Орлістат CAS 96829-58-2 API Препарат для зниження ваги Чистота 98,0~101,5%

Орлістат
C29H53NO5 495,73
1-лейцин, N-форміл-, 1-[(3-гексил-4-оксо-2-оксетаніл)метил]додециловий ефір, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-Форміл-1-лейцин, складний ефір з (3S,4S)-3-гексил-4-[(2S)-2-гідрокситридецил]-2-оксетаноном [96829-58-2].
ВИЗНАЧЕННЯ
Орлістат містить 98,0 % і 101,5 % C29H53NO5 у розрахунку на безводну речовину без розчинників.
ІДЕНТИФІКАЦІЯ
• A. Інфрачервоне поглинання <197M>
• B. Час утримування основного піку розчину зразка відповідає часу утримування стандартного розчину, отриманого під час аналізу.
АНАЛІЗ
• Процедура
[Примітка. Уникайте використання пластикових колб для приготування або зберігання будь-якого розчину в цьому аналізі.]
Рухома фаза: ацетонітрил, фосфорна кислота та вода (860:0,05:140)
Стандартний розчин: 0,5 мг/мл USP Orlistat RS у рухомій фазі.Введіть відразу після приготування або зберігайте при 5.
Розчин зразка: 0,5 мг/мл орлістату в рухомій фазі.Введіть відразу після приготування або зберігайте при 5.
Хроматографічна система
(Див. Хроматографія <621>, Придатність системи.)
Режим: LC
Детектор: UV 195
Колонка: 3,9 мм × 15 см;4-мкм упаковка L1
Швидкість потоку: 1,0 мл/хв
Розмір ін'єкції: 20 мкл
Придатність системи
Зразок: Стандартний розчин
Вимоги до придатності
Відносне стандартне відхилення: NMT 2,0%
Аналіз
Зразки: стандартний розчин і розчин зразка
Обчисліть процентний вміст орлістату (C29H53NO5) у прийнятій порції орлістату:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = піковий відгук розчину зразка
rS = піковий відгук стандартного розчину
CS = концентрація USP Orlistat RS у стандартному розчині (мг/мл)
CU = концентрація орлістату в розчині зразка (мг/мл)
Критерії прийнятності: 98,0%-101,5% у безводному розрахунку без розчинників
ДОМІШКИ
Неорганічні домішки
• Залишок після прожарювання <281>: NMT 0,1%
• Важкі метали, метод II <231>: 20 ppm
Органічні домішки
• Процедура 1: обмеження спорідненої сполуки A орлістату
Стандартний розчин: 0,1 мг/мл USP Orlistat Related Compound A RS в ацетоні
Розчин зразка: 50 мг/мл орлістату в ацетоні
Хроматографічна система
(Див. Хроматографія <621>, Тонкошарова хроматографія.)
Режим: TLC
Адсорбент: 0,25 мм шар хроматографічної суміші силікагелю
Об'єм нанесення: 10 мкл
Система проявних розчинників: толуол і етилацетат (4:1)
Розчин для виявлення: перенесіть 2,5 г фосфорномолібденової кислоти та 1 г сульфату церію в мірну колбу на 100 мл, розчиніть і розведіть метанолом до об’єму.
Аналіз
Зразки: стандартний розчин і розчин зразка
Зніміть пластину та ретельно висушіть її на повітрі.Обприскайте висушену пластину розчином для виявлення та поставте пластину в духовку при 120°С на 30 хв.
Критерії прийнятності: будь-яка вторинна пляма з розчину зразка, що відповідає спорідненій з орлістатом сполуки А, не є більш інтенсивною, ніж відповідна пляма зі стандартного розчину (0,2%).
• Процедура 2: обмеження спорідненої сполуки B з орлістатом
Стандартний розчин: 0,025 мг/мл USP Orlistat Related Compound B RS у метиленхлориді
Розчин зразка: 50 мг/мл орлістату в метиленхлориді
Розчин зразка з додаванням: 50 мг/мл орлістату в стандартному розчині
Хроматографічна система
(Див. Хроматографія <621>, Придатність системи.)
Режим: GC
Детектор: полум'яна іонізація
Колонка: плавлений кремнезем 0,32 мм x 30 м, покритий нерухомою фазою G27 розміром 0,25 мкм
Температура колонки: дивіться таблицю температурних програм нижче.
Початкова температура () Зміна температури (/хв) Кінцева температура () Час витримки при кінцевій температурі (хв)
50 4 170 -
170 30 300 30
Температура
Інжектор: 270
Детектор: 280
Газ-носій: гелій
Швидкість потоку: 30 мл/хв
Співвідношення: 10:1
Розмір ін'єкції: 2 мкл
Придатність системи
Зразок: Стандартний розчин
Вимоги до придатності
Відносне стандартне відхилення: NMT 10,0%
Аналіз
Зразки: розчин зразка та розчин зразка з додаванням
Обчисліть відсоток спорідненої орлістату сполуки В у прийнятій порції орлістату:
Результат = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = пік відповіді спорідненої орлістату сполуки В із розчину зразка
rSP = пікова відповідь спорідненої з орлістатом сполуки В із розчину зразка з додаванням
CS = концентрація USP Orlistat Related Compound B RS у стандартному розчині (мг/мл)
CT = концентрація орлістату в розчині зразка з додаванням (мг/мл)
Критерії прийнятності: виявлено NMT 0,05% спорідненої сполуки B орлістату.
• Процедура 3
[Примітка. Уникайте використання пластикових колб для приготування або зберігання будь-якого розчину в цьому аналізі.]
Рухома фаза, стандартний розчин і розчин зразка: підготуйте, як зазначено в аналізі.
Системний розчин: 10 мкг/мл USP Orlistat RS, 0,1 мкг/мл USP Orlistat Related Compound C RS та 0,25 мкг/мл USP Orlistat Related Compound D RS у рухомій фазі
Хроматографічна система
(Див. Хроматографія <621>, Придатність системи.)
Продовжуйте, як зазначено в аналізі, за винятком хроматографії розчину для визначення придатності системи.
Придатність системи
Зразок: рішення щодо придатності системи
Вимоги до придатності
Співвідношення сигнал/шум: NLT 3 для піків спорідненої сполуки С орлістату та сполуки D орлістату
Відносне стандартне відхилення: NMT 10,0% для піку орлістату
Аналіз
Зразки: стандартний розчин і розчин зразка
Обчисліть відсоток кожної домішки у взятій порції орлістату:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = піковий відгук для кожної окремої домішки з розчину зразка
rS = пікова відповідь USP Orlistat RS зі стандартного розчину
CS = концентрація USP Orlistat RS у стандартному розчині (мг/мл)
CU = концентрація орлістату в розчині зразка (мг/мл)
F = відносний коефіцієнт відгуку, як наведено в Таблиці домішок 1
Критерії прийнятності: Див. Таблицю домішок 1.
Таблиця домішок 1
Назва Відносний час утримання Відносний коефіцієнт відгуку Критерії прийнятності, NMT (%)
Formylleucinea 0,10 4,0 0,2
Орлістат споріднена сполука C 0,13 33 0,05
Орлістат з відкритим кільцем епімерб 0,44 1,0 0,2
Пов’язана з орлістатом сполука D* 0,90 – Розраховано в
Процедура 4
Орлістат з відкритим кільцем амід* 0,90 - Розраховано в
Процедура 4
Орлістат 1,00 - -
d-лейцин орлістат 1,18 1,0 0,2
Індивідуальна неідентифікована домішка - 1,0 0,1
* Коелюти в цій системі РХ, визначені за допомогою процедури 4.
N-Форміл-1-лейцин.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-Форміламіно-4-метил-пентаноїлокси]-2-гексил-3-гідроксигексадеканова кислота.
c N-Форміл-1-лейцин (S)-1-[(2S,3S)-2-гідрокси-3-[1-феніл-R-етилкарбомоїл]ноніл]додециловий ефір.
d N-Форміл-d-лейцин (S)-1-[[(2S,3S)-3-гексил-4-оксо-2-оксетаніл]метил]додециловий ефір або енантіомер.
• Процедура 4: обмеження спорідненої сполуки D орлістату
Рухома фаза: метанол і вода (83:17)
Системний розчин: 4 мг/мл USP Orlistat RS та 2,4 мкг/мл USP Orlistat Related Compound D RS в ацетонітрилі відповідно
Стандартний розчин: 5,0 мг/мл USP Orlistat RS в ацетонітрилі
Розчин зразка: 5,0 мг/мл орлістату в ацетонітрилі
Хроматографічна система
(Див. Хроматографія 621, Придатність системи.)
Режим: LC
Детектор: 205 нм
Колонка: 4,0 мм × 25 см;5-мкм упаковка L7
Швидкість потоку: 0,6 мл/хв
Розмір ін'єкції: 20 мкл
Придатність системи
Зразок: рішення щодо придатності системи
Вимоги до придатності
Співвідношення сигнал/шум: NLT 3 для піку сполуки D, пов’язаної з орлістатом
Відносне стандартне відхилення: NMT 10,0% для піку орлістату
Аналіз
Зразки: стандартний розчин і розчин зразка
Обчисліть відсоток кожної домішки у взятій порції орлістату:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = піковий відгук для кожної окремої домішки з розчину зразка
rS = пікова відповідь для USP Orlistat RS зі стандартного розчину
CS = концентрація USP Orlistat RS у стандартному розчині (мкг/мл)
CU = концентрація орлістату в розчині зразка (мкг/мл)
F = відносний коефіцієнт відгуку, отриманий у таблиці домішок 2
Критерії прийнятності: Див. Таблицю домішок 2.
Таблиця домішок 2
Назва Відносний час утримання Відносний коефіцієнт відгуку Критерії прийнятності, NMT (%)
Орлістат споріднена сполука D 0,94 1,0 0,2
Орлістат 1,00 - -
Орлістат амід відкритого кільця 1,25 4,3 0,1
N-Форміл-1-лейцин (S)-1-[(2S,3S)-2-гідрокси-3-[1-феніл-R-етилкарбомоїл]ноніл]-додециловий ефір.
• Процедура 5: Обмеження спорідненої сполуки E орлістату
Буфер: 0,4 N розчин борату, доведений до рН 10,2
Деривітуючий агент: розчин о-фтальдегіду (OPA).[Примітка. У разі неможливості комерційного отримання деривітуючий агент можна приготувати по 1% 3-меркаптопропіонової кислоти та о-фтальдіальдегіду в 0,4 М боратному буферному розчині.]
Розчин A: Перенесіть 4,1 г тригідрату ацетату натрію та 40 мг етилендіамінтетраоцтової кислоти (EDTA) у мірну колбу на 1 л.Розчиніть у 950 мл води та доведіть 0,1 N гідроксидом натрію до рН 7,2.Розведіть водою до об’єму, додайте 2,5 мл тетрагідрофурану та перемішайте.Відфільтрувати та дегазувати.
Розчин Б: Перенесіть 2,7 г тригідрату ацетату натрію та 40 мг ЕДТА в мірну колбу на 1 л.Розчиніть у 200 мл води та доведіть 0,1 N гідроксидом натрію до рН 7,2.Додають 800 мл ацетонітрилу, фільтрують і дегазують.
Мобільна фаза: дивіться таблицю градієнтів нижче.
Час (хв) Розчин A (%) Розчин B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3.3
Стандартний розчин: перенесіть зважену кількість приблизно 0,2 мг спорідненої сполуки E RS орлістату USP у 20-мл флакон для вільного простору.Додайте 10 мл 4N гідроксиду натрію та закрийте флакон.Нагрійте флакон до 100 протягом 1 години, потім дайте охолонути до кімнатної температури.Перенесіть 2 мл отриманого розчину в мірну колбу на 50 мл і доведіть водою до об’єму.До 0,5 мл цього розчину додайте 2,0 мл буфера та 0,5 мл дериватизуючого агента.
Зразок розчину: виконайте вказівки для стандартного розчину, але натомість використовуйте 25 мг орлістату, щоб замінити 0,2 мг USP Orlistat Related Compound E RS.
Хроматографічна система
(Див. Хроматографія <621>, Придатність системи.)
Режим: LC
Детектор: Флуоресценція 340 нм (збудження);450 нм (випромінювання)
Стовпці
Захист: 2,1 мм × 2 см;50-мкм упаковка L1
Аналітичний: 2,1 мм × 20 см;упаковка L1
Швидкість потоку: 0,5 мл/хв
Розмір ін'єкції: 20 мкл
Придатність системи
Зразок: Стандартний розчин
Вимоги до придатності
Відносне стандартне відхилення: NMT 6,0% для піку спорідненої сполуки Е орлістату
Аналіз
Зразки: стандартний розчин і розчин зразка
Обчисліть відсоток цієї домішки у взятій порції орлістату:
Результат = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = пікова відповідь для спорідненої орлістату сполуки Е в розчині зразка
rS = пікова відповідь для спорідненої сполуки орлістату USP E RS у стандартному розчині
CS = концентрація USP Orlistat Related Compound E RS у стандартному розчині (мг/мл)
CU = концентрація орлістату в розчині зразка (мг/мл)
Критерії приймання
Індивідуальна домішка: знайдено NMT 0,2% спорідненої сполуки E орлістату.
Загальна кількість домішок: виявлено NMT 1,0% від загальної кількості домішок, результати для процедур 1, 2, 3, 4 і 5 додаються.
СПЕЦИФІЧНІ ТЕСТИ
• Оптичне обертання, специфічне обертання <781>
Розчин зразка: 30 мг/мл у зневодненому спирті
Критерії прийнятності: від -48,0 до -51,0 при 20
• Визначення води, метод Ic <921>: NMT 0,2%
ДОДАТКОВІ ВИМОГИ
• Упаковка та зберігання: зберігати в добре закритих контейнерах при температурі від 2 до 8 ℃.
• Довідкові стандарти USP <11>
USP Орлістат RS
USP орлістат споріднена сполука A RS
USP Орлістат споріднена сполука B RS
USP орлістат споріднена сполука C RS
USP орлістат споріднена сполука D RS
USP Орлістат споріднена сполука E RS
USP35