Урсодезоксихолева кислота (UDCA) CAS 128-13-2 Аналіз 99,0~101,0%

УРСОДЕКСИХОЛЕВА КИСЛОТА
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
ВИЗНАЧЕННЯ
3α,7β-дигідрокси-5β-холан-24-ова кислота.
Вміст: від 99,0% до 101,0% (суха речовина).
ПЕРСОНАЖІ
Зовнішній вигляд: білий або майже білий порошок.
Розчинність: практично нерозчинний у воді, легко розчинний у етанолі (96%), малорозчинний у ацетоні, практично нерозчинний у метиленхлориді.
Т.пл.: близько 202 ℃.
ІДЕНТИФІКАЦІЯ
Перша ідентифікація: А.
Друга ідентифікація: B, C.
A. Інфрачервона абсорбційна спектрофотометрія (2.2.24).
Порівняння: Урсодезоксихолева кислота CRS.
B. Розгляньте хроматограми, отримані при дослідженні домішок C.
Результати: основна пляма на хроматограмі, отриманій з досліджуваним розчином (b), подібна за положенням, кольором і розміром до основної плями на хроматограмі, отриманій з розчином порівняння (a).
В. Близько 10 мг розчинити в 1 мл кислоти сульфатної Р. Додати 0,1 мл розчину формальдегіду Р і залишити на 5 хв.Додають 5 мл води Р. Отримана суспензія зеленувато-блакитного кольору.
ТЕСТИ
Питоме оптичне обертання (2.2.7): від + 58,0 до + 62,0 (суха речовина).
0,500 г розчиняють у безводному етанолі Р і доводять до 25,0 мл тим самим розчинником.
Домішка C. Тонкошарова хроматографія (2.2.27).
Суміш розчинників: вода Р, ацетон Р (10:90 об/об).
Тестовий розчин (а).Розчиніть 0,40 г досліджуваної речовини в суміші розчинників і розведіть сумішшю розчинників до 10 мл.
Випробуваний розчин (б).Розведіть 1 мл досліджуваного розчину (а) до 10 мл сумішшю розчинників.
Еталонний розчин (а).Розчиніть 40 мг урсодезоксихолевої кислоти CRS у суміші розчинників і розведіть сумішшю розчинників до 10 мл.
Розчин порівняння (б).Розчиніть 20 мг літохолевої кислоти CRS (домішка C) у суміші розчинників і розведіть до 10,0 мл сумішшю розчинників (розчин A).Розведіть 2,0 мл цього розчину до 100,0 мл сумішшю розчинників.
Розчин порівняння (с).До 5 мл розчину А додайте 10 мг хенодезоксихолевої кислоти CRS (домішка А) і розведіть сумішшю розчинників до 50 мл.
Пластина: ТШХ пластина силікагелю R.
Рухома фаза: кислота оцтова крижана Р, ацетон Р, метиленхлорид Р (1:30:60 об/об/об).
Застосування: 5 мкл.
Розвиток: понад 2/3 пластини.
Сушка: при 120℃ 10 хв.
Виявлення: негайно обприскати 47,6 г/л розчином фосфорно-молібденової кислоти Р у суміші 1 об’єму сірчаної кислоти Р та 20 об’ємів кислоти оцтової крижаної Р і нагріти при 120℃ до появи синіх плям на більш світлому фоні.
Придатність системи: контрольний розчин (c):
- на хроматограмі видно 2 чітко розділені основні плями.
Межа: тестовий розчин (a):
-домішка C: будь-яка пляма, спричинена домішкою C, не є більш інтенсивною, ніж основна пляма на хроматограмі, отриманій з розчином порівняння (b) (0,1 відсотка).
Споріднені речовини.Рідинна хроматографія (2.2.29).
Суміш розчинників: метанол Р, рухома фаза (10:90 об./об.).
Тестовий розчин.Розчиніть 60 мг досліджуваної речовини в суміші розчинників і розведіть сумішшю розчинників до 20,0 мл.
Еталонний розчин (а).Розчиніть вміст флакона з урсодезоксихолевою кислотою для придатності системи CRS (містить домішки A і H) в 1,0 мл суміші розчинників.
Розчин порівняння (б).Розведіть 1,0 мл досліджуваного розчину до 100,0 мл сумішшю розчинників.Розведіть 1,0 мл цього розчину до 10,0 мл сумішшю розчинників.
Колонка:
-розмір: l = 0,25 м, Ø = 4,6 мм;
-стаціонарна фаза: блокований октадецилсиліл силікагель дляхроматографія R (5 мкм);
- температура: 40℃ ± 1℃.
Рухома фаза: змішати 30 об’ємів ацетонітрилу Р, 37 об’ємів 0,78 г/л розчину натрію дигідрофосфату Р, доведеного до рН 3, фосфорною кислотою Р, 40 об’ємів метанолу Р.
Швидкість потоку: 0,8 мл/хв.
Виявлення: рефрактометр при 35 ± 1 ℃.
Ін'єкція: 150 мкл.
Час дії: у 4 рази більше часу утримування урсодезоксихолевої кислоти.
Ідентифікація домішок: використовуйте хроматограму, що постачається з урсодезоксихолевою кислотою, щоб перевірити придатність системи CRS, і хроматограму, отриману з розчином порівняння (a), щоб ідентифікувати піки через домішки A і H.
Відносне утримання відносно урсодезоксихолевої кислоти (час утримування = приблизно 14 хв): домішка H = приблизно 0,9;домішка А = близько 2,8.
Придатність системи: контрольний розчин (a):
-роздільна здатність: мінімум 1,5 між піками через домішки Н та урсодезоксихолевої кислоти.
Обмеження:
- домішка А: не більше ніж у 10 разів перевищує площу основного піку на хроматограмі, отриманій з розчином порівняння (b) (1,0 відсотка);
-неуточнені домішки: для кожної домішки не більше площі основного піку на хроматограмі, отриманій з розчином порівняння (b) (0,10 відсотка);
- загальна: не більше ніж у 15 разів перевищує площу основного піку на хроматограмі, отриманій з розчином порівняння (b) (1,5 відсотка);
- межа неврахування: 0,5 площі головного піку на хроматограмі, отриманій з розчином порівняння (b) (0,05 відсотка).
Важкі метали (2.4.8): максимум 20 ppm.
1,0 г відповідає тесту С. Приготуйте розчин порівняння, використовуючи 2 мл стандартного розчину свинцю (10 ppm Pb) Р.
Втрати при сушінні (2.2.32): максимум 1,0 відсотка, визначені на 1000 г шляхом сушіння в печі при 105 ℃.
Сульфатна зола (2.4.14): максимум 0,1 відсотка, визначена на 1,0 г.
АНАЛІЗ
0,350 г розчиняють у 50 мл етанолу (96%) Р, попередньо нейтралізованого до 0,2 мл розчину фенолфталеїну Р. Додають 50 мл води Р і титрують 0,1 М розчином натрію гідроксиду до рожевого забарвлення.
1 мл 0,1 М розчину гідроксиду натрію еквівалентний 39,26 мг C24H40O4.
ДОМІШКИ
Зазначені домішки: A, C.
Інші домішки, які можна виявити (наведені нижче речовини, якщо вони присутні на достатньому рівні, можуть бути виявлені за допомогою тих чи інших тестів у монографії. Вони обмежені загальним критерієм прийнятності для інших/невизначених домішок та/або загальною монографією Речовини для фармацевтичного використання (2034). Тому немає необхідності ідентифікувати ці домішки для демонстрації відповідності. Див. також 5.10.
Контроль домішок у субстанціях для фармацевтичного використання): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-дигідрокси-5β-холан-24-ова кислота (хенодезоксихолева кислота),
B. 3α,7α,12α-тригідрокси-5β-холан-24-ова кислота (холева кислота),
C. 3α-гідрокси-5β-холан-24-ова кислота (літохолева кислота),
D. 3α,7β,12α-тригідрокси-5β-холан-24-ова кислота (урсохолева кислота),
E. 3α,12α-дигідрокси-5β-холан-24-ова кислота (дезоксихолева кислота),
F. 3α-гідрокси-7-оксо-5β-холан-24-ова кислота,
G. метил 3α,7β-дигідрокси-5β-холан-24-оат,
H. 3β,7β-дигідрокси-5β-холан-24-ова кислота,
I. 5β-холан-3α,7β,24-тріол.