Ursodeoksikolik Asit (UDCA) CAS 128-13-2 Testi %99,0~101,0

URSODEOKSİKOLİK ASİT
C24H40O4 Bay 392.6[128-13-2]
TANIM
3α,7β-Dihidroksi-5β-kolan-24-oik asit.
İçerik: yüzde 99,0 ila yüzde 101,0 (kurutulmuş madde).
KARAKTERLER
Görünüm: beyaz veya neredeyse beyaz toz.
Çözünürlük: pratikte suda çözünmez, etanolde serbestçe çözünür (%96), asetonda az çözünür, metilen klorürde pratik olarak çözünmez.
mp: yaklaşık 202℃.
TANILAMA
İlk kimlik: A.
İkinci tanımlama: B, C.
A. Kızılötesi absorpsiyon spektrofotometrisi (2.2.24).
Karşılaştırma: Ursodeoksikolik Asit CRS.
B. Testte elde edilen kromatogramları safsızlık açısından inceleyin C.
Sonuçlar: test solüsyonu (b) ile elde edilen kromatogramdaki ana nokta, referans solüsyonu (a) ile elde edilen kromatogramdaki ana nokta ile konum, renk ve boyut bakımından benzerdir.
C. 1 mL sülfürik asit R içinde yaklaşık 10 mg çözün. 0,1 mL formaldehit solüsyonu R ekleyin ve 5 dakika beklemeye bırakın.5 mL su R ekleyin. Elde edilen süspansiyon yeşilimsi mavidir.
TESTLER
Spesifik optik dönüş (2.2.7): + 58,0 ila + 62,0 (kurutulmuş madde).
0,500 g susuz etanol R içinde çözün ve aynı çözücü ile 25,0 mL'ye seyreltin.
Safsızlık C. İnce tabaka kromatografisi (2.2.27).
Çözücü karışımı: su R, aseton R (10:90 V/V).
Test çözümü (a).0,40 g incelenecek maddeyi solvent karışımında çözün ve solvent karışımı ile 10 mL'ye seyreltin.
Test çözümü (b).1 mL test solüsyonunu (a) solvent karışımıyla 10 mL'ye seyreltin.
Referans çözüm (a).40 mg ursodeoksikolik asit CRS'yi solvent karışımında eritin ve solvent karışımı ile 10 mL'ye seyreltin.
Referans çözüm (b).20 mg litokolik asit CRS'yi (safsızlık C) solvent karışımı içinde çözün ve solvent karışımı (çözelti A) ile 10.0 mL'ye seyreltin.Bu çözeltinin 2,0 mL'sini solvent karışımıyla 100,0 mL'ye seyreltin.
Referans çözüm (c).5 mL A çözeltisine 10 mg kenodeoksikolik asit CRS (safsızlık A) ekleyin ve solvent karışımıyla 50 mL'ye seyreltin.
Plaka: TLC silika jel plakası R.
Mobil faz: buzlu asetik asit R, aseton R, metilenklorür R (1:30:60 V/V/V).
Uygulama: 5μL.
Gelişim: Plakanın 2/3'ünden fazlası.
Kurutma: 120°C'de 10 dakika.
Tespit: hemen 1 hacim sülfürik asit R ve 20 hacim buzlu asetik asit R karışımı içinde 47,6 g/L fosfomolibdik asit R çözeltisi püskürtün ve daha açık bir arka plan üzerinde mavi noktalar görünene kadar 120°C'de ısıtın.
Sistem uygunluğu: referans çözüm (c):
- kromatogram açıkça ayrılmış 2 ana nokta gösterir.
Limit: test çözümü (a):
- safsızlık C: kirlilik C'den kaynaklanan herhangi bir nokta, referans solüsyon (b) ile elde edilen kromatogramdaki ana noktadan daha yoğun değildir (% 0,1).
İlgili maddeler.Sıvı kromatografi (2.2.29).
Çözücü karışımı: metanol R, hareketli faz (10:90 V/V).
Test çözümü.60 mg incelenecek maddeyi solvent karışımında çözün ve solvent karışımı ile 20.0 mL'ye seyreltin.
Referans çözüm (a).Sistem uygunluğu CRS (a ve H safsızlıkları içeren) için bir Ursodeoksikolik Asit şişesinin içeriğini 1,0 mL solvent karışımında çözün.
Referans çözüm (b).1,0 mL test solüsyonunu solvent karışımıyla 100,0 mL'ye seyreltin.Bu çözeltinin 1,0 mL'sini solvent karışımıyla 10,0 mL'ye seyreltin.
Kolon:
-boyut: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-sabit faz: için uç başlıklı oktadesilsilil silika jelkromatografi R (5 um);
- sıcaklık: 40°C ± 1°C.
Mobil faz: 30 hacim asetonitril R, fosforik asit R ile pH 3'e ayarlanmış 37 hacim 0,78 g/L sodyum dihidrojen fosfat R çözeltisi ve 40 hacim metanol R karıştırın.
Akış hızı: 0,8 mL/dak.
Algılama: 35 ± 1℃'de refraktometre.
Enjeksiyon: 150 uL.
Çalışma süresi: Ursodeoksikolik Asidin alıkonma süresinin 4 katı.
Safsızlıkların tanımlanması: CRS sistem uygunluğu için ursodeoksikolik asit ile sağlanan kromatogramı ve A ve H safsızlıklarından kaynaklanan pikleri belirlemek için referans çözelti (a) ile elde edilen kromatogramı kullanın.
Ursodeoksikolik aside göre bağıl tutma (tutma süresi = yaklaşık 14 dakika): safsızlık H = yaklaşık 0.9;safsızlık A = yaklaşık 2.8.
Sistem uygunluğu: referans çözüm (a):
-çözünürlük: safsızlık H ve ursodeoksikolik asit nedeniyle tepe noktaları arasında minimum 1,5.
Sınırlar:
- safsızlık A: referans solüsyon (b) ile elde edilen kromatogramdaki ana pik alanının 10 katından fazla olmamalıdır (yüzde 1,0);
-belirtilmemiş safsızlıklar: her bir safsızlık için, referans solüsyon (b) ile elde edilen kromatogramdaki ana tepe noktasının alanından (yüzde 0,10) fazla değil;
- toplam: referans solüsyon (b) ile elde edilen kromatogramdaki ana pik alanının 15 katından fazla olmamalıdır (yüzde 1,5);
-ihmal limiti: referans solüsyon (b) ile elde edilen kromatogramdaki ana pik alanının 0,5 katı (yüzde 0,05).
Ağır metaller (2.4.8): maksimum 20 ppm.
1,0 g test C ile uyumludur. 2 mL kurşun standart solüsyonu (10 ppm Pb) R kullanarak referans solüsyonu hazırlayın.
Kurutma kaybı (2.2.32): maksimum yüzde 1.0, 1.000 g'de 105°C'de bir etüvde kurutma ile belirlenir.
Sülfatlanmış kül (2.4.14): maksimum yüzde 0.1, 1.0 g'da belirlendi.
TAHLİL
0,350 g 50 mL etanol (%96) R içinde eritilir, önceden 0,2 mL fenolftalein çözeltisi R'ye nötralize edilir. 50 mL su R eklenir ve pembe bir renk elde edilene kadar 0,1 M sodyum hidroksit ile titre edilir.
1 mL 0,1 M sodyum hidroksit, 39,26 mg C24H40O4'e eşdeğerdir.
KİRLİLİKLER
Belirtilen safsızlıklar: A, C.
Diğer tespit edilebilir safsızlıklar (aşağıdaki maddeler, yeterli seviyede mevcut olmaları halinde, monograftaki testlerden biri veya diğeriyle tespit edilebilir. Diğer/belirtilmemiş safsızlıklar için genel kabul kriterleri ve/veya genel monograf tarafından sınırlandırılırlar. Maddeler farmasötik kullanım için (2034) Bu nedenle uygunluğun gösterilmesi için bu safsızlıkların tanımlanması gerekli değildir.Ayrıca bkz. 5.10.
Farmasötik kullanım için maddelerdeki safsızlıkların kontrolü): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihidroksi-5β-kolan-24-oik asit (kenodeoksikolik asit),
B. 3α,7α,12α-trihidroksi-5β-kolan-24-oik asit (kolik asit),
C. 3α-hidroksi-5β-kolan-24-oik asit (litokolik asit),
D. 3α,7β,12α-trihidroksi-5β-kolan-24-oik asit (ursocholic asit),
E. 3α,12α-dihidroksi-5β-kolan-24-oik asit (deoksikolik asit),
F. 3α-hidroksi-7-okso-5β-kolan-24-oik asit,
G. metil 3α,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oat,
H. 3β,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oik asit,
I. 5β-kolan-3α,7β,24-triol.