 нм
Ҳаҷми тазриқ: 20 мкл
Ҳарорати сутун: 25 ℃
Вақти иҷро: 45 дақиқа
Барномаи градиент
Вақт (дақ) Марҳилаи мобилӣ-А % Марҳилаи мобилӣ-Б %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Тартиб:
Маҳлулҳоро тавре, ки дар пайдарпаии зерин зикр шудааст, ворид кунед.Хроматограммаҳоро сабт кунед ва меъёрҳоро тасдиқ кунед:
Омодакунии бланка 1 Дар вақти нигоҳ доштани L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl, ягон қуллаи халалдоркунанда набояд мушоҳида шавад.
Омодасозии мутобиқати система 1 Омили пасандоз барои L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl қуллаи бояд на камтар аз 2,0 бошад.
Омодасозии озмоиш 1 Барои муайян кардани тозагии хроматографӣ ва наҷосат аз хроматограммаи санҷишӣ истифода баред.
Вақти нигоҳдории нисбӣ:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0 (вақти нигоҳдорӣ тақрибан 11.4 дақиқа)
4-Nitro-L-Phenylalanine Тақрибан 0,4
Толуол Тақрибан 2.3
Ҳисобҳо:
Дар хроматограммае, ки аз омодасозии санҷиш ба даст омадааст, пас аз ислоҳи холӣ, қуллаи аз ҳисоби толуолро сарфи назар кунед.Дар бораи тозагии хроматографӣ, мундариҷаи 4-Nitro-L-Phenylalanine ва ифлосиҳои умумӣ дар намуна бо усули нормализатсияи минтақа гузориш диҳед.