Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-tert-Butyl-L-Serine Độ tinh khiết >98,5% (HPLC)

thủ tục kiểm tra
1. Ngoại hình
-- Kiểm tra trực quan
2. Độ tinh khiết (HPLC)
2.1 Dụng cụ
Sắc ký lỏng hiệu năng cao, đầu dò PDA.
Cân phân tích điện tử
2.2 Thuốc thử
Acetonitril (loại sắc ký), axit trifluoroacetic (loại sắc ký)
2.3 Điều kiện sắc ký
2.3.1 Cột: YMC-ODS-AM, 5 μl, 250x4,6 mm
2.3.2 Bước sóng phát hiện: INC220nm
Tốc độ dòng chảy: 1.0mL/phút
Cỡ mẫu:10 μl (tham khảo)
Chất pha loãng: axetonitril
Thời gian thu thập dữ liệu: 25.00 phút
2.4 Chuẩn bị pha động
Pha động A (0,1% nước axit trifluoroacetic): hấp thụ chính xác 2. Pha loãng axit trifluoroacetic Oml với nước thành 2000m1, trộn đều và khử khí;
Pha động B (0,1% axit trifluoroacetic acetonitril): hấp thụ chính xác 2,0ml axit trifluoroacetic được pha loãng thành 2000m1 với acetonitril, trộn và khử khí;
2.5 Chương trình gradient của pha động
Thời gian (phút) A% B%
0,00 90 10
13.00 10 90
18.00 10 90
18.01 90 10
23.00 90 10
2.6 Chuẩn bị dung dịch mẫu
Cân và hòa tan 0,1g mẫu với acetonitril và pha loãng thành 100ml, lắc đều để sử dụng hoặc cùng nồng độ.Chuẩn bị song song hai mẫu.
2.7 Xác định mẫu
Phân tích mẫu theo quy trình lấy mẫu sau:
Hơn 1 lần tiêm dung dịch trắng
giải pháp mẫu 1 mũi khâu 1#
1 mũi giải pháp mẫu 2#
2.8 Tính toán kết quả
2.8.1 Phương pháp chuẩn hóa diện tích pic được sử dụng để tính độ tinh khiết của HPLC bằng cách trừ đi khoảng trống.
2.8.2 Độ lệch trung bình tương đối của độ tinh khiết của hai kim không được lớn hơn 1%
2.8.3 Nếu kết quả của cả hai lần bơm đáp ứng tiêu chí chấp nhận thì độ tinh khiết trung bình được lấy làm kết quả cuối cùng.
3, Điểm nóng chảy - Dụng cụ đo điểm nóng chảy RY-1
4. Phương pháp phát hiện tổn thất khi sấy khô
4.1 Dụng cụ:
Tủ sấy nhiệt điện, một vạn cân.
4.2 Quy trình:
Trong bình cân phẳng có nắp miệng mài có khối lượng không đổi và sấy khô quá mức, cân 1 gam mẫu (chính xác đến 0,0001 gam).Mẫu phải được dàn đều dưới đáy bình cân với độ dày không quá 10 mm, cho vào tủ sấy điện có nhiệt độ không đổi, sấy ở nhiệt độ 105-110 ℃ trong 3 giờ, sau đó chuyển vào phòng sấy, để nguội đến nhiệt độ phòng và cân.
Cách tính: Mất trọng lượng khô %= (M1-M2) ÷M×100
Trong đó: M1: khối lượng mẫu và bình cân trước khi sấy, g
M2: Khối lượng mẫu và bình cân sau khi sấy, g
M: Khối lượng mẫu, gam
5. Luân chuyển cụ thể
-- Vòng quay cụ thể được đo theo GB/T613-1988
Chuẩn bị mẫu: Cân chính xác 0,5000g mẫu và chuyển vào bình định mức 50ml khô, sạch với 20ml Ethyl axetat.Chai được đóng nút và lắc để hòa tan Ethyl axetat.
Thử nghiệm: Điều chỉnh điểm 0 của con quay hồi chuyển trước khi thử nghiệm, sau đó đổ đầy dung dịch mẫu vào ống nghiệm, ghi lại Góc quay lệch và tính toán góc quay cụ thể của mẫu theo công thức sau.
[α]20/D= (r×50) ÷(L×W)
Ở đâu:
[α]20/D: Độ quay riêng của dung dịch mẫu ở 25℃
r: Quan sát chuyển động quay ở 25℃ đối với dung dịch mẫu
50: Chuẩn bị thể tích dung dịch mẫu (ml)
w: Trọng lượng mẫu (g)
L: Chiều dài ống quang học (dm)
6. Phân tích TCL
Chuẩn bị mẫu: Cân chính xác 0,5000g mẫu cho vào bình định mức 50ml khô, sạch, thêm 40ml EtoH vào, đậy nắp lọ và lắc cho tan hết, sau đó pha loãng đến cân bằng EtoH.
Chuẩn bị mẫu đối chứng: Cân chính xác 0,5000g mẫu cho vào bình định mức 50ml khô, sạch, thêm 40ml nước và 2 giọt axit clohydric 6N, đậy nắp lắc cho tan hết, sau đó pha loãng đến cân bằng Nước.Sau đó, lấy 0,5 chất lỏng trên và pha loãng với etanol trong chai thể tích 100ml thành mẫu đối chiếu có tỷ lệ dư lượng axit amin 1,0%.
10 mẫu microliter được lấy bằng ống tiêm lấy mẫu siêu nhỏ và các mẫu được đặt trên tấm silicon GF254.Các tấm điểm 5 microliter, 10 microliter và 15 microliter lần lượt được lấy để làm điểm so sánh.
Chất khai triển: n-butanol: axit axetic băng: nước =4:1:1.
Chất tạo màu: Dung dịch ninhydrin metanol 5%.
Thao tác tạo màu: đầu tiên dùng máy sấy tóc sấy khô tấm silica gel đã tạo màu, sau đó nhúng vào dung dịch ninhydrin metanol 5%, sau đó thổi khô và nung ở nhiệt độ cao trong lò điện để tạo màu.
Phán đoán: Nhìn vào thời gian lên màu của sản phẩm, kích thước điểm, nồng độ màu và so sánh với sản phẩm đối chứng, phán đoán rằng nó nằm trong phạm vi đó.