Paklitaksel (Taksol) CAS 33069-62-4 Testi (HPLC) %97,0~102,0

Paklitaksel
C47H51NO14 853.91
Benzenpropanoik asit, -(benzoilamino)--hidroksi-, 6,12b-bis(asetiloksi)-12-(benzoiloksi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahidro-4,11-dihidroksi-4a,8,13,13-tetrametil-5-okso-7,11-metano-1H-siklodeka[3,4]benz[1,2-b]okset-9-il ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodekahidro-4,6, 9,11,12,12b-hekzahidroksi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-siklodeka[3,4]-benz[1,2-b]okset-5-on 6, 12b-diasetat, 12-benzoat, (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilizoserin [33069-62-4] ile 9-ester.
Paklitaksel, susuz, solventsiz bazda hesaplandığında en az yüzde 97,0 ve en fazla yüzde 102,0 C47H51NO14 içerir.
[Dikkat-Paklitaksel sitotoksiktir.Paclitaxel partiküllerinin solunmaması ve cildin maruz kalmaması için büyük özen gösterilmelidir.]
Paketleme ve saklama-Sıkı, ışığa dayanıklı kaplarda muhafaza edin ve kontrollü oda sıcaklığında saklayın.
Etiketleme-Etiketleme, malzemeyi üretmek için kullanılan işlemin türünü ve malzemenin uyduğu İlgili bileşikler testini gösterir.
USP Referans standartları <11>-
USP Endotoksin RS
USP Paclitaxel RS Yapıyı Görmek İçin Tıklayınız
USP Paklitaksel İlgili Bileşik A RS
Sefalomannin.
USP Paklitaksel İlgili Bileşik B RS
10-Deasetil-7-Epipaklitaksel.
USP Paklitaksel Safsızlık Karışımı RS
Paklitaksel ve aşağıdaki ilgili bileşiklerin karışımı: propil analoğu, sefalomannin, sek-bütil analoğu, n-bütil analoğu, benzil analoğu, bakatin VI, pentil analoğu ve 7-epipaklitaksel.
Tanılama-
A: Kızılötesi Soğurma <197K>.
B: Tahlil preparasyonunun kromatogramındaki ana zirvenin alıkonma süresi, Tahlilde elde edildiği gibi Standart preparasyonun kromatogramındakine karşılık gelir.
Spesifik rotasyon 781S: 20'de 49,0 ve 55,0 arasında, susuz, solventsiz bazda hesaplanmıştır.
Test solüsyonu: metanol içinde mL başına 10 mg.
Mikrobiyal sayım testleri <61> ve Belirtilen mikroorganizmalar için testler <62> -Toplam aerobik mikrobiyal sayım, g başına 100 cfu'yu geçmez.Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella türleri ve Escherichia coli'nin yokluğuna yönelik testlerin gerekliliklerini karşılar.
Bakteriyel endotoksinler 85-Mg paklitaksel başına 0,4 USP Endotoksin Ünitesinden fazla içermez.
Su, Yöntem Ic <921>: %4.0'dan fazla değil.
Tutuşma kalıntısı <281>: %0,2'den fazla değil.
Ağır metaller, Yöntem II <231>: %0,002.
Bağıntılı bileşikler-
test 1 (doğal kaynaklardan izole edilmiş olarak etiketlenen malzeme için)-Malzeme bu teste uygunsa, etiketleme, USP İlgili bileşikler Test 1'i karşıladığını gösterir.
Seyreltici-Tahlilde belirtildiği gibi hazırlayın.
Çözüm A-Filtrelenmiş ve gazı giderilmiş asetonitril hazırlayın.
Çözüm B-Filtrelenmiş ve gazı alınmış su hazırlayın.
Mobil faz-Kromatografik sistem için yönlendirildiği gibi, Çözelti A ve Çözelti B'nin değişken karışımlarını kullanın.Gerekirse ayarlamalar yapın (Kromatografi 621 altında Sistem Uygunluğuna bakın).
Sistem uygunluk solüsyonu-Her mL başına yaklaşık 10 µg bilinen konsantrasyonlara sahip bir solüsyon elde etmek için USP Paklitaksel ile İlgili Bileşik A RS ve USP Paklitaksel ile İlgili Bileşik B RS'yi doğru şekilde tartılmış miktarlarda metanol içinde çözün.Bu çözeltinin 5,0 mL'sini 50 mL'lik ölçülü bir balona aktarın, Seyreltici ile hacme seyreltin ve karıştırın.
Standart solüsyon-Sonikasyon yardımıyla, USP Paklitaksel RS'yi Diluent içinde doğru bir şekilde tartılmış miktarda çözün ve mL başına yaklaşık 5 µg bilinen bir konsantrasyona sahip bir solüsyon elde etmek için Diluent ile kantitatif olarak ve gerekirse kademeli olarak seyreltin.
Test solüsyonu-Test hazırlığını kullanın.
Kromatografik sistem (bkz. Kromatografi <621>)-Sıvı kromatograf, 227 nm'lik bir detektör ve 5 µm L43 dolgusu içeren 4,6 mm × 25 cm'lik bir kolon ile donatılmıştır.Akış hızı dakikada yaklaşık 2,6 mL'dir.Sütun sıcaklığı 30°C'de tutulur. Kromatograf aşağıdaki gibi programlanır.
Süre (dakika) Çözüm A (%) Çözüm B (%) Elüsyon
0–35 35 65 izokratik
35–60 35®80 65®20 doğrusal gradyan
60–70 80®35 20®65 doğrusal gradyan
70–80 35 65 izokratik Sistem uygunluk solüsyonunun kromatografisini yapın ve Prosedürde belirtilen şekilde pik yanıtları kaydedin: nispi alıkonma süreleri, paklitaksel ile ilgili bileşik A için yaklaşık 0,78 ve paklitaksel ile ilgili bileşik B için 0,86'dır (paklitaksel için elde edilen alıkonma süresine göre). Test çözümü);ve paklitaksel ile ilgili bileşik A ile paklitaksel ile ilgili bileşik B arasındaki çözünürlük, R, 1.0'dan az değildir.Standart solüsyonu kromatografiye tabi tutun ve en yüksek yanıtları Prosedürde belirtilen şekilde kaydedin: tekrarlanan enjeksiyonlar için bağıl standart sapma %2,0'den fazla değildir.
Prosedür-Kromatografa bir hacim (yaklaşık 15 µL) Test solüsyonu enjekte edin, kromatogramı kaydedin ve ana pikler için alanları ölçün.Paklitaksel bölümündeki her safsızlığın yüzdesini aşağıdaki formüle göre hesaplayın:
100(Cuma / rU)
burada F, her safsızlık zirvesi için nispi tepki faktörüdür (değerler için Tablo 1'e bakınız);ri, her bir safsızlık için tepe alanıdır;ve rU, paklitaksel için tepe noktasıdır.
tablo 1
Bağıl Tutma Süresi Bağıl Yanıt Faktörü (F) Ad Sınırı (%)
0,24 1,29 Bakatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deasetilpaklitaksel 0,5
0,57 1,00 7-Ksilosilpaklitaksel 0,2
0,78 1,26 Sefalomannin (Paklitaksel ile ilgili bileşik A) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihidrosefalomannin a21
0,86 1,00 10-Deasetil-7-epipaklitaksel (Paklitaksel ile ilgili bileşik B) 0,5
1,10 1,00 Benzil analog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehidropaklitaksel C b22
1,40 1,00 7-Episefalomannin 0,3
1,85 1,00 7-Epipaklitaksel 0,5
1 Çözünürlük, mevcut nispi miktarlara bağlı olarak bu zirveler için eksik olabilir;a1 ve a2'nin toplamı %0,5'ten fazla değildir.
2 Çözünürlük, mevcut nispi miktarlara bağlı olarak bu zirveler için eksik olabilir;b1 ve b2'nin toplamı %0,5'ten fazla değildir.
3 İlgili bileşik, benzil analoğuna aşağıdaki kimyasal ad atanmıştır: (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(2-fenilasetilamino)propanoik asit ile Bakatin III 13-ester.
Tablo 1'deki paklitaksel ile ilgili safsızlıklar için limitleri aşmamanın yanı sıra, %0,1'den fazla başka tek safsızlık bulunmaz;ve toplam safsızlıkların %2,0'sinden fazlası bulunmaz.
test 2 (yarı sentetik bir işlemle üretilmiş olarak etiketlenen malzeme için)— Malzeme bu teste uygunsa, etiketleme, USP İlgili bileşikler Test 2'yi karşıladığını gösterir.
Seyreltici-Asetonitril kullanın.
Çözüm A-Filtrelenmiş ve gazı alınmış su ve asetonitril (3:2) karışımı kullanın.
Çözüm B-Filtrelenmiş ve gazı alınmış asetonitril kullanın.
Mobil faz-Kromatografik sistem için yönlendirildiği gibi, Çözelti A ve Çözelti B'nin değişken karışımlarını kullanın.Gerekirse ayarlamalar yapın (Kromatografi 621 altında Sistem Uygunluğuna bakın).
Sistem uygunluk solüsyonu-Doğru şekilde tartılmış miktarlarda USP Paklitaksel RS ve USP Paklitaksel ile İlgili Bileşik B RS'yi, sırasıyla mL başına yaklaşık 0,96 mg ve 0,008 mg bilinen konsantrasyonlara sahip bir solüsyon elde etmek için, gerekirse çalkalayarak ve sonikasyon uygulayarak Seyreltici içinde çözün.
Test solüsyonu-Doğru şekilde tartılmış yaklaşık 10 mg Paclitaxel'i 10 mL'lik ölçülü bir şişeye aktarın, içinde çözün ve Seyreltici ile hacme seyreltin, gerekirse çalkalayın ve sonikasyon yapın ve karıştırın.
Kromatografik sistem (bkz. Kromatografi 621)— Sıvı kromatograf, 227 nm'lik bir detektör ve 3 µm'lik L1 dolgusu içeren 4,6 mm × 15 cm'lik bir kolon ile donatılmıştır.Akış hızı dakikada yaklaşık 1,2 mL'dir.Kolon sıcaklığı 35°C'de tutulur. Kromatograf aşağıdaki gibi programlanır.
Süre (dakika) Çözüm A (%) Çözüm B (%) Elüsyon
0-20 100 0 izokratik
20-60 100®10 0®90 lineer gradyan
60-62 10®100 90®0 lineer gradyan
62-70 100 0 izokratik Sistem uygunluk solüsyonunun kromatografisini yapın ve Prosedür için belirtildiği gibi tepe yanıtları kaydedin: nispi alıkonma süreleri paklitaksel ile ilgili bileşik B için yaklaşık 0.94 ve paklitaksel için 1.0'dır;paklitaksel ile ilgili bileşik B ve paklitaksel arasındaki çözünürlük, R, 1.2'den az değildir;ve tekrarlanan enjeksiyonlar için bağıl standart sapma %2,0'den fazla değildir.
Prosedür-Eşit hacimlerde (yaklaşık 15 µL) Diluent ve Test solüsyonunu kromatografa ayrı ayrı enjekte edin, kromatogramları kaydedin ve tüm pikler için alanları ölçün.Seyrelticiden kaynaklanan pikleri dikkate almayın.Paklitaksel bölümündeki her safsızlığın yüzdesini aşağıdaki formüle göre hesaplayın:
100(Cum / rs)
burada F, her safsızlık için nispi tepki faktörüdür (değerler için Tablo 2'ye bakınız);ri, Test çözeltisinden elde edilen her safsızlık için tepe alanıdır;ve rs, Test çözümünden elde edilen tüm tepe noktalarının alanlarının toplamıdır.
Tablo 2
Bağıl Tutma Süresi Bağıl Yanıt Faktörü (F) Ad Sınırı (%)
0,11 1,24 10-Deasetilbakatin III 0,1
0,20 1,29 Bakatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-Deasetilpaklitaksel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaklitaksel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Oksetan halkası açıldı, asetil ve benzoil taşındı2 x1
0,921 1,00 10-Asetoasetilpaklitaksel x2
0,941 1,00 10-Deasetil-7-epipaklitaksel (Paklitaksel ile ilgili bileşik B) x3
1,37 1,00 7-Epipaklitaksel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidezincirpaklitaksel2 0,5
1,54 1,00 7-Asetilpaklitaksel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-bakatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paklitaksel 0,3
1 Çözünürlük, mevcut nispi miktarlara bağlı olarak bu zirveler için eksik olabilir;x1, x2 ve x3'ün toplamı %0,4'ten fazla değil.
2 Aşağıdaki kimyasal adlar ilgili bileşiklere atanır Fotodegradant;Oksetan halkası açıldı, asetil ve benzoil göç etti;ve 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diasetiloksi-5,13-dihidroksi-4,16,17,17-tetrametil-8-oksa- 3-okso-12-fenilkarboniloksipentasiklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadek-15-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
Oksetan halkası açıldı, asetil ve benzoil göç etti
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diasetiloksi-1,2,4,7-tetrahidroksi-8,12,15,15-tetrametil-9-okso- 4-(fenilkarboniloksimetil)trisiklo[9.3.1.03,8]pentadek-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
10,13-Bissidezincirpaklitaksel
Bakatin III 13-ester ile (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoik asit, 10-ester ile (2S,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino) )propanoik asit
Tablo 2'deki paklitaksel ile ilgili safsızlıklar için limitleri aşmamanın yanı sıra, %0,1'den fazla başka tek safsızlık bulunmaz;ve toplam safsızlıkların %2,0'sinden fazlası bulunmaz.
test 3 (bitki hücresi fermantasyon işlemiyle üretildiği etiketlenen malzeme için)— Malzeme bu teste uygunsa, etiketleme, USP İlgili bileşikler Test 3'ü karşıladığını gösterir.
Çözüm A-Filtrelenmiş ve gazı alınmış bir su ve asetonitril (3:2) karışımı hazırlayın.
Çözüm B-Filtrelenmiş ve gazı giderilmiş asetonitril hazırlayın.
Mobil faz-Kromatografik sistem için yönlendirildiği gibi, Çözelti A ve Çözelti B'nin değişken karışımlarını kullanın.Gerekirse ayarlamalar yapın (Kromatografi 621 altında Sistem Uygunluğuna bakın).
Sistem uygunluk solüsyonu-USP Paklitaksel Safsızlık Karışımı RS'yi asetonitril içinde çözün, gerekirse sonikasyon yaparak mL başına yaklaşık 1 mg bilinen bir konsantrasyona sahip bir solüsyon elde edin.
Standart solüsyon - mL başına yaklaşık 1 mg bilinen bir konsantrasyona sahip bir solüsyon elde etmek için, gerekirse sonikasyon yaparak doğru bir şekilde tartılmış miktarda USP Paklitaksel RS'yi asetonitril içinde çözün.
Test solüsyonu-Doğru şekilde tartılmış yaklaşık 10 mg Paclitaxel'i 10 mL'lik ölçülü bir şişeye aktarın.Çözün ve asetonitril ile hacme seyreltin, gerekirse sonikasyon yapın ve karıştırın.
Kromatografik sistem (bkz. Kromatografi 621)— Sıvı kromatograf, 227 nm'lik bir detektör ve 3 µm'lik L1 dolgusu içeren 4,6 mm × 15 cm'lik bir kolon ile donatılmıştır.Akış hızı dakikada yaklaşık 1,2 mL'dir.Kromatograf aşağıdaki gibi programlanmıştır.
Süre (dakika) Çözüm A (%) Çözüm B (%) Elüsyon
0-28 100 0 izokratik
28-33 100®98 0®2 lineer gradyan
33–58 98®10 2®90 lineer gradyan
58-60 10 90 izokratik
60-63 10®100 90®0 lineer gradyan
63-70 100 0 izokratik Sistem uygunluk solüsyonunun kromatografisini yapın ve Prosedür için belirtilen şekilde pik yanıtları kaydedin: paklitaksel ve benzil analoğu arasındaki çözünürlük, R, 1,8'den az değildir.Standart solüsyonu kromatografiye tabi tutun ve en yüksek yanıtları Prosedürde belirtilen şekilde kaydedin: tekrarlanan enjeksiyonlar için bağıl standart sapma %2,0'den fazla değildir.[not—Pik tanımlama amacıyla, yaklaşık bağıl alıkonma süreleri Tablo 3'te verilmiştir. Göreceli alıkonma süreleri Paklitaksel'e karşı ölçülür.]
Tablo 3
Ad Göreli Tutma Süresi Sınırı (%)
Propil analog1 0,54 0,2
Sefalomannin (Paklitaksel ile ilgili bileşik A) 0,76 0,5
sec-Bütil analog2 0,81 0,2
n-Bütil analog3 0,89 0,1
Benzil analoğu 1.10 0.4
Bakatin VI 1,23 0,2
Pentil analog4 1,31 0,2
7-Epipaklitaksel 1,51 0,4
1 Aşağıdaki kimyasal ad, ilgili Propil analoğuna atanır: Bakatin III 13-ester ile (2R,3S)-3-bütanoilamino-2-hidroksi-3-fenilpropanoik asit.
2 İlgili bileşiğe aşağıdaki kimyasal ad verilir sec-Butil analoğu: Bakatin III 13-ester ile (2R,3S)-2-hidroksi-3-(2-metilbütanoilamino)-3-fenilpropanoik asit.
3 İlgili bileşik n-Butil analoğuna aşağıdaki kimyasal ad atanır: (2S,3S)-2-hidroksi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanoik asit ile Bakatin III 13-ester.
4 İlgili bileşik Pentil analoğuna aşağıdaki kimyasal ad verilir: (2R,3S)-3-(heksanoilamino)-2-hidroksi-3-fenilpropanoik asit ile Bakatin III 13-ester.
Prosedür-Kromatografa bir hacim (yaklaşık 12 µL) Test solüsyonu enjekte edin, kromatogramı kaydedin ve tüm tepe noktaları için alanları ölçün.Paklitaksel bölümündeki her safsızlığın yüzdesini aşağıdaki formüle göre hesaplayın:
100(ri / rU)
burada ri, her bir safsızlığın tepkisidir;ve rU, Test çözümünden elde edilen tüm tepe noktalarının alanlarının toplamıdır.Tablo 3'teki paklitaksel ile ilgili safsızlıklar için limitleri aşmamanın yanı sıra, %0,1'den fazla başka tek safsızlık bulunmaz;ve toplam safsızlıkların %2,0'sinden fazlası bulunmaz.
Tahlil-
Seyreltici-Metanol ve asetik asit (200:1) karışımı hazırlayın.
Mobil faz-Filtrelenmiş ve gazı giderilmiş su ve asetonitril (11:9) karışımı hazırlayın.Gerekirse ayarlamalar yapın (Kromatografi 621 altında Sistem Uygunluğuna bakın).
Standart hazırlık-Gerekirse sonikasyon kullanarak, USP Paklitaksel RS'yi Diluent içinde doğru bir şekilde tartılmış miktarda çözün ve mL başına yaklaşık 1 mg bilinen bir konsantrasyona sahip bir solüsyon elde etmek için Diluent ile kantitatif olarak ve gerekirse kademeli olarak seyreltin.
Tahlil hazırlama-Doğru şekilde tartılmış yaklaşık 10 mg Paclitaxel'i 10 mL'lik ölçülü bir şişeye aktarın.Gerekirse sonikasyon kullanarak Seyreltici içinde çözün, Seyreltici ile hacme seyreltin ve karıştırın.
Kromatografik sistem (bkz. Kromatografi <621>)-Sıvı kromatograf, 227 nm'lik bir detektör ve 5 µm L43 dolgusu içeren 4,6 mm × 25 cm'lik bir kolon ile donatılmıştır.Akış hızı dakikada yaklaşık 1,5 mL'dir.Standart preparasyonun kromatografisini yapın ve en yüksek tepkileri Prosedürde belirtilen şekilde kaydedin: kuyruk faktörü 0,7 ile 1,3 arasındadır;ve tekrarlanan enjeksiyonlar için bağıl standart sapma %1,5'ten fazla değildir.
Prosedür-Standart preparattan ve Tahlil preparatından eşit hacimlerde (yaklaşık 10 µL) kromatografa ayrı ayrı enjekte edin, kromatogramları kaydedin ve ana pikler için alanları ölçün.Aşağıdaki formülle alınan Paklitaksel kısmındaki C47H51NO14 miktarını mg cinsinden hesaplayın:
10C(rU / rS)
burada C, Standart preparasyonda USP Paclitaxel RS'nin mL başına mg cinsinden konsantrasyonudur;ve rU ve rS sırasıyla Tahlil preparasyonundan ve Standart preparasyondan elde edilen paklitaksel için tepe tepkileridir.