L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Assay >98,5% (HPLC) zavodi

L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl (H-Phe (4-NO2) -OMe · HCl) ni tahlil qilish usuli (CAS: 17193-40-7)
Tavsif: Taxminan 2 g namunani toza va quruq petri idishiga soling va namuna ko'rinishini kuzating.Hisobot: kuzatish haqida xabar bering
Identifikatsiya: HPLC yordamida xromatografik tozalikda olingan tizimning yaroqliligini aniqlash xromatogrammasidagi asosiy cho'qqining saqlanish vaqti bilan sinov preparatining xromatogrammasidagi asosiy cho'qqining saqlanish vaqti bilan solishtiring.
Quritishdagi yo'qotish: Shisha bilan qoplangan, sayoz tortish shishasini 105 ± 2 ℃ haroratda 30 daqiqa davomida quriting.Desikatorda xona haroratiga qadar sovishini kuting.Tarozi shishasini tiqin bilan aniq torting va og'irlikni (W1) yozib oling.Taxminan 1 dan 2 g gacha aniq tortilgan sinov moddasini tortish shishasiga o'tkazing.Yumshoq, yonma-yon silkitib, sinov namunasini iloji boricha teng ravishda taxminan 5 mm chuqurlikda taqsimlang.Yuklangan tortish shishasini torting va og'irlikni yozing (W2).Yuklangan shishani quritadigan pechga qo'ying, tiqinni olib tashlang va uni kamerada ham qoldiring.Sinov namunasini 105±2℃ haroratda 3 soat davomida quriting.Kamerani ochgandan so'ng, shishani darhol yoping va quritgichda xona haroratiga kelishini kuting.Tarozi shishasini tiqin bilan to'g'ri torting va og'irlikni qaytaring (W3).Quyidagi formuladan foydalanib, namunani quritishdagi yo'qotish foizini hisoblang:
Quritishdagi yo'qotishlarni hisoblash (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC tomonidan enantiomer tarkibi:
Kimyoviy va reaktivlar:
n-Heksan AR darajasi
Metanol HPLC darajasi
Izopropil spirti HPLC darajasi
Dietilamin AR darajasi
Standartlar: L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl standarti;L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl enantiomer standarti
Mobil faza: n-geksan, izopropil spirt, metanol va dietilaminning bir hil aralashmasini tayyorlang (65:20:15:0,1 v/v/v/v)
Blankni tayyorlash: 2,5 ml metanolni 10 ml o'lchov kolbasiga soling, harakatlanuvchi faza bilan hajmgacha suyultiring va aralashtiring.
Tizimning muvofiqligiga tayyorgarlik:
Aniq torting va L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl standarti va L-4-Nitrofenilalanin metil efir HCl standarti standartining har biridan taxminan 5 mg ni 10 ml o‘lchov kolbasiga o‘tkazing, taxminan 2,5 ml metanolda eritib, mobil qurilma bilan hajmgacha suyultiring. faza va aralash.
Sinovga tayyorgarlik:
Aniq torting va taxminan 5 mg namunani 10 mol o'lchov kolbasiga o'tkazing, taxminan 2,5 ml metanolda eritib, harakatchan faza bilan hajmgacha suyultiring va aralashtiring.
Instrumental parametrlar:
Asbob: HPLC injektor, nasos, UV detektori va magnitafon bilan jihozlangan
Ustun: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 m yoki ekvivalenti
Oqim tezligi: 1,0 ml/min
To'lqin uzunligi: 260 nm
In'ektsiya hajmi: 10 mkl
Ustun koven harorati: 25 ℃
Ish vaqti: 20 daqiqa
Jarayon
Quyidagi ketma-ketlikda aytib o'tilganidek, eritmalarni yuboring.Xromatogrammalarni yozib oling va mezonlarni tasdiqlang:
Inyeksiyalar tavsifi Inyeksiya soni mezonlari
Blank tayyorlash 1 L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl yoki enantiomerni ushlab turish vaqtida hech qanday shovqin cho'qqisi kuzatilmasligi kerak.
Tizimning yaroqliligiga tayyorgarlik 1 L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl va enantiomer cho'qqisi o'rtasidagi rezolyutsiya 2,0 dan kam bo'lmasligi kerak.
Sinovga tayyorgarlik 1 Namunadagi enantiomer tarkibini aniqlash uchun sinov xromatogrammasidan foydalaning.
Nisbiy saqlash vaqtlari:
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl 1.0
Enantiomer 1.11 haqida
L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl ni ushlab turish vaqti taxminan 9,8 minut.
Hisoblash: Sinov tayyorlashdan olingan xromatogrammada L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl va Enantiomer kutilayotgan barcha cho'qqilarni hisobga olmang.Hududni normallashtirish usuli bo'yicha namunadagi enantiomer tarkibi haqida xabar bering.
HPLC tomonidan kromatogrpak tozalik va aralashmalar:
Kimyoviy va reaktivlar:
Diammonium fosfat AR darajasi
Fosfor kislotasi AR darajasi
Metanol HPLC darajasi
Tozalangan suv
Standartlar
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl standarti
4-Nitro-L-Fenilalanin monohidrat standarti
Mobil bosqich-A
6,6 g diammoniy fosfatni 1000 ml tozalangan suvda eritib oling.Ushbu eritmaning pH qiymatini fosfor kislotasi bilan 6,0 ga sozlang.Filtr va gazsizlantirish.Eritmaning pH qiymatini o'lchashdan oldin pH o'lchagichni standart bufer eritmasi pH 4,01 va 7,00 bilan kalibrlang.
Mobil bosqich-B
Metanol HPLC darajasi
Tizimning yaroqliligiga tayyorgarlik
Aniq torting va har biridan taxminan 25 mg dan L-4-Nitrofenilalanin metil efir HCl standarti va 4-Nitro-L-fenilalanin monohidrat standartini 50 ml hajmli kolbaga o‘tkazing, eritib oling va metanol bilan hajmgacha suyultiring va aralashtiring.
Sinovga tayyorgarlik:
Aniq torting va taxminan 25 mg namunani 50 ml li o'lchov kolbasiga o'tkazing, eritib, metanol bilan hajmgacha suyultiring va aralashtiring.
Instrumental parametrlar:
Asbob: HPLC injektor, nasos, UV detektori va magnitafon bilan jihozlangan
Ustun: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 m yoki ekvivalenti
Oqim tezligi: 1,0 ml/min
To'lqin uzunligi: 265 nm
In'ektsiya hajmi: 20 mkl
Ustun koven harorati: 25 ℃
Ish vaqti: 45 daqiqa
Gradient dasturi
Vaqt (daq) Mobil Faza-A % Mobil Faza-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Jarayon:
Quyidagi ketma-ketlikda aytib o'tilganidek, eritmalarni yuboring.Xromatogrammalarni yozib oling va mezonlarni tasdiqlang:
Blank tayyorlash 1 L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl ni ushlab turish vaqtida hech qanday aralashuvchi cho'qqi kuzatilmasligi kerak.
Tizimning yaroqliligiga tayyorgarlik 1 L-4-Nitrofenilalanin metil Ester HCl cho'qqisi uchun qoldiq omili 2,0 dan kam bo'lmasligi kerak.
Sinovga tayyorgarlik 1 Xromatografik tozalik va aralashmalarni aniqlash uchun sinov xromatogrammasidan foydalaning.
Nisbiy saqlash vaqtlari:
L-4-Nitrofenilalanin Metil Ester HCl 1,0 (ushlash vaqti taxminan 11,4 minut)
4-Nitro-L-Fenilalanin Taxminan 0,4
Toluol Taxminan 2.3
Hisob-kitoblar:
Sinov tayyorlashdan olingan xromatogrammada, bo'sh tuzatishdan so'ng, toluol tufayli cho'qqiga e'tibor bermang.Xromatografik tozalik, 4-Nitro-L-Fenilalanin miqdori va namunadagi umumiy aralashmalar haqida hududni normallashtirish usuli bilan xabar bering.