Паклітаксел (таксол) CAS 33069-62-4 Аналіз (ВЕРХ) 97,0~102,0%

Паклітаксел
C47H51NO14 853,91
Бензенпропанова кислота, -(бензоіламіно)-гідрокси-, 6,12b-біс(ацетилокси)-12-(бензоїлокси)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -додекагідро-4,11-дигідрокси-4a,8,13,13-тетраметил-5-оксо-7,11-метано-1H-циклодека[3,4]бенз[1,2-b]оксет-9-іл складний ефір, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Додекагідро-4,6, 9,11,12,12b-гексагідрокси-4a,8,13,13-тетраметил-7,11-метано-5Н-циклодека[3,4]-бенз[1,2-b]оксет-5-он 6, 12b-діацетат, 12-бензоат, 9-ефір з (2R,3S)-N-бензоїл-3-фенілізосерином [33069-62-4].
Паклітаксел містить не менше 97,0% і не більше 102,0% C47H51NO14 у розрахунку на безводну речовину, що не містить розчинників.
[Обережно: паклітаксел є цитотоксичним.Необхідно бути дуже обережним, щоб запобігти вдиханню частинок паклітакселу та впливу на шкіру.]
Упаковка та зберігання. Зберігайте в щільних, світлостійких контейнерах і зберігайте при контрольованій кімнатній температурі.
Маркування. Маркування вказує на тип процесу, який використовувався для виробництва матеріалу, і тест на споріднені сполуки, якому відповідає матеріал.
Довідкові стандарти USP <11>-
USP Ендотоксин RS
USP Paclitaxel RS Натисніть, щоб переглянути структуру
USP паклітакселу споріднена сполука A RS
Цефаломанін.
USP паклітакселу споріднена сполука B RS
10-деацетил-7-епіпаклітаксел.
USP Paclitaxel Суміш домішок RS
Суміш паклітакселу та наступних споріднених сполук: аналог пропілу, цефаломанін, аналог втор-бутилу, аналог н-бутилу, аналог бензилу, баккатин VI, аналог пентилу та 7-епіпаклітаксел.
Ідентифікація-
A: Інфрачервоне поглинання <197K>.
B: Час утримування основного піку на хроматограмі препарату для аналізу відповідає такому в хроматограмі стандартного препарату, як отримано в аналізі.
Питоме обертання 781S: між 49,0 і 55,0 при 20, розраховане на безводній основі без розчинників.
Досліджуваний розчин: 10 мг на мл у метанолі.
Тести мікробного підрахунку <61> та тести на певні мікроорганізми <62> - Загальна кількість аеробних мікробів не перевищує 100 КУО на грам.Відповідає вимогам тестів на відсутність Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella, Escherichia coli.
Бактеріальні ендотоксини 85 – містить не більше 0,4 одиниці ендотоксину USP на мг паклітакселу.
Вода, метод Ic <921>: не більше 4,0%.
Залишок при прожарюванні <281>: не більше 0,2%.
Важкі метали, метод II <231>: 0,002%.
Споріднені сполуки-
тест 1 (для матеріалу, позначеного як ізольований із природних джерел) - якщо матеріал відповідає цьому тесту, маркування вказує на те, що він відповідає тесту 1 на споріднені сполуки USP.
Розчинник. Приготуйте, як зазначено в аналізі.
Розчин A-Приготуйте відфільтрований і дегазований ацетонітрил.
Розчин B-Підготуйте відфільтровану та дегазовану воду.
Рухома фаза. Використовуйте змінні суміші розчину A та розчину B відповідно до вказівок для хроматографічної системи.За необхідності внесіть коригування (див. Придатність системи в розділі Хроматографія 621).
Розчин для придатності системи. Розчиніть точно зважені кількості спорідненої сполуки A RS паклітакселу USP і спорідненої сполуки B RS паклітакселу USP у метанолі, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 10 мкг кожного на мл.Перенесіть 5,0 мл цього розчину в мірну колбу на 50 мл, розведіть розчинником до об’єму та перемішайте.
Стандартний розчин. Розчиніть за допомогою обробки ультразвуком точно зважену кількість USP Paclitaxel RS у розчиннику та розведіть кількісно та поетапно, якщо необхідно, розчинником, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 5 мкг на мл.
Тестовий розчин – використовуйте препарат для аналізу.
Хроматографічна система (див. Хроматографія <621>) - Рідинний хроматограф оснащений 227-нм детектором і колонкою 4,6 мм × 25 см, яка містить 5-мкм насадку L43.Швидкість потоку становить приблизно 2,6 мл на хвилину.Температуру колонки підтримують на рівні 30. Хроматограф програмують наступним чином.
Час (хвилини) Розчин A (%) Розчин B (%) Елюювання
0–35 35 65 ізократичний
35–60 35®80 65®20 лінійний градієнт
60–70 80®35 20®65 лінійний градієнт
70–80 35 65 ізократична хроматографія розчину для перевірки придатності системи та зафіксуйте пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносний час утримування становить близько 0,78 для спорідненої з паклітакселом сполуки A та 0,86 для пов’язаної з паклітакселом сполуки B (відносно часу утримування для паклітакселу, отриманого з Тестовий розчин);і роздільна здатність R між спорідненою з паклітакселом сполукою А та спорідненою з паклітакселом сполукою В становить не менше 1,0.Хроматографуйте стандартний розчин і запишіть пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносне стандартне відхилення для повторних ін’єкцій становить не більше 2,0%.
Процедура. Введіть об’єм (приблизно 15 мкл) досліджуваного розчину в хроматограф, запишіть хроматограму та виміряйте площі для основних піків.Обчисліть відсоток кожної домішки в порції паклітакселу за формулою:
100 (Пт / р.с.)
де F — відносний коефіцієнт відгуку для кожного піку домішок (значення див. у таблиці 1);ri – площа піку для кожної окремої домішки;і rU – площа піку для паклітакселу.
Таблиця 1
Відносний час утримування Відносний коефіцієнт відповіді (F) Назва Межа (%)
0,24 1,29 Баккатин III 0,2
0,53 1,00 10-деацетилпаклітаксел 0,5
0,57 1,00 7-ксилозилпаклітаксел 0,2
0,78 1,26 Цефаломанін (споріднена з паклітакселом сполука A) a11
0,78 1,26 2'',3''-дигідроцефаломаннін a21
0,86 1,00 10-деацетил-7-епіпаклітаксел (споріднена паклітакселу сполука В) 0,5
1,10 1,00 Бензиловий аналог3 b12
1,10 1,00 3'',4''-дегідропаклітаксел C b22
1,40 1,00 7-Епіцефаломаннін 0,3
1,85 1,00 7-Епіпаклітаксел 0,5
1 Розділення може бути неповним для цих піків залежно від наявних відносних кількостей;сума а1 і а2 не більше 0,5%.
2 Роздільна здатність може бути неповною для цих піків, залежно від наявних відносних кількостей;сума b1 і b2 становить не більше 0,5%.
3 Наступна хімічна назва присвоєна спорідненій сполукі, аналогу бензилу: 13-ефір баккатину III з (2R,3S)-2-гідрокси-3-феніл-3-(2-фенілацетиламіно)пропановою кислотою.
На додаток до неперевищення обмежень для домішок, пов’язаних з паклітакселом, у таблиці 1, виявлено не більше 0,1% будь-якої іншої окремої домішки;і не більше 2,0% загальної кількості домішок виявлено.
Тест 2 (для матеріалу, позначеного як вироблений напівсинтетичним процесом)— Якщо матеріал відповідає цьому тесту, маркування вказує на те, що він відповідає тесту 2 на споріднені сполуки USP.
Розріджувач - використовуйте ацетонітрил.
Розчин А. Використовуйте відфільтровану та дегазовану суміш води та ацетонітрилу (3:2).
Розчин В. Використовуйте відфільтрований і дегазований ацетонітрил.
Рухома фаза. Використовуйте змінні суміші розчину A та розчину B відповідно до вказівок для хроматографічної системи.За необхідності внесіть коригування (див. Придатність системи в розділі Хроматографія 621).
Розчин для придатності системи. Розчиніть точно зважену кількість USP Paclitaxel RS та USP Paclitaxel Related Compound B RS у розріджувачі, струшуючи та обробляючи ультразвуком, якщо необхідно, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 0,96 мг та 0,008 мг на мл відповідно.
Досліджуваний розчин. Перенесіть близько 10 мг паклітакселу, точно зважених, у 10-мл мірну колбу, розчиніть і розбавте розчинником до об’єму, струшуючи та обробляючи ультразвуком, якщо необхідно, і перемішайте.
Хроматографічна система (див. Хроматографія 621)— Рідинний хроматограф оснащений 227-нм детектором і колонкою 4,6 мм × 15 см, яка містить 3-мкм насадку L1.Швидкість потоку становить близько 1,2 мл на хвилину.Температуру колонки підтримують на рівні 35°С. Хроматограф програмують наступним чином.
Час (хвилини) Розчин A (%) Розчин B (%) Елюювання
0-20 100 0 ізократичний
20-60 100®10 0®90 лінійний градієнт
60-62 10®100 90®0 лінійний градієнт
62-70 100 0 ізократична хроматографія розчину для перевірки придатності системи та зафіксуйте пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносний час утримування становить приблизно 0,94 для спорідненої з паклітакселом сполуки B та 1,0 для паклітакселу;роздільна здатність R між спорідненою з паклітакселом сполукою В і паклітакселом становить не менше 1,2;а відносне стандартне відхилення для повторних ін’єкцій становить не більше 2,0%.
Процедура. Окремо введіть рівні об’єми (приблизно 15 мкл) розчинника та досліджуваного розчину в хроматограф, запишіть хроматограми та виміряйте площі для всіх піків.Не звертайте уваги на будь-які піки через розчинник.Обчисліть відсоток кожної домішки в порції паклітакселу за формулою:
100 (Пт / Рс)
де F — відносний коефіцієнт відгуку для кожної домішки (значення див. у таблиці 2);ri — площа піку для кожної домішки, отриманої з досліджуваного розчину;і rs є сумою площ усіх піків, отриманих з тестового розчину.
Таблиця 2
Відносний час утримування Відносний коефіцієнт відповіді (F) Назва Межа (%)
0,11 1,24 10-деацетилбакатин III 0,1
0,20 1,29 Баккатин III 0,2
0,42 1,39 Фотодеградант2 0,1
0,47 1,00 10-деацетилпаклітаксел 0,5
0,80 1,00 2-дебензоїлпаклітаксел-2-пентеноат 0,7
0,921 1,00 Оксетанове кільце відкрито, ацетил і бензоїл мігрували 2 x1
0,921 1,00 10-ацетоацетилпаклітаксел x2
0,941 1,00 10-деацетил-7-епіпаклітаксел (споріднена паклітакселу сполука B) x3
1,37 1,00 7-Епіпаклітаксел 0,4
1,45 1,00 10,13-бісайдчейнпаклітаксел2 0,5
1,54 1,00 7-ацетилпаклітаксел 0,6
1,80 1,75 13-тес-баккатин III 0,1
2,14 1,00 7-тес-паклітаксел 0,3
1 Розділення може бути неповним для цих піків залежно від наявних відносних кількостей;сума х1, х2 і х3 становить не більше 0,4%.
2 Наступні хімічні назви присвоєно спорідненим сполукам Фотодеградант;Оксетанове кільце розкрилося, ацетил і бензоїл мігрували;і 10,13-біссидчейн паклітаксел:
Фотодеградант
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-діацетилокси-5,13-дигідрокси-4,16,17,17-тетраметил-8-окса- 3-оксо-12-фенілкарбонілоксипентацикло[11.3.1.01,11.04,11.07,10]гептадек-15-іл
(2R,3S)-2-гідрокси-3-феніл-3-(фенілкарбоніламіно)пропаноат
Оксетанове кільце розкрилося, ацетил і бензоїл мігрували
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-діацетилокси-1,2,4,7-тетрагідрокси-8,12,15,15-тетраметил-9-оксо- 4-(фенілкарбонілоксиметил)трицикло[9.3.1.03,8]пентадек-11-ен-13-іл
(2R,3S)-2-гідрокси-3-феніл-3-(фенілкарбоніламіно)пропаноат
10,13-біссіднеланцюг паклітаксел
Баккатин III 13-ефір з (2R,3S)-2-гідрокси-3-феніл-3-(фенілкарбоніламіно)пропановою кислотою, 10-ефір з (2S,3S)-2-гідрокси-3-феніл-3-(фенілкарбоніламіно) )пропанова кислота
На додаток до неперевищення обмежень для домішок, пов’язаних з паклітакселом, у таблиці 2, виявлено не більше 0,1% будь-якої іншої окремої домішки;і не більше 2,0% загальної кількості домішок виявлено.
тест 3 (для матеріалу, позначеного як вироблений у процесі ферментації рослинних клітин) — якщо матеріал відповідає цьому тесту, маркування вказує на те, що він відповідає тесту 3 на споріднені сполуки USP.
Розчин А. Приготуйте відфільтровану та дегазовану суміш води та ацетонітрилу (3:2).
Розчин В. Приготуйте відфільтрований і дегазований ацетонітрил.
Рухома фаза. Використовуйте змінні суміші розчину A та розчину B відповідно до вказівок для хроматографічної системи.За необхідності внесіть коригування (див. Придатність системи в розділі Хроматографія 621).
Розчин для перевірки придатності системи – розчиніть суміш домішок паклітакселу USP в ацетонітрилі, за необхідності обробивши ультразвуком, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 1 мг на мл.
Стандартний розчин. Розчиніть точно зважену кількість USP Paclitaxel RS в ацетонітрилі, за необхідності обробивши ультразвуком, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 1 мг на мл.
Досліджуваний розчин. Перенесіть приблизно 10 мг паклітакселу, точно зваживши, у 10-мл мірну колбу.Розчиніть і розбавте ацетонітрилом до об’єму, за необхідності обробляючи ультразвуком, і перемішайте.
Хроматографічна система (див. Хроматографія 621)— Рідинний хроматограф оснащений 227-нм детектором і колонкою 4,6 мм × 15 см, яка містить 3-мкм насадку L1.Швидкість потоку становить близько 1,2 мл на хвилину.Хроматограф програмується наступним чином.
Час (хвилини) Розчин A (%) Розчин B (%) Елюювання
0-28 100 0 ізократичний
28-33 100®98 0®2 лінійний градієнт
33–58 98®10 2®90 лінійний градієнт
58-60 10 90 рівнократний
60-63 10®100 90®0 лінійний градієнт
63-70 100 0 isocraticChromatograph (Ізократична хроматографія) Розчин для перевірки придатності системи та зафіксуйте пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: роздільна здатність R між паклітакселом і бензиловим аналогом становить не менше 1,8.Хроматографуйте стандартний розчин і запишіть пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: відносне стандартне відхилення для повторних ін’єкцій становить не більше 2,0%.[примітка. З метою ідентифікації піків приблизний відносний час утримування наведено в таблиці 3. Відносний час утримання вимірюється порівняно з паклітакселом.]
Таблиця 3
Назва Відносний ліміт часу зберігання (%)
Пропіловий аналог1 0,54 0,2
Цефаломанін (споріднена паклітакселу сполука А) 0,76 0,5
втор-Бутиловий аналог2 0,81 0,2
н-Бутиловий аналог3 0,89 0,1
Бензиловий аналог 1,10 0,4
Баккатин VI 1,23 0,2
Пентиловий аналог4 1,31 0,2
7-епіпаклітаксел 1,51 0,4
1 Наступна хімічна назва присвоєна аналогу спорідненої сполуки пропілу: 13-ефір баккатину III з (2R,3S)-3-бутаноїламіно-2-гідрокси-3-фенілпропановою кислотою.
2 Наступна хімічна назва присвоєна спорідненому аналогу втор-бутилу: 13-ефір баккатину III з (2R,3S)-2-гідрокси-3-(2-метилбутаноїламіно)-3-фенілпропановою кислотою.
3 Наступна хімічна назва присвоєна спорідненому аналогу н-бутилу: 13-ефір баккатину III з (2S,3S)-2-гідрокси-3-(пентаноїламіно)-3-фенілпропановою кислотою.
4 Наступна хімічна назва присвоєна спорідненій сполукі-аналогу пентилу: 13-ефір баккатину III з (2R,3S)-3-(гексаноіламіно)-2-гідрокси-3-фенілпропановою кислотою.
Процедура. Введіть об’єм (приблизно 12 мкл) тестового розчину в хроматограф, запишіть хроматограму та виміряйте площі для всіх піків.Обчисліть відсоток кожної домішки в порції паклітакселу за формулою:
100(ri / rU)
де ri – відгук кожної окремої домішки;і rU — сума площ усіх піків, отриманих із досліджуваного розчину.На додаток до неперевищення обмежень для домішок, пов’язаних з паклітакселом, у таблиці 3, виявлено не більше 0,1% будь-якої іншої окремої домішки;і не більше 2,0% загальної кількості домішок виявлено.
аналіз-
Розчинник. Приготуйте суміш метанолу та оцтової кислоти (200:1).
Рухома фаза. Приготуйте відфільтровану та дегазовану суміш води та ацетонітрилу (11:9).За необхідності внесіть коригування (див. Придатність системи в розділі Хроматографія 621).
Стандартна підготовка. Розчиніть, за потреби обробивши ультразвуком, точно зважену кількість USP Paclitaxel RS у розчиннику та розведіть кількісно та поетапно, якщо необхідно, розчинником, щоб отримати розчин із відомою концентрацією приблизно 1 мг на мл.
Підготовка до аналізу. Перенесіть близько 10 мг паклітакселу, точно зважених, у 10-мл мірну колбу.Розчиніть у розчиннику, використовуючи ультразвукову обробку, якщо необхідно, розведіть розчинником до об’єму та перемішайте.
Хроматографічна система (див. Хроматографія <621>) - Рідинний хроматограф оснащений 227-нм детектором і колонкою 4,6 мм × 25 см, яка містить 5-мкм насадку L43.Швидкість потоку становить приблизно 1,5 мл на хвилину.Хроматографуйте стандартний препарат і запишіть пікові відповіді відповідно до вказівок для процедури: коефіцієнт хвоста становить від 0,7 до 1,3;а відносне стандартне відхилення для повторних ін’єкцій становить не більше 1,5%.
Процедура. Окремо введіть рівні об’єми (приблизно 10 мкл) стандартного препарату та препарату для аналізу в хроматограф, запишіть хроматограми та виміряйте площі для основних піків.Обчисліть кількість, мг, C47H51NO14 у порції паклітакселу, взятої за формулою:
10C(rU / rS)
де C — концентрація, у мг на мл, USP Paclitaxel RS у стандартному препараті;і rU і rS є піковими відповідями для паклітакселу, отриманими з препарату для аналізу та стандартного препарату відповідно.