Гемцитабіну гідрохлорид CAS 122111-03-9 Стандарт API USP35

Гемцитабіну гідрохлорид
C9H11F2N3O4·HCl 299,66
Цитидин, 2'-дезокси-2',2'-дифлуро-, моногідрохлорид.
2'-Дезокси-2',2'-дифтороцитидин моногідрохлорид (β-ізомер) [122111-03-9].
» Гемцитабіну гідрохлорид містить не менше ніж 97,5 відсотка та не більше 101,5 відсотка C9H11F2N3O4·HCl, розраховане на основі «як є».
[Обережно: гемцитабіну гідрохлорид є потужним цитотоксичним агентом.Необхідно бути дуже обережним, щоб запобігти вдиханню частинок і впливу на шкіру.]
Упаковка та зберігання - зберігати в герметичній тарі.
Маркування. Якщо препарат призначений для приготування лікарських форм для ін’єкцій, на етикетці зазначено, що він стерильний або має бути підданий подальшій обробці під час приготування лікарських форм для ін’єкцій.
Довідкові стандарти USP <11>-
USP Цитозин RS
USP Ендотоксин RS
USP гемцитабіну гідрохлорид RS
Ідентифікація-
A: Інфрачервоне поглинання <197K>.
B: Він відповідає вимогам випробувань на хлорид <191>.
Питоме обертання <781S>: між +43 і +50, при 20.
Досліджуваний розчин: 10 мг на мл.
pH <791>: від 2,0 до 3,0, у розчині, що містить 10 мг на мл.
Залишок при прожарюванні <281>: не більше 0,1%.
Важкі метали, метод I <231>: 0,001%.
Хроматографічна чистота-
Розчин A- Продовжуйте, як зазначено для рухомої фази в аналізі.
Розчин B-Приготуйте відфільтрований і дегазований метанол.
Рухома фаза. Використовуйте змінні суміші розчину A та розчину B відповідно до вказівок хроматографічної системи.За потреби внесіть коригування (див. Придатність системи у розділі Хроматографія 621).
Розчин для перевірки придатності системи - продовжуйте, як зазначено в аналізі.
Стандартний розчин. Розчиніть точно зважену кількість USP гемцитабіну гідрохлориду RS та USP Cytosine RS у воді та розведіть кількісно та поетапно, якщо необхідно, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 2 мкг на мл кожного.
Досліджуваний розчин. Перенесіть близько 50 мг гемцитабіну гідрохлориду, точно зважених, у 25-мл мірну колбу, розчиніть і розведіть водою до об’єму та перемішайте.
Хроматографічна система (див. Хроматографія 621) - продовжуйте, як зазначено в розділі «Аналіз».Хроматограф програмується наступним чином.
Час (хвилини) Розчин A (%) Розчин B (%) Елюювання
0–8 97 3 ізократичний
8–13 97®50 3®50 лінійний градієнт
13–20 50 50 рівнократний
20–25 50®97 50®3 повторне врівноваження
Хроматографуйте розчин для перевірки придатності системи та зафіксуйте пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносний час утримання становить приблизно 0,5 для -аномера гемцитабіну та 1,0 для гемцитабіну;роздільна здатність, R, між гемцитабін-аномером і гемцитабіном становить не менше 8,0;а коефіцієнт хвоста для гемцитабіну становить не більше 1,5.Хроматографуйте стандартний розчин і запишіть пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносний час утримання становить приблизно 0,1 для цитозину та 1,0 для гемцитабіну;відносне стандартне відхилення для повторних ін’єкцій становить не більше 2,0%.
Процедура. Окремо введіть об’єм (приблизно 20 мкл) стандартного розчину та досліджуваного розчину в хроматограф, запишіть хроматограму та виміряйте всі пікові відповіді.Обчислюємо відсоток цитозину у взятій порції гемцитабіну за формулою:
2,5 (Cc / W) (rt / rs)
де Cc — концентрація USP Cytosine RS у стандартному розчині, мкг на мл;W — маса взятого гемцитабіну в мг;rt – пікова відповідь для цитозину в досліджуваному розчині;rs – відповідь на цитозин у стандартному розчині: виявляється не більше 0,1% цитозину.Обчисліть відсоток кожної домішки, окрім цитозину, у частці гемцитабіну, взятої за формулою:
2,5(Cs / W)(ri / rs)
де Cs — концентрація USP гемцитабіну гідрохлориду RS у стандартному розчині, мкг на мл;W — маса взятого гемцитабіну в мг;ri – піковий відгук для кожної домішки в досліджуваному розчині;rs – відповідь на гемцитабін у стандартному розчині: не більше 0,1% гемцитабіну -аномера або будь-якої іншої окремої домішки виявлено;а сума всіх домішок не більше 0,2%.Виключіть із суми всіх домішок будь-які піки, які знаходяться нижче межі кількісного визначення (0,02%).
Інші вимоги. Якщо на етикетці вказано, що гемцитабін гідрохлорид стерильний, він відповідає вимогам щодо бактеріальних ендотоксинів і стерильності під гемцитабіном для ін’єкцій.Якщо на етикетці вказано, що гемцитабіну гідрохлорид необхідно піддати подальшій обробці під час приготування ін’єкційних лікарських форм, він відповідає вимогам до бактеріальних ендотоксинів у Гемцитабіну для ін’єкцій.
аналіз-
Рухома фаза. Приготуйте відфільтрований і дегазований розчин, що містить 13,8 г одноосновного фосфату натрію та 2,5 мл фосфорної кислоти в 1000 мл води.[Примітка. pH цього розчину становить від 2,4 до 2,6.]
Розчин для перевірки придатності системи. Перемістіть приблизно 10 мг гемцитабіну гідрохлориду в невеликий флакон, додайте 4 мл розчину, що містить 168 мг гідроксиду калію на мл метанолу, щільно закрийте кришкою та обробіть ультразвуком.Нагрійте при 55°С протягом 6-16 годин, дайте охолонути та перенесіть вміст у 100-мл мірну колбу з послідовними промиваннями 1% (об./об.) фосфорної кислоти.Розведіть 1% фосфорною кислотою до об’єму і перемішайте.[Примітка. Цей розчин містить приблизно 0,02 мг на мл α-аномера гемцитабіну.]
Стандартна підготовка. Розчиніть точну зважену кількість USP гемцитабіну гідрохлориду RS у воді та кількісно та поетапно, якщо необхідно, розбавте водою, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 0,1 мг на мл.
Підготовка до аналізу. Перенесіть близько 20 мг гемцитабіну гідрохлориду, точно зважених, у 200-мл мірну колбу, розчиніть і розведіть водою до об’єму та перемішайте.
Хроматографічна система (див. Хроматографія <621>) - Рідинний хроматограф оснащений 275-нм детектором і колонкою 4,6 мм × 25 см, яка містить 5-мкм насадку L7.Швидкість потоку становить близько 1,2 мл на хвилину.Хроматографуйте розчин для перевірки придатності системи та зафіксуйте пікові відповіді, як зазначено в Процедурі: роздільна здатність, R, між -аномером гемцитабіну та гемцитабіном становить не менше 8,0;і коефіцієнт хвоста, визначений для гемцитабіну, не перевищує 1,5.Хроматографуйте стандартний препарат і запишіть пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносне стандартне відхилення для повторних ін’єкцій становить не більше 1,0%.
Процедура. Окремо введіть рівні об’єми (приблизно 20 мкл) стандартного препарату та препарату для аналізу в хроматограф, запишіть хроматограми та виміряйте відповіді для основних піків.Обчисліть кількість, мг, C9H11F2N3O4·HCl у частці гемцитабіну гідрохлориду за формулою:
200C(rU / rS)
де С — концентрація гемцитабіну гідрохлориду RS у стандартному препараті, у мг на мл;і rU та rS – пікові відповіді, отримані від препарату для аналізу та стандартного препарату відповідно.