L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Testi >%98,5 (HPLC) Fabrika

L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) Analiz Yöntemi (CAS: 17193-40-7)
Açıklama: Yaklaşık 2 g numuneyi temiz ve kuru bir petri kabına koyun ve numunenin görünümünü gözlemleyin.Raporlama: Gözlemi bildirin
Tanımlama: HPLC ile kromatografik saflıkta elde edildiği gibi, test preparatının kromatogramındaki ana pikin alıkonma süresi ile sistem uygunluk hazırlığının kromatogramındaki ana pikin alıkonma süresiyle karşılaştırın.
Kurutma Kaybı: Cam kapaklı, sığ tartım şişesini 105±2℃'de 30 dakika kurutun.Bir desikatörde oda sıcaklığına soğumaya bırakın.Tartı şişesini tıpa ile doğru bir şekilde tartın ve ağırlığı kaydedin (W1).Tartım şişesine yaklaşık 1 ila 2 g doğru şekilde tartılmış miktarda test maddesi aktarın.Hafifçe, yandan sallayarak, test örneğini mümkün olduğu kadar eşit bir şekilde yaklaşık 5 mm derinliğe dağıtın.Dolu tartım şişesini tartın ve ağırlığı (W2) kaydedin.Dolu şişeyi, tıpayı çıkararak ve aynı zamanda haznede bırakarak kurutma fırınına yerleştirin.Test örneğini 105±2°C'de 3 saat kurutun.Hazneyi açar açmaz şişeyi hemen kapatın ve bir desikatörde oda sıcaklığına gelmesine izin verin.Tıpalı tartı şişesini doğru bir şekilde tartın ve ağırlığı (W3) geri alın.Aşağıdaki formülü kullanarak numunenin kurutulmasındaki yüzde kaybını hesaplayın:
Hesaplama Kurutma Kaybı (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC ile Enantiyomer İçeriği:
Kimyasal ve Reaktifler:
n-Heksan AR derecesi
Metanol HPLC derecesi
İzopropil Alkol HPLC sınıfı
dietilamin AR sınıfı
Standartlar: L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI standardı;L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI enantiyomer standardı
Mobil Faz: n-Hekzan, İzopropil Alkol, Metanol ve Dietilamin (65:20:15:0,1 v/v/v/v) homojen bir karışımı hazırlayın
Kör Hazırlama: 2,5 ml Metanol'ü 10 ml'lik ölçülü bir şişeye aktarın, mobil faz ile hacme seyreltin ve karıştırın.
Sistem uygunluk hazırlığı:
Hassas bir şekilde tartın ve her bir L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI standardı ve L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI enantiyomer standardının her birinden yaklaşık 5 mg aktarın, 10 ml'lik ölçülü bir şişeye aktarın, yaklaşık 2,5 ml metanol içinde çözün, mobil cihazla hacme seyreltin faz ve karıştırın.
Test hazırlığı:
Hassas bir şekilde tartın ve yaklaşık 5 mg numuneyi 10 mol'lük ölçülü bir şişeye aktarın, yaklaşık 2,5 ml metanol içinde çözün, mobil faz ile hacme seyreltin ve karıştırın.
Enstrümantal parametreler:
Alet: Enjektör, Pompa, UV dedektörü ve Kaydedici ile donatılmış HPLC
Sütun: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ veya eşdeğeri
Akış hızı: 1,0 ml/dakika
dalga boyu: 260nm
Enjeksiyon hacmi: 10 μL
Kolon kovan sıcaklığı: 25 ℃
Çalışma süresi: 20 dakika
prosedür
Solüsyonları aşağıdaki sırayla belirtildiği gibi enjekte edin.Kromatogramları kaydedin ve kriterleri onaylayın:
Enjeksiyonların Açıklaması Enjeksiyon Sayısı Kriter
Kör Hazırlama 1 L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI veya enantiyomerin alıkonma süresinde herhangi bir girişim tepe noktası gözlemlenmemelidir.
Sistem uygunluk hazırlığı 1 L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI ve enantiyomer zirvesi arasındaki çözünürlük 2,0'dan az olmamalıdır
Test hazırlığı 1 Numunedeki enantiyomer içeriğini belirlemek için test kromatogramını kullanın.
Bağıl Tutma Süreleri:
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI 1.0
Enantiomer Yaklaşık 1.11
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI'nin alıkonma süresi yaklaşık 9.8 dakikadır.
Hesaplama: Test hazırlığından elde edilen kromatogramda, L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl ve Enantiyomer dışında kalan tüm pikleri dikkate almayın.Örnekteki enantiyomer içeriğini alan normalleştirme yöntemiyle bildirin.
HPLC ile Kromatografik Saflık ve Safsızlıklar:
Kimyasal ve Reaktifler:
Diamonyum fosfat AR sınıfı
Fosforik asit AR derecesi
Metanol HPLC derecesi
Arıtılmış su
standartlar
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI standardı
4-Nitro-L-Fenilalanin monohidrat standardı
Mobil Faz-A
6.6 g Diamonyum fosfatı 1000 ml saf suda çözün.Fosforik asit ile bu çözeltinin pH'ını 6.0'a ayarlayın.Filtreleyin ve gazı giderin.Solüsyonun pH'ını ölçmeden önce, pH metreyi standart tampon solüsyonu pH 4.01 VE 7.00 ile kalibre edin.
Mobil Faz-B
Metanol HPLC derecesi
Sistem Uygunluk Hazırlığı
Hassas bir şekilde tartın ve her birinden yaklaşık 25 mg L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI standardı ve 4-Nitro-L-Fenilalanin monohidrat standardını 50 ml'lik ölçülü bir şişeye aktarın, içinde çözün ve metanol ile hacme seyreltin ve karıştırın.
Test hazırlığı:
Hassas bir şekilde tartın ve yaklaşık 25 mg numuneyi 50 ml'lik ölçülü bir şişeye aktarın, içinde çözün ve metanol ile hacme seyreltin ve karıştırın.
Enstrümantal parametreler:
Alet: Enjektör, Pompa, UV dedektörü ve Kaydedici ile donatılmış HPLC
Sütun: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ veya eşdeğeri
Akış hızı: 1,0 ml/dakika
dalga boyu: 265nm
Enjeksiyon hacmi: 20 μL
Kolon kovan sıcaklığı: 25 ℃
Çalışma süresi: 45 dakika
Gradyan Programı
Süre (dk) Mobil Faz-A % Mobil Faz-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Prosedür:
Solüsyonları aşağıdaki sırayla belirtildiği gibi enjekte edin.Kromatogramları kaydedin ve kriterleri onaylayın:
Kör Hazırlama 1 L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl'nin alıkonma süresinde müdahale eden bir pik gözlemlenmemelidir.
Sistem uygunluk hazırlığı 1 L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl tepe noktası için kuyruk faktörü 2,0'den az olmamalıdır
Test hazırlığı 1 Kromatografik saflığı ve safsızlıkları belirlemek için test kromatogramını kullanın.
Bağıl Tutma Süreleri:
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCI 1.0 (tutma süresi yaklaşık 11.4 dakika)
4-Nitro-L-Fenilalanin Yaklaşık 0.4
Toluen Yaklaşık 2.3
Hesaplamalar:
Test hazırlığından elde edilen kromatogramda, kör düzeltmeden sonra, toluenden kaynaklanan pik dikkate alınmaz.Alan normalleştirme yöntemiyle numunedeki kromatografik saflığı, 4-Nitro-L-Fenilalanin içeriğini ve toplam safsızlıkları bildirin.