Ursodeoxycholic Acid (UDCA) CAS 128-13-2 Assay 99.0~101.0%

URSODEOXYCHOLIC ACID
C24H40O4 Mr 392.6[128-13-2]
DEPINISYON
3α,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid.
Nilalaman: 99.0 porsyento hanggang 101.0 porsyento (pinatuyong sangkap).
MGA TAUHAN
Hitsura: puti o halos puting pulbos.
Solubility: halos hindi matutunaw sa tubig, malayang natutunaw sa ethanol (96 porsyento), bahagyang natutunaw sa acetone, halos hindi matutunaw sa methylene chloride.
mp: mga 202 ℃.
PAGKAKAKILANLAN
Unang pagkakakilanlan: A.
Pangalawang pagkakakilanlan: B, C.
A. Infrared absorption spectrophotometry (2.2.24).
Paghahambing: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Suriin ang mga chromatogram na nakuha sa pagsubok para sa karumihan C.
Mga Resulta: ang principal spot sa chromatogram na nakuha gamit ang test solution (b) ay magkapareho sa posisyon, kulay at laki sa principal spot sa chromatogram na nakuha gamit ang reference solution (a).
C. I-dissolve ang humigit-kumulang 10 mg sa 1 mL ng sulfuric acid R. Magdagdag ng 0.1 mL ng formaldehyde solution R at hayaang tumayo ng 5 min.Magdagdag ng 5 mL ng tubig R. Ang suspensyon na nakuha ay berde-asul.
MGA PAGSUSULIT
Tukoy na optical rotation (2.2.7): + 58.0 hanggang + 62.0 (tuyong substance).
I-dissolve ang 0.500 g sa anhydrous ethanol R at ihalo sa 25.0 mL na may parehong solvent.
Karumihan C. Thin-layer chromatography (2.2.27).
Solvent mixture: tubig R, acetone R (10:90 V/V).
Subukan ang solusyon (a).I-dissolve ang 0.40 g ng substance na susuriin sa solvent mixture at ihalo sa 10 mL na may solvent mixture.
Solusyon sa pagsubok (b).Dilute ang 1 mL ng test solution (a) hanggang 10 mL gamit ang solvent mixture.
Reperensyang solusyon (a).I-dissolve ang 40 mg ng ursodeoxycholic acid CRS sa solvent mixture at ihalo sa 10 mL na may solvent mixture.
Reperensyang solusyon (b).I-dissolve ang 20 mg ng lithocholic acid CRS (impurity C) sa solvent mixture at ihalo sa 10.0 mL na may solvent mixture (solusyon A).Dilute ang 2.0 mL ng solusyon na ito sa 100.0 mL na may solvent mixture.
Reperensyang solusyon (c).Sa 5 mL ng solusyon A magdagdag ng 10 mg ng chenodeoxycholic acid CRS (impurity A) at maghalo sa 50 mL na may solvent mixture.
Plate: TLC silica gel plate R.
Mobile phase: glacial acetic acid R, acetone R, methylenechloride R (1:30:60 V/V/V).
Paglalapat: 5μL.
Pag-unlad: higit sa 2/3 ng plato.
Pagpapatuyo: sa 120 ℃ para sa 10 min.
Pag-detect: mag-spray kaagad ng 47.6 g/L na solusyon ng phosphomolybdic acid R sa pinaghalong 1 volume ng sulfuric acid R at 20 volume ng glacial acetic acid R at init sa 120 ℃ hanggang lumitaw ang mga asul na spot sa mas maliwanag na background.
Kaangkupan ng system: reference na solusyon (c):
- ang chromatogram ay nagpapakita ng 2 malinaw na pinaghihiwalay na pangunahing mga spot.
Limitasyon: solusyon sa pagsubok (a):
-impurity C: anumang spot dahil sa impurity C ay hindi mas matindi kaysa sa principal spot sa chromatogram na nakuha gamit ang reference solution (b) (0.1 percent).
Mga Kaugnay na mga sangkap.Liquid chromatography (2.2.29).
Solvent mixture: methanol R, mobile phase (10:90 V/V).
Solusyon sa pagsubok.I-dissolve ang 60 mg ng substance na susuriin sa solvent mixture at ihalo sa 20.0 mL na may solvent mixture.
Reperensyang solusyon (a).I-dissolve ang mga nilalaman ng isang vial ng Ursodeoxycholic Acid para sa pagiging angkop ng system CRS (naglalaman ng mga impurities A at H) sa 1.0 mL ng solvent mixture.
Reperensyang solusyon (b).Dilute ang 1.0 mL ng test solution sa 100.0 mL na may solvent mixture.Dilute ang 1.0 mL ng solusyon na ito sa 10.0 mL na may solvent mixture.
Column:
-laki: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm;
-stationary phase: end-capped octadecylsilyl silica gel para sachromatography R (5 μm);
- temperatura: 40℃ ± 1℃.
Mobile phase: paghaluin ang 30 volume ng acetonitrile R, 37 volume ng isang 0.78 g/L na solusyon ng sodium dihydrogen phosphate R na na-adjust sa pH 3 na may phosphoric acid R, at 40 volume ng methanol R.
Rate ng daloy: 0.8 mL/min.
Detection: refractometer sa 35 ± 1 ℃.
Iniksyon: 150 μL.
Oras ng pagpapatakbo: 4 na beses ang oras ng pagpapanatili ng Ursodeoxycholic Acid.
Pagkilala sa mga impurities: gamitin ang chromatogram na binigay ng ursodeoxycholic acid para sa pagiging angkop ng system CRS at ang chromatogram na nakuha gamit ang reference na solusyon (a) para matukoy ang mga peak dahil sa mga impurities A at H.
Kamag-anak na pagpapanatili na may kaugnayan sa ursodeoxycholic acid (oras ng pagpapanatili = mga 14 min): karumihan H = tungkol sa 0.9;karumihan A = mga 2.8.
Kaangkupan ng system: reference na solusyon (a):
-resolution: minimum na 1.5 sa pagitan ng mga peak dahil sa impurity H at ursodeoxycholic acid.
Mga limitasyon:
- karumihan A: hindi hihigit sa 10 beses ang lugar ng pangunahing peak sa chromatogram na nakuha gamit ang reference na solusyon (b) (1.0 porsyento);
-hindi natukoy na mga dumi: para sa bawat karumihan, hindi hihigit sa lugar ng pangunahing rurok sa chromatogram na nakuha gamit ang reference na solusyon (b) (0.10 porsyento);
- kabuuan: hindi hihigit sa 15 beses ang lugar ng pangunahing peak sa chromatogram na nakuha gamit ang reference na solusyon (b) (1.5 porsyento);
-pagwawalang-bahala na limitasyon: 0.5 beses ang lugar ng pangunahing peak sa chromatogram na nakuha gamit ang reference na solusyon (b) (0.05 porsyento).
Mga mabibigat na metal (2.4.8): maximum na 20 ppm.
Sumusunod ang 1.0 g sa pagsubok C. Ihanda ang reference solution gamit ang 2 mL ng lead standard solution (10 ppm Pb) R.
Pagkawala sa pagpapatuyo (2.2.32): maximum na 1.0 porsyento, tinutukoy sa 1.000 g sa pamamagitan ng pagpapatuyo sa oven sa 105℃.
Sulfated ash (2.4.14): maximum na 0.1 porsyento, tinutukoy sa 1.0 g.
PAGSUSURI
I-dissolve ang 0.350 g sa 50 mL ng ethanol (96 percent) R, na dati nang na-neutralize sa 0.2 mL ng phenolphthalein solution R. Magdagdag ng 50 mL ng tubig R at titrate ng 0.1 M sodium hydroxide hanggang sa makuha ang kulay rosas na kulay.
Ang 1 mL ng 0.1 M sodium hydroxide ay katumbas ng 39.26 mg ng C24H40O4.
MGA DUMI
Tinukoy na mga dumi: A, C.
Iba pang mga nakikitang impurities (ang mga sumusunod na substance ay, kung naroroon sa sapat na antas, ay matutukoy ng isa o iba pang mga pagsubok sa monograph. Nililimitahan ang mga ito ng pangkalahatang criterion sa pagtanggap para sa iba/hindi natukoy na mga impurities at/o ng pangkalahatang monograph Substances. para sa paggamit ng parmasyutiko (2034). Samakatuwid, hindi kinakailangang tukuyin ang mga dumi na ito para sa pagpapakita ng pagsunod. Tingnan din ang 5.10.
Pagkontrol ng mga dumi sa mga sangkap para sa paggamit ng parmasyutiko): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (chenodeoxycholic acid),
B. 3α,7α,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (cholic acid),
C. 3α-hydroxy-5β-cholan-24-oic acid (lithocholic acid),
D. 3α,7β,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (ursocholic acid),
E. 3α,12α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (deoxycholic acid),
F. 3α-hydroxy-7-oxo-5β-cholan-24-oic acid,
G. methyl 3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oate,
H. 3β,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid,
I. 5β-cholane-3α,7β,24-triol.